摘要: 研究和应用相应的预防疫苗是预防HPV感染、降低宫颈癌发病率的方要措施之一.利用不同表达系统表达HPV主要衣壳蛋白L1并组装成病毒样颗粒(VLPs)是预防疫苗的主要方向.该研究采用杆状病毒表达系统,构建了含有突变型HPV16L1基因的重组体质粒pF<,AST>B<,A... 展开 研究和应用相应的预防疫苗是预防HPV感染、降低宫颈癌发病率的方要措施之一.利用不同表达系统表达HPV主要衣壳蛋白L1并组装成病毒样颗粒(VLPs)是预防疫苗的主要方向.该研究采用杆状病毒表达系统,构建了含有突变型HPV16L1基因的重组体质粒pF<,AST>B<,AC>HTb-L1(m202),并得到了重组杆状病毒Baculovirus-6×His-L1(m202),感染昆虫细胞sf9,表达了突变型HPV16主要衣壳蛋白L1(m202),经SDS-PAGE、Western-blot6×His-L1(m202)融合蛋白的表达.该研究还在sf9细胞中表达了原型HPV16L1.从SDS-PAGE的产量是否提高目前还需进一步实验证明.另外,利用表达载体pET30a,原型HPV16主要衣壳蛋白L1已在大肠杆菌BL21中获得高效表达,重组融合蛋白pET30a-6×His-L1已经过鉴定.该研究分别利用亲和层析和离子交换层析对重组L1蛋白进行了纯化方法的比较.以包涵体形式表达的重组蛋白经变性、层析、复性后均获得较高纯度. 收起