摘要: 目的：观察全反式维甲酸(all trans-retinoic acid，ATRA)对体外培养的球后成纤维细胞(retroocular fibroblasts，RF)增殖的影响以及ATRA诱导RF凋亡的作用。为ATRA应用于甲状腺相关眼病(Thyroidassociated ophthalmopathy，TAO)的治疗提供理论依据。 ... 展开 目的：观察全反式维甲酸(all trans-retinoic acid，ATRA)对体外培养的球后成纤维细胞(retroocular fibroblasts，RF)增殖的影响以及ATRA诱导RF凋亡的作用。为ATRA应用于甲状腺相关眼病(Thyroidassociated ophthalmopathy，TAO)的治疗提供理论依据。 方法：体外培养TAO患者RF细胞；将不同浓度的ATRA(0、10-9mmol/L、10-8mmol/L、10-7mmol/L、10-6mmol/L和10-5mmol/L)作用于RF细胞分别达24h、48h和72h后，于倒置相差显微镜下观察各时间段各组细胞形态学变化，并用噻唑蓝(MTT)比色法观察ATRA对细胞增殖的影响，采用流式细胞仪检测ATRA处理48h后细胞周期的改变及细胞凋亡的百分率；检测ATRA处理48h后细胞内bc1-2蛋白的表达水平。 结果：体外培养的球后成纤维细胞生长良好，传代稳定，细胞呈梭形或分枝状，细胞培养24h后，倒置相差显微镜下观察各组细胞形态均无明显变化。10-9mmol/L药物组即使在72h后细胞形态仍未发现显著改变。10-8mmol/L、10-7mmol/L药物组培养72h后及10-6mmol/L、10-5mmol/L药物组培养48h后，可观察到部分细胞形态发生改变，细胞散在分布，形态变得不规则且折光性减弱，胞浆中出现颗粒样物质：72h后，10-6mmol/L、10-5mmol/L药物组细胞轮廓明显加深，细胞老化，生长停滞。MTT法显示ATRA能降低RF细胞的光吸收值(A值)，细胞生长抑制率随作用时间和药物浓度的增加而增加。流式细胞仪检测ATRA作用于RF细胞后，将细胞周期阻滞在G1期；ATRA可诱导细胞的凋亡，随着浓度的增加凋亡率显著增高；流式细胞仪检测ATRA作用于RF细胞后bc1-2蛋白的表达水平较正常对照组细胞明显下调。 结论： 1.ATRA能够抑制RF细胞的增殖，其抑制细胞增殖作用具有时间和剂量依赖性； 2.ATRA是通过将细胞阻滞在细胞周期的G1期而起到抑制RF细胞增殖的作用； 3.ATRA可以诱导RF细胞凋亡，其诱导凋亡作用与下调细胞内bc1-2蛋白的表达有关。 收起