摘要: 目的：研究松果体摘除及补充褪黑素对大鼠胸腺trkB表达的影响，探讨褪黑素阻止大鼠胸腺细胞凋亡是否通过调节trkB起作用；进一步了解松果体及褪黑素对trkB的影响是通过胸腺细胞直接起作用还是巨噬细胞间接起作用，或是二者共同作用。从而丰富神经一内... 展开 目的：研究松果体摘除及补充褪黑素对大鼠胸腺trkB表达的影响，探讨褪黑素阻止大鼠胸腺细胞凋亡是否通过调节trkB起作用；进一步了解松果体及褪黑素对trkB的影响是通过胸腺细胞直接起作用还是巨噬细胞间接起作用，或是二者共同作用。从而丰富神经一内分泌一免疫网络学说。 方法：①建立松果体摘除动物模型：选用2月龄雄性清洁级SD大鼠110只，分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素腹腔注射7．5mg·kg-I·day-I组和松果体摘除+褪黑素腹腔注射15mg·kg-I．day-1组，术后4、8周取材，松果体摘除组动物腹腔注射等量生理盐水。②应用RT-PCR方法及凝胶成像分析系统观察分析松果体摘除及补充外源性褪黑素后胸腺trkBmRNA量的变化；③应用免疫组织化学染色法和图像分析软件观察分析松果体摘除及补充外源性褪黑素后胸腺trkB阳性细胞的变化；④应用trkB和EDl免疫荧光双标染色和共聚焦激光扫描显微镜观察并分析松果体摘除及补充外源性褪黑素后胸腺双阳性细胞的变化。 结果：①与正常组、假手术对照组相比，松果体摘除后大鼠胸腺半定量RT-PCR的结果示trkBmRNA明显降低，提示松果体摘除后胸腺trkBmRNA的表达减弱，补充褪黑素后有所恢复，术后8周时高剂量组大鼠胸腺trkBmRNA的表达与正常对照组无明显差异；②与正常组、假手术对照组相比，松果体摘除后大鼠胸腺trkB免疫组化的结果显示阳性细胞数降低、阳性面积减少，提示松果体摘除后胸腺trkB的蛋白水平表达减弱，松果体摘除大鼠补充褪黑素后，胸腺trkB阳性细胞数呈时间依赖性恢复，术后8周低剂量组恢复正常，而trkB阳性面积在松果体摘除术后4周低剂量组就恢复正常。各组平均灰度无明显差异；③与正常组、假手术对照组相比，松果体摘除术后4周胸腺trkB与EDl免疫荧光双标染色结果显示双阳性细胞数降低、阳性面积减少，提示松果体摘除后胸腺trkB+ED1+巨噬细胞表达减弱，补充褪黑素后无变化，无论低、高剂量组均无法恢复正常。术后8周松果体摘除组与对照组相比上述指标均无明显差异，而低剂量组双阳性细胞表达异常增高，高剂量组恢复正常。各组平均灰度无明显差异。 结论：松果体及褪黑素在影响胸腺细胞分化发育过程中，胸腺表达的trkB随之发生变化，松果体摘除导致大鼠胸腺表达总的trkB合成和释放减少，而补充外源性褪黑素后能逆转上述异常。其间胸腺巨噬细胞表达的trkB也受松果体及褪黑素影响，其与胸腺细胞表达的trkB共同作用参与胸腺细胞分化发育。胸腺神经内分泌微环境的分泌调节是松果体及褪黑素保护胸腺细胞的通路之一。 收起