中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 吴新娜华中科技大学 2022年硕士导师: 徐承启共82页

摘要 : 血管内皮广泛存在于多个组织和器官中，在调节正常血管功能中起着重要作用。血管内皮功能障碍在心血管疾病、代谢性疾病、呼吸系统疾病，甚至是感染性疾病（如新冠肺炎）的发生发展进程中发挥着至关重要的作用。因此，深入研究血管内皮功能和内皮功能... 展开血管内皮广泛存在于多个组织和器官中，在调节正常血管功能中起着重要作用。血管内皮功能障碍在心血管疾病、代谢性疾病、呼吸系统疾病，甚至是感染性疾病（如新冠肺炎）的发生发展进程中发挥着至关重要的作用。因此，深入研究血管内皮功能和内皮功能障碍调节机制，对于全面了解内皮功能的调控机理，指导内皮细胞功能障碍相关疾病的靶向治疗和药物研发具有重要意义。 NINJ2是ninjurins家族成员之一，由188个氨基酸残基组成，主要定位于细胞膜，是一种细胞表面粘附分子，在人体内广泛表达，如神经细胞、淋巴细胞、脂肪细胞、血管内皮细胞等。群体遗传学研究包括全基因组关联分析显示NINJ2基因区域单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与缺血性脑卒中、冠心病等血管内皮功能障碍相关疾病风险相关，与NINJ2基因表达升高正相关的SNP等位增加上述疾病风险；且细胞水平研究显示NINJ2可调控血管内皮细胞激活，促进炎症反应，从而参与动脉粥样硬化发展进程。但到目前为止，NINJ2调控内皮功能及内皮功能障碍的详细机制，尤其是在体水平，缺乏研究。因此，本论文继续通过在体和离体水平，深入研究NINJ2调控内皮细胞功能及功能障碍的详细机制。首先，本研究利用Cre-LoxP系统构建NINJ2基因内皮特异性过表达（NINJ2-TGEC）小鼠，发现NINJ2基因在血管内皮组织中特异性过表达后，与对照（Rosa26）小鼠相比，Evans blue实验显示NINJ2-TGEC小鼠大脑、心脏、肺脏、肝脏以及肾脏等器官血管渗漏增加。同时，NINJ2-TGEC小鼠肺泡缩小或消失，肺泡隔明显增宽，管壁增厚，出现局部的纤维化，肺泡灌洗液蛋白浓度、肺湿干比重以及肺内皮血管渗漏都显著增加，提示肺血管内皮可能出现功能障碍。随后，免疫荧光实验发现NINJ2-TGEC小鼠肺血管内皮细胞的紧密连接蛋白ZO-1和粘附连接蛋白VE-cadherin表达显著降低，提示小鼠血管内皮细胞中高表达NINJ2后可能影响血管内皮完整性和通透性。细胞学也证实了上述结果，人脐静脉内皮细胞（HUVEC）中利用腺病毒介导NINJ2（Adv-NINJ2）高表达后，Transwell小室实验显示高表达NINJ2后HUVEC细胞的FITC-Dextran40偶联葡聚糖渗透性明显高于对照组。以上在体和离体水平的研究结果表明:高表达NINJ2会破坏血管内皮完整性，增加内皮细胞通透性。为进一步探究NINJ2调控血管内皮细胞完整性和通透性的详细机制，本论文研究了NINJ2与调控血管内皮细胞完整性和通透性核心通路VEGF/VEGFR2之间的关系。首先，相同浓度VEGF165刺激下，NINJ2-TGEC小鼠血管渗漏程度比Rosa26对照组小鼠更为严重，同样，在过表达NINJ2基因的HUVEC细胞中加入VEGF165刺激后，与对照组相比，Adv-NINJ2+VEGF165组内皮细胞通透性更高。其次，NINJ2-TGEC小鼠血管组织和HUVEC细胞中过表达NINJ2基因均可显著上调VEGFR2磷酸化水平，以及VEGF-VEGFR核心通路中的AKT、p65磷酸化水平和炎症因子ICAM-1蛋白表达水平。再次，NINJ2-TGEC小鼠中注射VEGF核心受体VEGFR2抑制剂Axitinib后，可以显著减轻NINJ2-TGEC小鼠肺损伤、减轻血管渗漏。HUVEC细胞中siRNA抑制VEGFR2表达后，也可显著阻滞因高表达NINJ2引起的内皮细胞通透性升高和AKT、p65的磷酸化水平的上升。最后，本论文还发现HUVEC细胞过表达NINJ2基因会促进活性氧的产生，增加内皮损伤，促进单核细胞到内皮细胞的粘附，抑制内皮细胞迁移。以上研究结果证实NINJ2可通过VEGF/VEGFR2信号通路，进而影响血管内皮功能、完整性及通透性。综上所述，本论文通过小鼠模型和细胞模型，从在体和离体水平，证实高表达NINJ2基因会增加VEGF/VEGFR2信号轴活性进而激活下游的AKT信号通路，促进活性氧产生以及单核细胞到内皮细胞的粘附，破坏内皮屏障完整性使血管通透性增加，导致内皮细胞功能障碍进而诱导血管渗漏的发生。以上研究结果初步揭示了NINJ2在调节内皮细胞功能和内皮功能障碍的详细分子机制，为了解内皮功能障碍相关疾病机理提供了新的认识和理论依据。收起

关键词 : 血管内皮功能血管内皮损伤 NINJ2基因调控机制

2. 人血管内皮抑素对血管内皮细胞及血管内皮瘤的调控作用机理研究

[学位论文] 郭立方兰州大学 2014年博士导师: 罗永章共96页

摘要 : 第一部分血管内皮抑素通过破坏细胞核内Zn(Ⅱ)稳态下调低氧诱导因子活性目的：低氧诱导因子(HIF-1α)通过调控一系列与血管新生和厌氧代谢相关的基因，在肿瘤的进展和侵润过程中起到了非常关键的作用。最近有文献报道，HIF-1α的转录水平可以被... 展开第一部分血管内皮抑素通过破坏细胞核内Zn(Ⅱ)稳态下调低氧诱导因子活性目的：低氧诱导因子(HIF-1α)通过调控一系列与血管新生和厌氧代谢相关的基因，在肿瘤的进展和侵润过程中起到了非常关键的作用。最近有文献报道，HIF-1α的转录水平可以被血管内皮抑素( endostatin)显著下调。但endostatin下调HIF-1α的分子作用机理至今仍不清楚。在本文我们揭示了核转运endostatin通过破坏锌离子平衡抑制HIF-1α的活性。方法：qRT-PCR和Westen Blot方法检测endostatin对HIF-1α的mRNA和蛋白水平影响；RNA干扰和过表达技术验证输入蛋白(importin) α1/β1和nucleolin在endostatin核转运中的重要作用；免疫共沉淀(Co-IP)实验验证endostatin中Zn(Ⅱ)在HIF-1α与共激活家族(CBP/p300)的结合方面是否有重要作用。结果：我们发现endostatin可以显著下调HIF-1α的mRNA和蛋白水平。在人脐静脉内皮细胞（HUVECs）敲低输入蛋白(importin) α1/β1或过表达核核定位缺失的人nucleolin蛋白，同时敲低鼠的nucleolin蛋白，可以显著降低endostatin对HIF-1α的抑制作用。另外，缺失Zn(Ⅱ)的核转运endostatin (apo-Endostatin)，而不是饱和Zn(Ⅱ)的核转运endostatin，可以显著抑制HIF-1α与共激活家族(CBP/p300)的结合，进而在转录水平降低HIF-1α的活性。结论：我们的结果揭示了核转运endostatin如何调控HIF-1α的活性，为进一步研究endostatin在内皮细胞的功能提供了一个崭新的思路。第二部分人血管内皮抑素通过下调CXCL1抑制血管内皮瘤生长目的：血管内皮瘤(hemangioendothelioma)在动物体内可以被各种抗新生血管因子抑制，但不知道这些抗新生血管因子是否直接作用于hemangioendothelioma。在本文我们揭示了血管内皮抑素( endostatin)抑制血管内皮瘤的作用机理。方法：用免疫组织化学(immunohistochemistry)的方法验证了hemangioendothelioma细胞表面表达endostatin的受体核仁素(nucleolin)和整合素（integrin）α5β1。分别用增殖、凋亡，和新生血管因子芯片实验验证endostatin对血管内皮瘤细胞系(EOMA)的作用。用组织芯片方法验证CXC趋化因子配体1(CXCL1)表达与hemangioendothelioma成正相关。结果：我们发现EOMA细胞表达endostatin的受体nucleolin和integrin α5β1。Endostatin虽然不能抑制EOMA增殖或在缺氧条件下不能诱导EOMA细胞凋亡，但它可显著下调EOMA细胞分泌的促新生血管因子。EOMA细胞分泌的促新生血管因子CXCL1可以促进内皮细胞迁移，而endostatin可以通过抑制核转录因子(NF-κB)在转录水平降低CXCL1表达。在体内，敲低CXCL1可以显著抑制EOMA细胞生长。当CXCL1敲低或过表达时，endostatin几乎对EOMA细胞的增殖没有影响。在病人的样本中，我们发现CXCL1的表达与hemangioendothelioma的发生有正相关性。结论：CXCL1在hemangioendothelioma病人组织切片中高表达，同时EOMA细胞分泌大量CXCL1诱发血管新生，在体内促进EOMA生长；而endostatin可以通过降低NF-κB活性抑制CXCL1的表达，进而抑制hemangioendothelioma。类似于endostatin这类可以在恶性hemangioendothelioma中下调CXCL1的药物很有可能成为一种有效的药物用来治疗恶性的皮肤病。收起

关键词 : 人血管内皮抑素血管内皮细胞血管内皮瘤低氧诱导因子细胞核Zn

3. 四物汤对血虚大鼠血管内皮损伤的干预作用

[学位论文] 钱志平山东中医药大学 2009年硕士导师: 秦林共43页

摘要 : 目的：探讨四物汤对血虚大鼠血管内皮损伤的影响作用，为阐述其“补血调血”的血管作用原理，揭示其“妇科第一方”的内在机制提供客观依据。方法：皮下注射乙酰苯肼（APH）造成血虚大鼠模型，观察血虚大鼠血色素、血流变、肺和肝组织的脏体比值... 展开

关键词 : 四物汤血管内皮损伤干预作用

4. 血管内皮生长因子及受体基因在局灶性脑缺血的表达及作用研究

[学位论文] 宫萍吉林大学 2002年硕士导师: 吴江共36页

摘要 : 目的:通过探索血管内皮生长因子及其受体基因在局灶性脑缺血中的表达,进而探求血管内皮生长因子在局灶性脑缺血中的作用.结论:在局灶性脑缺血早期VEGF及VEGFRS mRNA在神经细胞、胶质细胞、血管内皮细胞等均有表达,可促进缺血半影区的血管增生,对改善缺... 展开

关键词 : 血管内皮生长因子脑缺血受体基因血管内皮细胞

5. 血管内皮生长因子与妊高征发病的相关性研究

[学位论文] 程忠平上海交通大学 1999年硕士导师: 林其德共36页

摘要 : 为了进一步揭示妊高征的发病机制,该文采用ELISA和免疫组化及RT-PCR法对妊高征患者外周血、脐静脉血、胎盘蜕膜组织VEGF的表达和转录情况进行检测.结果发现,VEGF具有调控血管生发及维持血管内皮细胞和滋养细胞功能作用;因此认为,VEGF蛋白合成和分泌障... 展开

关键词 : 妊高征血管内皮生长因子血管内皮细胞缺血病机

6. gax基因过表达对自体移植静脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

[学位论文] 王为中国医科大学 2004年硕士导师: 段志泉共30页

摘要 : 目的:随着静脉移植在治疗冠心病和周围动脉缺血性疾病中的广泛应用,内膜增殖所引起的移植静脉狭窄成为影响术后远期效果的主要因素.Gax基因是近年来备受重视的与血管形成和生长有关的转录因子,该实验通过观察gax基因过表达对移植静脉血管平滑肌细胞(v... 展开目的:随着静脉移植在治疗冠心病和周围动脉缺血性疾病中的广泛应用,内膜增殖所引起的移植静脉狭窄成为影响术后远期效果的主要因素.Gax基因是近年来备受重视的与血管形成和生长有关的转录因子,该实验通过观察gax基因过表达对移植静脉血管平滑肌细胞(vascular smoothmuscle cells,VSMC)表型变化的影响,探索一种防治移植静脉再狭窄的治疗方法.结论:实验表明移植静脉重塑早期出现gax表达上调或过表达PCNA又称周期蛋白,其量可客观反映VSMCs增殖数量及分布.VSMC是构成血管壁的主要细胞之一,是决定血管活性与构型的重要因素,细胞表型转化(phenotype switch)是其重要的特征.血管内膜过度增生(intimal hyperplasia,IH)是以VSMC过度增殖病理改变为基础,而VSMC的增殖又取决于其表型转化状态.即IH与VSMC合成表型密切相关,gax基因通过细胞凋亡途径发挥作用可诱导VSMC凋亡.在gax基因过表达状态下显著诱导增殖型VSMC凋亡,从而使收缩表型VSMC相对增多,在一定程度上抑制了增殖型VSMC向内的迁移并相对减少细胞外基质的合成.该实验证明,1.通过RT-PCR和蛋白印迹杂交检测到移植静脉中gaxmRNA和蛋白表达均升高1倍,提示以重组腺相关病毒为载体,介导gax基因转染移植静脉组织获得成功,并能表达.2.通过电镜及PCNA检测观察到实验组血管组织中合成表型状态的VSMC显著减少,而收缩表型的VSMC相对升高表明移植静脉内以腺相关病毒为载体转染gax基因后,gax蛋白的过表达可调节VSMC的转化状态,可抑制VSMC自收缩型向合成型转化.3.以gax基因为靶点,可能在静脉移植后IH治疗中发挥重要作用.4.应用gax基因可抑制增殖型VSMCs并相对减少细胞外基质的合成,故可在IH中发挥抑制作用.其在血管组织受损致IH的病理演变的早期过程中表达水平出现一过性下调趋势,一周后又逐渐恢复至正常,它的低表达水平状态是引起细胞凋亡相对不足的因素之一.因此,在移植静脉重塑早期促进gax基因过表达是防治移植静脉再狭窄的多基因治疗手段中重要的候选者. 收起

关键词 : 移植静脉 gax基因血管内皮生长因子血管内皮细胞

7. 血管内皮抑制素的不同给药方法对肺腺癌和脐静脉内皮细胞的作用

[学位论文] 赵强第四军医大学 2014年硕士导师: 张贺龙共56页

摘要 : 在全球范围内，肺癌的发病率和死亡率均呈上升趋势，对人类健康造成重大危害。肺癌的治疗是目前临床肿瘤治疗中的重点与难点。随着肿瘤分子靶向治疗的发展，血管形成抑制剂的使用已成为肺癌治疗中的一个新的途径和手段，与其相关的理论与实践研究也成... 展开在全球范围内，肺癌的发病率和死亡率均呈上升趋势，对人类健康造成重大危害。肺癌的治疗是目前临床肿瘤治疗中的重点与难点。随着肿瘤分子靶向治疗的发展，血管形成抑制剂的使用已成为肺癌治疗中的一个新的途径和手段，与其相关的理论与实践研究也成为肿瘤治疗领域中最热门的课题之一。血管内皮抑制素（恩度）是目前临床上治疗肺癌的常用药物，虽然已经上市应用于临床多年，但对其最佳应用方法仍然未知，有待深入研究。本研究是在参阅相关文献后，改变血管内皮抑制素用药浓度以及用药频次，在细胞以及动物层面，对血管内皮抑制素抑癌结果进行分析，探讨血管内皮抑制素最合理治疗方法，为临床合理应用血管内皮抑制素提供相应的理论参考，最终使广大肺癌患者获益。目的：探讨不同给药方式下血管内皮抑制素对肺癌A549细胞、血管内皮细胞及BALB／c裸鼠移植瘤生长的影响。方法：用MTT法检测不同浓度的血管内皮抑制素对肺癌A549细胞和血管内皮细胞增殖情况的影响；构建BALB／c裸鼠肺癌A549细胞移植瘤模型，观察不同给药方式下移植瘤体积和重量的差异；应用免疫组化法检测各实验组移植瘤组织中CD31和CD34分子的表达差异。结果： 1、在不同浓度的血管内皮抑制素作用下，肺癌A549细胞的增殖能力并未随血管内皮抑制素浓度的增加而降低，仅在药物浓度为1μg/ml时与对照组相比较存在差异（P＜0.05）。 2、在不同浓度的血管内皮抑制素作用下，血管内皮细胞增殖能力的变化与对照组相比较均无统计学意义（P>0.05）。 3、在动物实验中，与对照组相比，单独应用血管内皮抑制素与血管内皮抑制素联合顺铂应用均能使移植瘤的体积有不同程度的缩小(P<0.05)，联合用药疗效优于单独应用血管内皮抑制素。 4、在动物实验中，单独应用血管内皮抑制素隔日给药肿瘤抑制率最高（50.74％），联合用药3周（血管内皮抑制素1/日+顺铂1/周）抑瘤效果最好(96.41％)。 5、免疫组织化学结果显示，与对照组相比，各实验组移植瘤组织中CD31和CD34分子的表达均下降(P<0.05)。结论：肿瘤的成长受其血管生成影响。血管内皮抑制素在细胞实验时，当浓度为1ug／ml时会抑制A549的成长，但脐静脉内皮细胞的发育不能被阻止。动物实验提示血管内皮抑制素与顺铂联合应用的抑瘤效果优于其单独应用。血管内皮抑制素联合化疗，每日连续给药抑瘤效果可能更好，由此对恩度的用药方案选择提供了相应的参考。收起

关键词 : 肺腺癌血管内皮抑制素血管内皮细胞 A549细胞给药方法

8. 西地那非在肺缺血再灌注损伤中的作用及其IL-6表达的影响

[学位论文] 杨聪哈尔滨医科大学 2008年硕士导师: 李野共45页

摘要 : 目的:通过兔肺缺血再灌注损伤实验,研究5型磷酸二酯酶抑制剂-西地那非在肺缺血再灌注损伤中的作用及其对IL-6表达的影响。方法:30只家兔(体重2000g±100g)随机分为实验组(n=10)、对照组(n=10)、假手术组(n=10),建立兔肺缺血再灌注损伤模型,实验... 展开

关键词 : 肺缺血再灌注损伤血管内皮细胞肺组织血管内皮粘附

9. VEGF、ENS、MVD在子宫腺肌病中的表达及意义

[学位论文] 刘燕广州医学院 2009年硕士导师: 康佳丽共40页

摘要 : 目的： 1．检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮抑素（ENS）、微血管密度（MVD）在子宫腺肌病（AM）患者子宫异位内膜、在位内膜以及正常子宫内膜细胞中的表达情况，分析AM中VEGF、ENS和MVD表达的差异及相关性，探讨VEGF、ENS及MVD在AM发生、... 展开目的： 1．检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮抑素（ENS）、微血管密度（MVD）在子宫腺肌病（AM）患者子宫异位内膜、在位内膜以及正常子宫内膜细胞中的表达情况，分析AM中VEGF、ENS和MVD表达的差异及相关性，探讨VEGF、ENS及MVD在AM发生、发展中的作用。 2．探讨AM患者月经过多、痛经等临床症状与VEGF、ENS、MVD表达的关系，为血管生成抑制剂在AM治疗中的临床应用提供一条新思路和循证医学的依据。材料与方法： 1．研究对象收集该院2007年4月至2008年10月在广州医学院附属广州市第一人民医院妇科住院行全子宫切除术经病理检查确诊为AM患者的病例51例（月经过多33例，月经正常18例，痛经31例，无痛经20例），取其异位子宫内膜为研究组A（增生期30例，分泌期21例），在位子宫内膜为研究组B（增生期27例，分泌期24例）。收集同期因慢性宫颈炎（宫颈重度糜烂和宫颈腺体囊肿）、CINⅡ在我院行宫颈leep刀环切术，除外合并子宫腺肌病、子宫内膜异位症、子宫肌瘤的病例，术前患者知情同意情况下行诊刮术留取子宫内膜，病理诊断为正常子宫内膜标本共40例作为对照组（增生期23例，分泌期17例）。所有病例均无其它特殊疾病史，术前3个月内均未使用过激素，且不合并其它内分泌或免疫系统疾病。研究组年龄38～50岁，中位年龄44岁，对照组年龄32～45岁，中位年龄41岁。两组患者的年龄、孕产史及宫腔手术操作史比较，差异无统计学意义。 2．方法采用免疫组化方法检测VEGF、ENS在AM患者异位内膜、在位内膜及正常对照子宫内膜中的表达情况，并应用血管内皮细胞的特异性标志物CD34标记微血管，观察其在上述组织中的表达，对微血管进行MVD计数，分析其表达差异及相关性。 3．统计学分析采用SPSS13．0统计软件进行数据分析。计量资料先行方差齐性检验，方差齐者采用两样本t检验、多个样本均数间的多重比较LSD-t检验，方差不齐者采用两样本t’检验、多个样本均数间的多重比较Dunnett's T3检验。相关性用Partial偏相关分析。检验水准α=0．05，方差齐性检验α=0．1。结果： 1．研究组A中VEGF、ENS、MVD、VEGF/ENS的表达明显高于研究组B及对照组，研究组B中VEGF、MVD、VEGF/ENS的表达明显高于对照组，差异均有统计学意义，而ENS的表达差异无统计学意义。 2．研究组A中VEGF、ENS、MVD、VEGF/ENS在增生期与分泌期的表达差异均无统计学差异；研究组B中VEGF、MVD、VEGF/ENS的表达分泌期高于增生期，但ENS的表达无统计学差异；对照组正常子宫内膜中VEGF、ENS、MVD、VEGF/ENS的表达均呈周期性，且分泌期高于增生期。 3．VEGF、VEGF/ENS与MVD的表达均成正相关，ENS与MVD的表达成负相关。 4．AM患者月经过多者在位内膜中VEGF、MVD、VEGF/ENS的表达高于月经正常者，但ENS的表达差异无统计学意义，是否痛经者与上述蛋白表达差异均无统计学意义。结论： 1、VEGF、MVD、VEGF/ENS在AM异位、在位内膜中的高表达，提示局部血供和新生血管形成与AM发病有关VEGF/ENS比值失调，VEGF的相对过度表达使得子宫内膜血管生成活性增加，局部血运丰富，促使其侵入子宫肌层并浸润生长。 2、AM月经过多患者在位内膜VEGF、MVD、VEGF/ENS的表达明显高于月经正常者，提示月经过多与子宫内膜血管生成活性增加、血运丰富有关。痛经可能与上述血管生成因子无关。收起

关键词 : 子宫腺肌病血管内皮生长因子血管内皮抑素微血管密度

10. 酪氨酸磷酸酶SHP2调控VE-cadherin转运和内皮屏障的研究

[学位论文] 张杰浙江大学 2017年博士导师: 程洪强共136页

摘要 : 血管内皮是一层选择性透过的屏障，控制着血浆成分渗透以及细胞穿越。内皮细胞与细胞之间的连接在维持和调控血管完整性中发挥关键作用，其中尤以黏连连接最为重要。黏连连接中的VE-cadherin(血管内皮钙粘蛋白)在胞内的转运对于血管发育、内皮完整性和... 展开血管内皮是一层选择性透过的屏障，控制着血浆成分渗透以及细胞穿越。内皮细胞与细胞之间的连接在维持和调控血管完整性中发挥关键作用，其中尤以黏连连接最为重要。黏连连接中的VE-cadherin(血管内皮钙粘蛋白)在胞内的转运对于血管发育、内皮完整性和血管的稳态非常重要。VE-cadherin在细胞膜上的稳定性受可逆磷酸化的调控。SHP2(Src同源酪氨酸磷酸酶2)是一个胞内广泛表达的非受体型酪氨酸磷酸酶。体外研究表明SHP2参与调控内皮屏障，但是其在体内的生理学机制依然不清楚。目的：探究SHP2调控内皮屏障的分子机制。方法:利用SHP2干扰慢病毒敲降内皮细胞中SHP2，然后通过免疫荧光、免疫印迹、免疫共沉淀、血管通透性实验以及生物素标记实验等方法研究内皮中SHP2对VE-cadherin的膜定位和VE-cadherin复合物稳定性的影响。同时利用Shp2内皮特异敲除小鼠作为模型，用石蜡切片HE染色(苏木素-伊红染色)、免疫荧光染色、整体包埋免疫组化染色、X-gal染色、透射电镜等方法研究SHP2的生理学机制。结果：在人脐带静脉内皮细胞中敲降SHP2或者抑制SHP2的酶活性会破坏VE-cadherin在黏连连接的定位，同时增加内皮通透性。SHP2缺失会导致ARF1(二磷酸腺苷核糖基化因子1)激活，激活的ARF1促进VE-cadherin内化。ARF1敲降和ARF1的激活抑制剂SecinH3均能显著降低SHP2缺失导致的VE-cadherin的内化。SHP2敲降导致MET(肝细胞生长因子受体)蛋白水平和磷酸化水平升高。敲降MET或者MET的抑制剂均能显著降低SHP2缺失导致的ARF1的激活和VE-cadherin的内化。说明MET激活对于SHP2敲降诱导的ARF1的激活和VE-cadherin的内化是必需的。此外内皮SHP2缺失小鼠出现胚胎弥漫性漏血和黏连连接处不规则的VE-cadherin定位。ARF1和MET抑制剂均能阻止SHP2内皮缺失导致的小鼠胚胎漏血，延长SHP2缺失小鼠的存活时间。结论：1.SHP2缺失导致内皮通透性升高。 2.SHP2缺失导致VE-cadherin内化。 3.ARF1介导SHP2缺失诱导的内皮屏障破坏。 4.MET介导SHP2缺失诱导的ARF1的激活。 5.Shp2内皮缺失小鼠胚胎弥漫性漏血，内皮连接破坏，同时VE-cadherin在膜上不连续分布。 6.ARF1和MET的抑制剂均能挽救Shp2内皮缺失导致的胚胎漏血表型，同时延长Shp2内皮敲除胎鼠的存活时间。收起

关键词 : 血管内皮屏障血管内皮钙粘蛋白转运酪氨酸磷酸酶内皮通透性