摘要: 芽孢杆菌是一类可以分泌外杆菌肽、大环内脂、环肽、类噬菌体颗粒等十几种抗菌活性物质，抗菌谱广泛，对多种病原菌的生长具有较强的抑制作用。本试验分为三部分，第一部分从健康牙鲆肠道分离的一株对鳗弧菌具有较强拮抗效果的芽孢杆菌(H-1)，对其进行... 展开 芽孢杆菌是一类可以分泌外杆菌肽、大环内脂、环肽、类噬菌体颗粒等十几种抗菌活性物质，抗菌谱广泛，对多种病原菌的生长具有较强的抑制作用。本试验分为三部分，第一部分从健康牙鲆肠道分离的一株对鳗弧菌具有较强拮抗效果的芽孢杆菌(H-1)，对其进行了鉴定；第二部分对芽孢杆菌(H-1)的表面粘附蛋白进行了研究，比较了粘附蛋白对健康和鳗弧菌感染状态下牙鲆肠粘液的粘附能力的差异；第三部分对这株芽孢杆菌粘附能力和拮抗能力的影响因子进行了研究。 1.从健康牙鲆肠道内分离到一株芽孢杆菌(H-1)，和鳗弧菌W-1株进行拮抗实验，结果表明该菌株对鳗弧菌具有较强的拮抗作用(抑菌直径D=25.53mm)。应用形态学、生理生化及16S rDNA序列分析方法对该菌株进行了综合鉴定，结果显示菌株H-1与枯草芽孢杆菌标准菌株同源性高达98％，故将其确定为Bacillus subtilis。 2.以枯草芽孢杆菌(H-1)为试验材料，应用5mol/L LiCl提取其表面蛋白，利用蛋白印迹法鉴定出在枯草芽孢杆菌表面蛋白中分子量为28.6kDa的蛋白质参与了健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液的粘附过程。同时蛋白印迹法显示，枯草芽孢杆菌全菌蛋白在健康和鳗弧菌感染牙鲆肠粘液中有一个相同的粘附受体，蛋白分子量为13.9kDa；健康个体还有一个粘附受体，分子量是28.9kDa。结果显示，不论鱼体健康与否，枯草芽孢杆菌都可以作为一种外源益生菌在牙鲆消化道内定植和重建其消化道微生态环境。 3.以枯草芽孢杆菌(H-1)为试验材料，研究了pH值、盐度、Ca2+、Mn2+对H-1的粘附能力和拮抗鳗弧菌效果的影响。结果表明pH值为7.0时，枯草芽孢杆菌的粘附能力和抑菌能力都最强；偏酸、偏碱都能减弱H-1的粘附能力和抑菌能力。盐度在20～40‰之间时枯草芽孢杆菌的抑菌能力随着盐度的升高而降低。盐度在20～35‰时，粘附力随着盐度的增加而升高，但超过35‰时，粘附力反而下降。在培养基中添加Ca2+可以增强枯草芽孢杆菌的粘附能力和抑菌能力，而添加Mn2+可以减弱这种粘附力和抑菌能力。 收起