摘要: 背景：氯氮平是第二代非典型性抗精神病药物，广泛地应用于临床，其临床疗效较好，但也伴随着许多副作用，其中最严重的副作用是体重增加。目前的解释是氯氮平对几种受体具有高度的亲和力，主要是通过阻断5-HT2C、多巴胺D2、组胺H1受体和促进5-HT1A受... 展开 背景：氯氮平是第二代非典型性抗精神病药物，广泛地应用于临床，其临床疗效较好，但也伴随着许多副作用，其中最严重的副作用是体重增加。目前的解释是氯氮平对几种受体具有高度的亲和力，主要是通过阻断5-HT2C、多巴胺D2、组胺H1受体和促进5-HT1A受体而引起摄食的增加。在分子水平上，氯氮平是否直接作用于脂肪细胞分化成熟过程中的转录因子以及与脂肪细胞特异性蛋白来发挥作用呢?目前尚不清楚。 目的：在细胞水平通过氯氮平对脂肪细胞分化成熟的影响以及它对脂肪细胞因子PPARγ、C/EBPα、ADD1/SREBP1C、LPL and DGAT1等基因表达的调控研究，阐明氯氮平诱导体重增加或肥胖的作用机制。 方法：1)细胞培养和分化：0％胎牛血清培养3T3-L1细胞，细胞完全融合融合两天后，含5μg/ml insulin、1μmol/L DEX和10mmonl/L IBMX的10％胎牛血清诱导细胞，2天换液一次。2)油红O染色：细胞促分化的同时加入氯氮平，用油红染色观察脂滴。3)运用RT-PCR以及western-blotting技术检测氯氮平和罗格列酮对3T3-L1细胞的PPARγ、C/EBPα、ADD1/SREBP1C、LPL和DGAT1基因mRNA和蛋白质表达水平的影响。4)用甘油三酯试剂盒检测3T3-L1细胞内甘油三酯的含量。 结果：1)3T3-L1细胞在不同剂量氯氮平刺激下，ADD1/SREBP1C的mRNA表达量增加随着氯氮平剂量增加而增加，在10μM时达到最高值，没有统计学意义；2)不同剂量氯氮平刺激下，LPLmRNA表达量增加随着氯氮平剂量增加而减少，在10、50、100μM处与对照组相比有显著性差异(P值分别为0.049，0.044，0.037)：3)3T3-L1细胞在不同剂量氯氮平刺激下，LPL蛋白表达量随着氯氮平剂量增加而减少，存在剂量依赖性。统计学分析显示10、50、100μM氯氮平组与对照组相比，明显减少LPL蛋白表达(P值分别为0.001，0.000，0.000)：4)不同剂量氯氮平对DGAT1蛋白表达无明显统计学意义；5)氯氮平处理组随着天数的增加明显减少LPL蛋白表达，氯氮平组随着天数的增加，其LPL蛋白表达量减少。各天数之间比较有统计学意义(P均为0.000)。对照组、罗格列酮组和DMSO组不同天数LPL蛋白表达量无显著性差异(P>0.05)；6)不同天数，对照组、氯氮平组、罗格列酮组和DMS0组对DGAT1蛋白表达量无明显统计学意义各剂量组间无显著性差异(P>0.05)；5)氯氮平和罗格列酮均能明显增加3T3-L1细胞内甘油三酯的生成，与对照组相比有统计学意义(P值均为0.000)，氯氮平组与罗格列酮组比较，明显增加3T3-L1细胞内甘油三酯的生成，有统计学意义(P=0.002)。 结论：氯氮平可以刺激3T3-L1细胞的ADD1/SREBP1C mRNA表达，同时抑制LPLmRNA和蛋白表达，存在剂量依赖性。氯氮平可能通过抑制LPL表达、减少甘油三酯分解、促进3T3-L1细胞脂滴的聚集，从而引起机体脂肪的增加导致肥胖。 收起