摘要: 目的： 以COPD模型大鼠的膈肌为标本，检测COPD病程中膈肌的相应变化，包括膈肌肌纤维分布，肌纤维中酶活性的变化，探讨COPD病程的不同阶段膈肌功能状态与疾病状态的相关性，揭示膈肌功能的变化规律。 方法： 选取健康雄性七周龄Wistar大鼠... 展开 目的： 以COPD模型大鼠的膈肌为标本，检测COPD病程中膈肌的相应变化，包括膈肌肌纤维分布，肌纤维中酶活性的变化，探讨COPD病程的不同阶段膈肌功能状态与疾病状态的相关性，揭示膈肌功能的变化规律。 方法： 选取健康雄性七周龄Wistar大鼠25只，体重180～220g，按体重随机分成五组，1．对照组(n=5)。2．COPD组(n=20)。在自制的密闭有机玻璃舱内用熏烟的方法制作大鼠COPD模型，在COPD组中包括四个组：A、COPD一天组(n=5)，模型制作成功后，第一天取材：B、COPD一月组(n=5)，模型制作成功后一个月取材：C、COPD二月组(n=5)，模型制作成功后两个月取材：D、COPD三月组(n=5)，模型制作成功后三个月取材。大鼠活杀，取膈肌做冰冻切片，利用肌球蛋白ATP酶(mATPase)法测定三磷酸腺苷脱氢酶(ATP酶)活性，三磷酸腺苷脱氢酶活性部位形成棕黑色硫化钴颗粒沉淀；测定琥珀酸脱氢酶(SDH)活性，琥珀酸脱氢酶活性部位呈紫蓝色沉淀，利用琥珀酸脱氢酶(线粒体氧化性的标志性酶)活性的差异，可以将肌纤维分为氧化型和酵解型两种类型，肌纤维染色深的是氧化型纤维，染色浅的是酵解型纤维。观察大鼠COPD不同病程膈肌纤维类型的适应性变化及酶活性变化，与健康对照组的大鼠膈肌进行比较，并且比较COPD不同病程组问的差异。统计分析采用SPSS13.0数据包分析，用单因素方差分析，若P<0.05，再进行q检验，比较每两组的组间差异，并在A,B,C,D四组中进行相关分析，比较干预因素与测量因素之间有无相关性。 结果： 1．COPD大鼠模型制作成功：肺组织HE染色切片，光镜下观察，其病理改变与人类慢性支气管炎、肺气肿相似。 2．与对照组比较，COPD组三磷酸腺苷脱氢酶活性有减少的趋势。 3．与对照组比较，COPD组琥珀酸脱氢酶活性有增加的趋势。 4．比较各组膈肌纤维类型的变化，统计分析结果显示： (1)COPD四组的氧化型纤维比例均显著高于对照组的(P<0.05)：酵解型纤维比例均显著低于对照组的(P<0.05)。 (2)COPD中A、B、C组间，均无显著性差异(P>0.05)，COPD中B、C、D组间，均无显著性差异(P>0.05)。 (3)COPD中D组的氧化型纤维比例显著高于A组(P<0.05)：D组的酵解型纤维比例显著低于A组(P<0.05)。 (4)COPD疾病的严重程度与氧化型纤维比例的相关分析结果：存在正相关(P<0.05)。 结论： 1．三磷酸腺苷脱氢酶是分解利用能量ATP的酶，研究结果显示COPD组的三磷酸腺苷脱氢酶活性倾向于低于对照组的，即ATP的利用率下降了。 2．琥珀酸脱氢酶(SDH)是线粒体氧化活动的标志性酶，研究结果显示COPD组的琥珀酸脱氢酶活性相对于对照组的有增加的趋势，表明线粒体的氧化能力增强。 3．然后经过分析表明COPD膈肌肌纤维的SDH/mATPase高于对照组相应的肌纤维的SDH/mATPase；以上这些结果证明了大鼠COPD膈肌纤维线粒体的氧化能力即产生ATP的能力相对于ATP的利用率是增加的。 4．根据膈肌纤维类型变化的统计分析结果，COPD初期膈肌氧化型纤维比例显著多于对照组，纤维类型倾向于由酵解型向氧化型转化，即膈肌纤维向着耐疲劳类型转化，说明膈肌的耐疲劳性增加。 5．COPD早期阶段，随着病程的进展，膈肌氧化型纤维比例不断增多，表明酵解型纤维转化为氧化型纤维，COPD严重程度与氧化型纤维比例的相关性分析说明这种转化是与COPD的严重性成正相关的，即随着COPD严重性的增加，转化的程度增大。 6．COPD早期阶段膈肌结构和酶学成分的变化，将成为COPD呼吸肌耐受疲劳的组织学基础。 收起