摘要: 目的：肝纤维化是各种慢性肝损伤的共同结果，肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的活化是肝纤维化形成的病理生理基础，而活化期HSC膜表面的6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ型受体（6-phospho- mannopyranoside/insulin like growth factor ... 展开 目的：肝纤维化是各种慢性肝损伤的共同结果，肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的活化是肝纤维化形成的病理生理基础，而活化期HSC膜表面的6-磷酸甘露糖/胰岛素样生长因子Ⅱ型受体（6-phospho- mannopyranoside/insulin like growth factor Ⅱ receptor，M6P/IGFⅡR）显著增加。本研究通过化学合成6-磷酸-α-D-对氨基苯基甘露糖苷（p-aminophenyl 6-phospho-alpha-D--mannopyranoside，PAP-M6P），以期探讨PAP-M6P对活化HSC增殖、细胞周期及细胞外基质（extracellular matrix，ECM）分泌水平的影响。 方法：①化学合成带有6-磷酸甘露糖（mannose-6-phosphate，M6P）基团、而不影响原有活性功能基团的靶向分子PAP-M6P，并经核磁共振谱鉴定分子结构及纯度。②接种培养活化表型的HSC-T6细胞株，分别以终浓度为300、400、500、600μg/ml的PAP-M6P共孵育24h、48h、72h，采用细胞增殖/毒性检测试剂CCK-8检测药物对细胞增殖的影响；流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测药物对HSC-T6细胞周期的影响。③酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）测定培养上清液中Ⅲ型前胶原（procollagen Ⅲ，PCⅢ）、Ⅳ型胶原（collagenⅣ，CⅣ）、透明质酸(hyaluronic acid，HA)的水平。 结果：①人工合成的PAP-M6P纯度在95%以上，达到合成要求。②各PAP-M6P处理组的药物浓度对HSC-T6的增殖均有明显的抑制作用（P＜0.05），且随着浓度的上升抑制率逐渐升高，并呈明显的时间依赖性。③各PAP-M6P处理组中G0/G1期细胞的比例随着PAP-M6P剂量增大而逐渐升高，S期比例则逐渐降低，与对照组比较有统计学差异（P＜0.05）。④各PAP-M6P处理组均能抑制HSC-T6分泌CⅣ（P＜0.05）；仅PAP-M6P 500、600μg/ml组PCⅢ含量显著减少（P＜0.05）；仅PAP-M6P600μg/ml组HA含量显著减少（P＜0.05）。 结论：①成功合成含有M6P基团的靶向载体分子PAP-M6P。②应用PAP-M6P能够抑制活化的HSC-T6进入细胞增殖周期，从而降低其增殖率，同时下调ECM的分泌水平。 收起