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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 本研究试图设计、筛选和确定能有效抑制肝癌细胞系survivin表达的反义复合物,进而探讨其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响;反义干扰survivin抗凋亡功能对肝癌细胞的细胞周期、细胞分裂和survivin亚细胞定位的影响,阐明过表达survivin在肝癌细胞增殖和凋亡界... 展开 本研究试图设计、筛选和确定能有效抑制肝癌细胞系survivin表达的反义复合物,进而探讨其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响;反义干扰survivin抗凋亡功能对肝癌细胞的细胞周期、细胞分裂和survivin亚细胞定位的影响,阐明过表达survivin在肝癌细胞增殖和凋亡界面角色及作用机制;探讨survivin基因表达与肝癌细胞耐药的关系及反义抑制survivin表达恢复耐药肝癌细胞系对阿霉素的敏感性,阐明反义寡核苷酸和阿霉素的联合应用,可能是将来耐阿霉素肝细胞癌临床治疗的一种合理策略;建立肝癌裸鼠模型,验证反义复合物对肝癌细胞裸鼠体内移植瘤的生长影响,为肝癌及survivin阳性肿瘤治疗提供新途径.结论1.筛选出最有效下调survivin在肝癌细胞表达的反义寡核苷酸序列Ⅲ(232-251),进而构建并优化了反义脂质体复合物(1:4),并鉴定其为最有效的复合物,确定了浓度-反应曲线.2.证实和明确survivin反义复合物有效下调肝癌细胞系HepG2 survivin的表达水平,抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡的作用假设.3.阐明了过表达survivin分子在肝癌细胞的增殖、细胞周期、细胞分裂(division)和凋亡等生命活动界面之间起着非常重要的整合和调控作用,增进对survivin抑制细胞凋亡和促进细胞增殖机制的理解,补充和完善survivin在肝癌细胞增殖和凋亡的界面机制.4.证实和明确survivin在肝癌细胞系HepG2表达上调与其耐药性密切相关.证明了反义复合物不仅使敏感细胞对化疗增敏,而且使耐药肝癌细胞系对原耐受药物恢复敏感性,达到真正意义上的逆转.其敏感性机制与激活caspase-3的活性,诱导细胞凋亡有关.5.建立了HepG2肝癌裸鼠模型,验证了局部瘤体注射反义复合物对肝癌细胞裸鼠体内移植瘤生长有明显抑制作用. 收起
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