摘要: 目的：骨碎补是临床上常用的一味强骨中药，最近的研究发现它可以促进成骨细胞的增殖和分化。本实验旨在观察雌激素受体及MAPK、PI-3K信号通路在骨碎补促进成骨细胞增殖和分化过程中的影响。同时首次探讨骨碎补对成骨细胞OPG/RANKL系统表达的影响。 ... 展开 目的：骨碎补是临床上常用的一味强骨中药，最近的研究发现它可以促进成骨细胞的增殖和分化。本实验旨在观察雌激素受体及MAPK、PI-3K信号通路在骨碎补促进成骨细胞增殖和分化过程中的影响。同时首次探讨骨碎补对成骨细胞OPG/RANKL系统表达的影响。 方法：采用活细胞计数法和3H-DR掺入法观察骨碎补对小鼠成骨细胞系MC3T3一E1增殖的影响.碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性、骨钙素(osteocalcin，OC)和I型胶原的表达均采用ELISA法检测。使用茜素红染色法观察骨碎补对细胞矿化的影响，氯化十六烷基嘧啶提取染色茜素红，540 nm分光光度测定法测定提取液，量化矿化结节染色结果。用Western-blot检测护骨素(OPG)的蛋白表达量，用ELISA法检测NF-kB受体活化因子配体(RANKL)蛋白的分泌。 结果：(1)骨碎补可以促进MC3T3-E1细胞DNA的合成。(2)骨碎补可以增加细胞内ALP活性，促进I型胶原的合成和分泌，但对骨钙素的表达和分泌量无影响。(3)骨碎补可以促进成骨细胞的矿化。(4)雌激素受体拮抗剂ICI182780及ERK、PI-3K信号通路的阻断剂能抑制骨碎补促进MC3T3-E1细胞增殖的作用。(5)雌激素受体拮抗剂ICll82780及ERK、P38信号通路的阻滞剂能抑制骨碎补促进MC3T3-E1细胞ALP表达的作用。(6)通过Western-blot检测发现骨碎补可以促进OPG的表达。(7)ELISA方法证明骨碎补对RANKL的分泌无影响。 结论：骨碎补可以促进MC3T3-E1细胞的增殖，该作用是通过雌激素受体以及ERKMAPK、PI-3K信号通路介导的；骨碎补可以促进MC3T3-E1细胞的分化，该作用是通过雌激素受体以及ERKMAPK、P38MAPK通路介导的。骨碎补可以促进OPG的表达，但对于RANKL的表达无影响。 收起