中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

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[学位论文] 禹飞中国林业科学研究院 2020年博士导师: 梁俊峰共170页

摘要 : 灰肉红菇是一种食药用外生菌根菌，可与栲、栎等壳斗科树种共生形成菌根，是一种非常重要的林下非木质林产品资源，目前还不能实现人工栽培。本研究以野外采集新鲜的灰肉红菇子实体及灰肉红菇根际的土壤作为研究对象，对灰肉红菇进行二代加三代全基因... 展开灰肉红菇是一种食药用外生菌根菌，可与栲、栎等壳斗科树种共生形成菌根，是一种非常重要的林下非木质林产品资源，目前还不能实现人工栽培。本研究以野外采集新鲜的灰肉红菇子实体及灰肉红菇根际的土壤作为研究对象，对灰肉红菇进行二代加三代全基因组测序分析，了解灰肉红菇基因组成及其潜在的功能;对灰肉红菇不同部位进行转录组测序和代谢组分析，了解代谢物积累和相关的基因在不同部位的差异表达，揭示其相关的营养代谢和共生机理;对灰肉红菇根际土壤开展微生物多样性分析，结合土壤理化性质，筛选有益的菌根辅助菌及生长因子;选择典型样地土壤开展宏基因组测序分析，分析与其生长相关的菌群及相应的功能，探讨灰肉红菇和根际微生物的协同共生机制。本研究利用多组学技术，对灰肉红菇进行多方面研究，旨在了解灰肉红菇的潜在功能、营养和药用价值及其共生机理，为灰肉红菇的可持续利用提供理论依据。本研究主要获得以下结果: (1)灰肉红菇基因组组装得到471个scaffolds，基因组大小为64.81Mb，GC含量为49.41％，共获得16128个蛋白编码基因。灰肉红菇基因组中存在大量与营养代谢、药用功能等相关的基因，还存在与共生相关的降解植物、真菌、细菌细胞壁酶等碳水化合物酶基因。基于灰肉红菇与已公布基因组的大型真菌的全基因组序列开展系统发育分析，结果表明灰肉红菇与所对比物种中红菇目的异担子菌和毛韧革菌为近缘物种。从灰肉红菇基因组中组装出灰肉红菇线粒体基因组，发现灰肉红菇线粒体基因组大小为60995bp，编码53个基因，其中包含14个蛋白编码基因。 (2)不同组织部位（菌根、菌柄、菌褶和菌盖）转录组测序总共获得到17911条基因，代谢组共检测到709个代谢物，其中多个基因和代谢物与灰肉红菇及其宿主共生体系的形成相关。推测Gene04979和Gene07798以及代谢物D(+)-无水葡萄糖、甘露糖、N-乙酰氨基葡萄糖与共生过程中细胞壁降解和合成寡糖相关，能被宿主植物识别并激活通用共生信号通路;Gene01852及代谢物对香豆酰五羟色胺己糖苷和阿魏酰色胺可能与生长素合成相关，它能抑制宿主植物主根生长，诱导宿主植物侧根的生成。 (3)灰肉红菇根际土壤细菌和真菌的多样性均比非根际土壤多样性低;灰肉红菇根际土壤真菌青霉属（Penicillium）、弯颈霉属（Tolypocladium）、棉革菌属（Tomentella）和茎霉属（Chaunopycnis）显著高于非根际土壤;根际土壤细菌伯克氏菌属（Burkholderia-araburkholderia）、分枝杆菌属（Mycobacterium）、Roseiarcus属、Candidatus_Xiphinematobacter属、堆囊菌属（Sorangium）、酸杆菌属(Acidobacterium)和Singulisphaera属显著高于非根际土壤，推测这些菌可能为菌根辅助菌，协助灰肉红菇与其宿主共生体系的形成。灰肉红菇喜好酸性土壤，土壤pH为3.99-4.55，根际土壤中有效氮、有效磷、有效钾及大部分根际土壤的有机碳的含量显著高于非根际土壤(p＜0.05);有效磷和海拔对灰肉红菇根际土壤真菌群落结构有显著影响;土壤pH、有机碳、有效氮、有效磷、有效钾对土壤细菌的群落结构有显著影响，特别是pH和有效氮。利用PICRUSt对土壤细菌进行KEGG功能注释，结果表明根际土壤细菌主要存在的功能为双组分系统、细菌趋化性、细菌分泌系统、酪氨酸代谢、不饱和脂肪酸生物合成、抗坏血酸和醛酸代谢、辅助因子和维生素的代谢，这些代谢通路的活性显著高于非根际土壤(p＜0.05)。 (4)灰肉红菇根际与非根际土壤宏基因组测序结果表明细菌在根际土壤中占主导地位，真菌及古菌等占比较少。灰肉红菇根际土壤微生物在能量转换、信号传导、物质运输代谢、降解植物及真菌细胞壁等功能方面显著高于非根际土壤，这也从功能方面说明根际微生物菌群可能协助灰肉红菇与其宿主共生体系的形成。土壤pH和AK对KEGG代谢通路有显著影响，土壤SOC和AN对CAZys有显著影响。收起

关键词 : 灰肉红菇基因组多组学特征根际微生物生长素

2. 灰肉红菇多组学共生特性研究

[学位论文] 刘远超华南理工大学 2022年博士导师: 吴清平共292页

摘要 : 灰肉红菇（Russula griseocarnosa）是产自广东、福建和云南等地的名贵外生菌根食药用菌，营养丰富、保健功效显著，深受市场欢迎，但由于其菌丝体和子实体严格依赖宿主植物才能生长，目前尚未实现人工驯化栽培，且由于研究所需菌丝材料的获得极为困难... 展开灰肉红菇（Russula griseocarnosa）是产自广东、福建和云南等地的名贵外生菌根食药用菌，营养丰富、保健功效显著，深受市场欢迎，但由于其菌丝体和子实体严格依赖宿主植物才能生长，目前尚未实现人工驯化栽培，且由于研究所需菌丝材料的获得极为困难，相关生物学基础研究停滞不前，严重制约了灰肉红菇的科学研究和产业化应用。本研究以灰肉红菇子实体、菌根及其生境土壤微生物为对象，采用现代分子生物学和高通量组学测序的手段，围绕灰肉红菇的共生特性开展了以下研究： 1.采用Illumina和PacBio平台测序技术得到了更为精细的灰肉红菇基因组，该基因组50.67Mbp，包含230个scaffolds，14229个编码基因；基于内转录间隔区（ITS）序列比较分析发现灰肉红菇产地存在着大量与灰肉红菇ITS序列不一致的样品，表明灰肉红菇的相近物种较多且肉眼难以区分。遗传多样性的研究表明：来自广东和福建的灰肉红菇存在着明显的遗传分化，群体单倍型网络分析显示广东、福建和云南三地的灰肉红菇明显分为2个聚类群，揭示了各地理群之间存在着基因交流；变异显著性分析显示各地理群体的灰肉红菇遗传变异主要来自种群内部。 2.针对新鲜灰肉红菇子实体开展ITS扩增子测序研究，共鉴定得到18个属的真菌，除红菇属外，相对丰度较高的真菌有菌寄生菌属（Hypomyces）、曲霉菌属（Aspergillus）、枝孢菌属（Cladosporium）等。连续四年的分离鉴定发现，同时存在于子实体和菌根组织中的淡紫拟青霉属（Purpureocillium）、拟盘多毛孢属（Neopestalotiopsis）、青霉属（Penicillium）及伞状霉属（Umbelopsis）真菌可能为灰肉红菇的生长和代谢起到促进作用。 3.基于比较基因组学研究，挖掘灰肉红菇的共生基因和碳水化合物酶特性，但未见具有共生效应的小型分泌蛋白以及具有共生调节和转运功能的小 RNA，推测灰肉红菇可能具有更为特殊的共生调节机制。相比于腐生真菌而言，灰肉红菇涉及到糖基键等水解酶活性、催化活性、丝氨酸类肽酶活性、跨膜转运蛋白活性，跨膜运输以及胞外组分等功能显著下调，同时灰肉红菇丢失了包括葡萄糖激酶、磷酸核糖焦磷酸激酶、半乳糖醛酸还原酶、半乳糖激酶、α-半乳糖苷酶等在内的关键糖代谢酶，揭示其难以在人工培养基上生长的原因。系统发育树揭示了各真菌的营养生态型与其亲缘及进化之间并未有明确的相关性。 4.土壤微生物群落分析表明灰肉红菇与非灰肉红菇生境微生物存在显著的结构差异，大豆慢生根瘤菌类（Bradyrhizobium japonicum、B. elkanii）、Chthoniobacter flavus、绿弯菌（Ktedonobacter racemifer）以及纤线杆菌（Ktedonobacter sp.）在灰肉红菇生境土壤中的相对丰度显著高于其他红菇以及对照土壤；土壤微生物功能分析表明灰肉红菇生境中具有几丁质结合功能的Carbohydrate-Binding Module 19显著升高，并且糖苷水解酶、糖基转移酶、碳水化合物脂酶、谷氨酰胺合成酶、NitT/TauT家族转运系统底物结合蛋白、DNA 导向的 RNA 聚合酶、麦芽糖α-D-葡萄糖基转移酶/α-淀粉酶显著增加，代谢通路分析显示涉及到能量代谢的丙酸代谢、细胞周期以及RNA聚合酶相关通路显著增加，或许为灰肉红菇的快速生长提供了能量支撑。 5.子实体的营养及微量元素检测结果表明，灰肉红菇富含蛋白质、脂肪、人体必需氨基酸及微量元素，其中砷元素含量高于常见的食用菌，需要进一步明确其砷元素存在的化合物形式以及其对灰肉红菇的生长和共生关系的建立所可能起到的作用。灰肉红菇菌根代谢组学的研究累计检测和注释到1422个代谢物，功能分析揭示这些代谢物主要富集到涉及能量、激素信号传导及免疫防御的代谢通路，为揭示共生机制指明了方向。本研究获得了较为精细的灰肉红菇的全基因组序列，为后续灰肉红菇的共生基因挖掘以及驯化研究奠定数据基础。明确了灰肉红菇的内生真菌种类，为灰肉红菇的分离和鉴定提供依据。大规模的比较基因组学研究揭示了灰肉红菇缺乏糖代谢相关的关键基因，为菌丝体的分离提供了参考。灰肉红菇菌根及生境微生物的研究揭示了宿主植物和潜在的促生菌可能为灰肉红菇的生长提供糖代谢相关酶，从而起到共生和促生的作用，为下一步灰肉红菇的人工扩繁和仿野生栽培提供理论基础。收起

关键词 : 灰肉红菇外生菌根真菌微生物群落共生特性

3. 灰肉红菇多糖的结构表征及其基于免疫调节的促造血功能研究

[学位论文] 刘鑫吉林大学 2023年博士导师: 王迪共219页

摘要 : 在临床上使用化疗药物时，常常会通过对正常细胞的基因组进行修饰从而引发机体的免疫抑制，甚至造血功能障碍，产生严重的副作用。目前常用的缓解免疫抑制或造血功能障碍的手段主要包括手术、化学合成药物治疗、细胞因子治疗，但是这些方法易引发机体... 展开在临床上使用化疗药物时，常常会通过对正常细胞的基因组进行修饰从而引发机体的免疫抑制，甚至造血功能障碍，产生严重的副作用。目前常用的缓解免疫抑制或造血功能障碍的手段主要包括手术、化学合成药物治疗、细胞因子治疗，但是这些方法易引发机体感染，药理作用不够明显，具有一定的局限性。食药用菌是天然来源的、具有多种药理活性且毒副作用小的大型真菌，其中多糖组分更是因具有构型丰富、多靶点等特点，常常用于功能性食品或药物的开发中。灰肉红菇（Russulagriseocarnosa）是一种外生菌根的食药用菌，主要分布在我国福建省等地。目前有研究显示，灰肉红菇中的多糖组分在体外实验中展示出良好的免疫调节能力，但是多糖的结构解析不够深入、同时其在动物水平的免疫调节活性及更深层次的促造血功能仍未见报道。因此，本研究以灰肉红菇为研究对象，对其中的多糖组分进行分离和纯化，探究不同多糖组分在结构组成上的差异，并结合免疫功能低下小鼠模型和造血功能障碍小鼠模型，探究灰肉红菇多糖缓解化疗所致的造血功能障碍的作用机制。首先，本研究分析了灰肉红菇中的主要成分组成，结果发现其中包含44.6%总膳食纤维、30.9%总蛋白、27.1%总糖、13.45%甘露醇、6.9%总灰分、2.8%粗脂肪、0.74%总生物碱、0.51%总多酚、0.43%总三萜、0.4%总皂苷、0.35%可溶性蛋白和0.3%总甾醇。同时还发现，其中含有谷氨酸等17种氨基酸，C15:0等6种脂肪酸，锰等8种矿物质元素，且重金属含量低于国家规定的菌物中重金属限量，证明灰肉红菇是一种物质组成丰富、多糖占比较高、且具有一定安全性的食药用菌。结合单因素实验和响应面设计，确定热水浸提法提取灰肉红菇多糖的提取条件：液料比30：1、提取温度80℃，提取时间3h，经Sevag法除蛋白、醇沉法得到其中的粗多糖组分，并结合层析法对不同的多糖组分进行分离和纯化，最终得到两种多糖组分，将它们命名为RGP1和RGP2。进一步结合分子量检测、单糖组成分析、色谱-质谱联用、核磁共振分析，确定两种多糖在结构组成上的差异：RGP1分子量为31.4kDa，主要由5种单糖组成，且摩尔比为半乳糖（Galactose，Gal）：3-O-甲基（Methyl，Me）-Gal：葡萄糖（Glucose，Glc）：甘露糖（Mannose，Man）：岩藻糖（Fucose，Fuc）=25.77：8.37：2.51：1.52：1.41，是以1,6-α-Galp为主链的半乳聚糖，在部分O-3位存在甲基取代，在部分O-2位存在α-Fucp取代、或与→6)-α-Galp-(1→或→6)-α-O-Me-Galp-(1→相连的α-Fucp取代；RGP2分子量为11.8kDa，主要由4种单糖组成，且摩尔比为Glc：Gal：Man：葡萄糖醛酸（Glucuronicacid，GlcA）=30.62：3.43：1.90：1.41，是以→6)-β-D-Glcp-(1→重复连接或与→6)-α-D-Galp-(1→连接为主链的葡聚糖，在→6)-β-D-Glcp-(1→的部分O-3位存在β-D-Glcp-(1→取代。结构分析的结果表明，RGP1和RGP2在结构组成上存在显著差异，这可能会导致二者药理活性的不同。接下来，在75mg/kg环磷酰胺构建的免疫功能低下小鼠模型中筛选RGP1和RGP2的免疫调节活性，结果显示，RGP1和RGP2均改善了模型小鼠脾脏指数的升高，缓解了脾小结生发中心的扩张以及中性粒细胞的浸润，恢复小鼠脾脏NK细胞的杀伤活性和T淋巴细胞转化能力；但是通过细胞因子检测发现，与RGP2相比，RGP1能够更加显著地提高免疫功能低下小鼠脾脏中免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM、白细胞介素（Interleukin，IL）-4、IL-6、干扰素γ、肿瘤坏死因子α等细胞因子的含量，由此可以发现，RGP1具有更好的调节免疫的能力。因此，进一步通过肠道菌群和血清代谢组学分析RGP1免疫调节的可能机制。肠道菌群的分析结果显示，RGP1能够显著调节模型组小鼠中Lactobacillus、Faecalibacterium、Odoribacter等菌属的丰度，肠道微生物介导的代谢通路更是直接富集在免疫调节上。此外，代谢组学的分析结果显示，RGP1显著改变了模型组小鼠中L-kynurenine、Uridine、Acetylcholine等20种代谢物的水平，且丰度显著改变的菌群与血清代谢物之间存在着显著的关联，深入探究作用机制发现，RGP1的免疫调节活性主要在于其对T细胞分化的调节。进一步，结合100mg/kg环磷酰胺构建的造血功能障碍小鼠模型探究RGP1的促造血活性和相关机制，结果发现，RGP1缓解了造血功能障碍小鼠体重的降低和脾脏指数的升高、以及模型组小鼠骨髓空泡化、排列稀疏等病理学变化，增加了模型组小鼠长期造血干细胞、活化的T细胞和分化簇（Clusterofdifferentiation，CD）4+T细胞的数量，调节外周血细胞的水平，而不影响小鼠骨髓中自然杀伤细胞和B细胞的数量，这些结果初步证明RGP1具有良好的促造血作用。通过蛋白质组学技术深入挖掘相关作用机制，结果发现组间显著改变的蛋白富集的通路主要集中在CD4受体结合、T细胞活化和造血调节之上，这与前面的结果一致。细胞因子检测的结果证实，RGP1促进了CD4+T细胞中造血相关细胞因子的分泌（IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等），而这些因子又会进一步激活酪氨酸激酶（Januskinase，JAK）/信号传导及转录激活因子（Signaltransducerandactivatoroftranscription，STAT）3通路，促进下游c-Myc的表达。总之，RGP1主要是通过促进CD4+T细胞的分化和JAK/STAT3通路发挥促造血活性。综上所述，本研究的结果表明：（1）灰肉红菇中富含多种营养成分和活性组分，且多糖含量较高，适用于多糖的提取和活性探究；（2）灰肉红菇中含有两种主要的多糖组分，且它们的分子量和结构组成差异较大；（3）与RGP2相比，RGP1具有更好的免疫调节活性，相关的机制可能与调节T细胞分化相关；（4）RGP1能够缓解化疗诱导的小鼠造血功能障碍，相关机制可能在于促进CD4+T细胞的分化并激活JAK/STAT3通路。本研究的结果将为临床上缓解化疗诱导的造血功能障碍、以灰肉红菇多糖为主成分的功能性食品或临床辅助药物的开发提供数据支持。收起

关键词 : 灰肉红菇多糖免疫调节造血功能结构表征 T细胞分化

4. 广东商品红菇形态和分子鉴定、营养成分分析及其生物活性研究

[学位论文] 陈新华中南大学 2010年博士导师: 邱冠周;周洪波共103页

摘要 : 广东梅州商品红菇属于红菇目红菇科红菇属，是一种美味的野生菌根性食用菌。该菇味道香甜，口感脆滑，在广东梅州地区有多年食用的历史，市场交易规模较大。红菇属真菌形态变异很大，以至于该属的分类一直比较混乱，广东梅州商品红菇的分类长期存在着... 展开广东梅州商品红菇属于红菇目红菇科红菇属，是一种美味的野生菌根性食用菌。该菇味道香甜，口感脆滑，在广东梅州地区有多年食用的历史，市场交易规模较大。红菇属真菌形态变异很大，以至于该属的分类一直比较混乱，广东梅州商品红菇的分类长期存在着争议。本论文通过野外生态因子调查，子实体、菌根、孢子等形态显微观察，结合：DNA中内部转录间隔区(ITS)及大亚基(LSU)序列分析，首次对广东梅州商品红菇进行形态学与分子学鉴定；进一步系统测定和分析了该商品红菇营养成分及功能成分；运用滤纸片扩散法评价了该红菇抗菌活性并通过GC—MS联用分析了该红菇挥发油及石油醚萃取物的化学成分：然后采用四种抗氧化测定方法评价了该红菇的抗氧化作用，检测了其抗氧化活性成分，研究了该商品红菇的抗氧化活性与黄酮和多酚含量的相关性，以及初步探讨其清除自由基的作用机理。主要研究内容和结果如下： 1)广东梅州商品红菇形态显微观察通过野外生态调查和显微镜技术分别对广东梅州商品进行了生态学和组织学研究。结果表明，广东梅州商品是一种外生菌根菌，在相对稳定的生态环境条件下，出菇的最适气温是24—32℃，相对空气湿度达80％～100％，土壤含水量达到40％以上，湿度是主导因子。每年在夏末秋初高温阵雨之后为发生盛期，发生地林间郁闭度0.9左右，土壤pH值3～4，其共生树种为壳斗科植物。广东梅州商品红菇颜色以红色为主，囊状体特别发达，菌肉灰色，菌髓为异型菌髓，担孢子近球形，孢子大小为8.55—10.29×10.65～11.01μm，孢子表面有脊状突起，其高度约1.14μm，宽0.57μm，相邻脊间最宽距离2.14μm。确证该商品红菇菌丝细胞与细胞连接处没有锁状联合。 2)广东梅州商品红菇分子鉴定实验采用核酸序列分析法，对采自广西浦北、福建上杭和广东梅州的8个商品红菇子实体的rDNA ITS(Internal Transcribed Spacer)以及28S rDNA区段进行克隆测序和序列特征比较分析，并对rDNA ITS序列进行核酸序列数据库GenBank同源性检索比对，将从GeneBank检索获得的相似物种rDNA ITS以及28S rDNA区段序列构建系统发育树。rDNAITS序列比较结果表明，8个红菇属菌株的rDNAITS序列长度为681 bp～699 bp，GC含量为48.56％～49.64％，子实体R1、R2、R3、R6和R8的rDNA ITS区段与GenBank中已知灰肉红菇(Russulagrmeocarnosa)的相似率达99％，其余几株与灰肉红菇的相似率低于95％。由此推断，从广西浦北和广东梅州隆文采集的商品红菇子实体是灰肉红菇，但在广东梅州、福建上杭产区可能存在多种食用红菇共同生长。对多种红菇属真菌的ITS序列和LSIU序列系统发育关系的研究表明，8株不同产地(来源)的红菇聚在一起，表明它们之间有相对较密切的亲缘关系。从ITS序列构成的系统发育树看，R1、R2、R6、R7与R.Griseocarnosa聚成一支，R3、R4、R5、R8与R.Emetica聚在一起。从LSU序列构成的系统发育树看，8个红菇属菌株与Russula vinosa聚成一支。无论是ITS序列还是LSU序列构造的发育树均证明所测的各菌株之间大多存在一定的变异。 3)灰肉红菇营养成分分析按照国家标准方法对采自广东梅州隆文灰肉红菇的一般营养成分进行分析，结果表明：菌盖和菌柄中粗蛋白，粗脂肪，粗纤维，灰分，还原糖，碳水化合物含量分别为32.31％，19.10％；7.17％，5.18％；8.85％，11.72％：7.84％，6.59％；2.11％，1.97％：49.10％，62.68％。采用氨基酸分析仪、原子吸收分光光度计、HPLC、GC/MS等方法对灰肉红菇的营养成分进一步分析结果表明：灰肉红菇子实体中含有磷、钾、铁、钠、钙、镁、锌等多种具有生理活性的矿物质元素。子实体菌盖和菌柄中K/Na比分别高达14.78和31.7。菌盖和菌柄中都含有7种脂肪酸，主要是油酸、亚油酸和棕榈酸，子实体菌盖中油酸含量最高，为47.92％;菌柄中亚油酸含量最高，为50.22％。全氨基酸分析表明含有17种氨基酸，菌盖和菌柄中氨基酸总量不同，分别占子实体干重的12.75％和8.98％。人体必需的7种氨基酸齐全(色氨酸未测)，菌盖和菌柄中必需氨基酸分别占氨基酸总量的46.04％和52.18％。 4)灰肉红菇抗菌活性利用滤纸片扩散法对灰肉红菇抗菌活性进行了研究并通过GC-MS联用分析了灰肉红菇挥发油及石油醚萃取物的化学成分。结果表明：灰肉红菇中挥发油对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌以及沙门氏菌均有明显的抑制作用。石油醚萃取物对金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌有明显的抑制作用。子实体乙醇提取物总体抑菌作用不明显。灰肉红菇挥发油中的主要化学成分为酮、烷烃、醛、烯烃等化合物，而石油醚萃取物主要成分为酸、酯、烯烃、醇等化合物。 5)灰肉红菇抗氧化活性的测定从还原能力、DPPH清除率等和对不同体系产生的活性氧自由基清除效果等方面对灰肉红菇提取物的抗氧化活性进行了试验研究和评价。结果表明灰肉红菇提取物具有较强的还原能力，对DPPH、Fenton反应产生的羟自由基的抑制作用或清除作用，以及通过螯合金属来抑制金属对脂质氧化的催化作用。通过抗氧化性与总酚和黄酮相关性分析表明：还原力与总酚含量相关 (R2=0.7831)，清除DPPH自由基与黄酮含量相关(R2=0.816)，还原力与黄酮含量相关(R2=0.8527)，可知黄酮的抗氧化能力主要体现在还原力上。 6)抗氧化活性成分的检测采用依利特Hypersil BDS-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm，5μm))，甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，SPM-M10AVP紫外检测器，25℃柱温，检测波长273 nm的高效液相色谱法对灰肉红菇提取物抗氧化活性成分-酚类物质进行定性定量检测。以5种不同黄酮类化合物和8种酚酸为对照品，检测出灰肉红菇中咖啡酸、槲皮素以及原儿茶酸3种抗氧化活性物质，其中以槲皮素的含量最高，达95.82μg/g。收起

关键词 : 灰肉红菇解剖结构系统发育树营养成分抗菌活性抗氧化活性

5. 广元灰鸡及其杂交组合生长性能、屠宰性能、肉品质的效果分析

[学位论文] 管红尔四川农业大学 2018年硕士导师: 刘益平；唐友海共81页

摘要 : 本试验旨在研究广元灰鸡纯繁及其杂交组合的生长性能、屠宰性能、肉品质，为广元灰鸡商业化生产提供一定的数据参考。本研究收集广元灰鸡♀×与隐性白羽肉鸡♂杂交组合(WG)、广元灰鸡♀×禽雁6号♂杂交组合(PG)以及广元灰鸡纯繁组(GG)各500枚蛋... 展开本试验旨在研究广元灰鸡纯繁及其杂交组合的生长性能、屠宰性能、肉品质，为广元灰鸡商业化生产提供一定的数据参考。本研究收集广元灰鸡♀×与隐性白羽肉鸡♂杂交组合(WG)、广元灰鸡♀×禽雁6号♂杂交组合(PG)以及广元灰鸡纯繁组(GG)各500枚蛋，孵化并饲养于四川省广元市朝天区四川天冠生态农牧有限公司养殖场，并且三个组合在饲养管理水平上保持一致，于90、120、150日龄对其的生长性能、屠宰性能、肉品质进行测定。结果如下: (1)羽色统计:三个组合中均是灰羽所占比例最高，其次是黑羽和麻羽。WG、PG、GG三个组合的灰羽比例分别是38.33％、42.00％、61.36％，GG组合的灰羽比例最高。 (2)繁殖性能:三个组合的受精率均达到了87％以上，受精蛋孵化率、健雏率也都达到了90％以上。WG组合的开产日龄最早，开产体重值最大为1882.55g，显著高于其他两个组合。 (3)生长性能:在1-28日龄时，三个组合增重差异均不显著。随着饲养日龄的增长，在28日龄后，WG组合的生长速度显著高于其他两个组合;PG和GG之间的差异不显著。 (4)体尺性状:三个组合的体尺性状均随着日龄增长而逐渐增加，在150日龄时为最大值。其中，WG组合各个阶段的值均大于其他两个组合;PG和GG的增长趋势基本一致，无显著差异。 (5)屠宰性能:90、120、150日龄WG和PG两个组合的屠宰率都在80％以上。150日龄时，GG组合母鸡的屠宰率仅有75.57％。总体来说，屠宰性能的各个指标均是WG大于PG大于GG，公鸡大于母鸡。腹脂率也随着日龄的增长而增加，且母鸡大于公鸡。 (6)肉品质:90、120、150日龄PG和GG两个组合各个日龄的含水量均在70％-75％。90、120日龄WG均低于70％;干物质含量则与粗水分含量相反。三个组合在90日龄时，肌肉的L值、a值和b值都为最大值，在150日龄时为最小值，且公鸡大于母鸡，腿肌大于胸肌;综合来看，三个组合在120日龄时L值最为适中，a值和b值也适中，肉色较优。随着日龄的增长，胸肌、腿肌的PH值均呈上升趋势，且公鸡大于母鸡，腿肌值大于胸肌，肌肉pH值均在6.0-6.5之间，三个组合之间差异不显著，且随着保存时间的延长，pH值均呈下降趋势。随着日龄的增长，WG组合与PG组合胸肌、腿肌的粗脂肪含量逐渐下降，GG组合呈上升趋势;且GG大于WG和PG，公鸡值均大于母鸡，腿肌值大于胸肌。粗蛋白含量随着日龄的增长，三个组合胸肌、腿肌值均呈下降趋势，胸肌大于腿肌，公鸡大于母鸡，GG均大于WG和PG。剪切力随着日龄的增长呈上升趋势，且腿肌值均大于胸肌，公鸡大于母鸡，WG大于PG大于GG。肌苷酸含量随着日龄的增长而增加，同一日龄时，母鸡均大于公鸡，腿肌值大于胸肌，PG大于WG大于GG。氨基酸含量也随着日龄的增长而增加，在150日龄时，三个组合的肉质鲜味最佳。同一日龄时，胸肌值大于腿肌，公鸡值大于母鸡;在氨基酸总量和最具鲜味物质的谷氨酸含量方面，WG大于PG大于GG。综合以上结果，PG组合较优，符合本试验的目的。既使广元灰鸡的生长性能得到了一定的提升，也使广元灰鸡的肉质得到了较好的保留。收起

关键词 : 灰鸡杂交组合生长性能屠宰性能肉品质

6. 广元灰鸡、旧院黑鸡生产性能的研究分析

[学位论文] 邓中勇四川农业大学 2016年硕士导师: 刘益平；杨朝武共63页

摘要 : 本试验旨在研究四川两个地方鸡种（广元灰鸡和旧院黑鸡）生产性能、屠宰性能、肉品质以及经济效益。为两个地方鸡种的产业化开发，提供数据支撑。本研究选择1日龄健康广元灰鸡、旧院黑鸡各1000只，于2015年5月-11月饲养于四川省广元市朝天区天冠... 展开本试验旨在研究四川两个地方鸡种（广元灰鸡和旧院黑鸡）生产性能、屠宰性能、肉品质以及经济效益。为两个地方鸡种的产业化开发，提供数据支撑。本研究选择1日龄健康广元灰鸡、旧院黑鸡各1000只，于2015年5月-11月饲养于四川省广元市朝天区天冠畜牧有限责任公司养殖场，分别于90、120和150日龄进行屠宰试验，测定其生产性能、屠宰性能、肉品质以及经济效益，并与已有报道的优质鸡相关数据进行比较分析。结果如下： (1)生产性能:不同日龄、品种间体重呈显著差异，优质鸡初生重41.04g和旧院黑鸡的39.56g显著高于广元灰鸡的33.94g。饲养日龄的增长，优质鸡的体重增长速度显著高于广元灰鸡和旧院黑鸡，120、150日龄广元灰鸡体重与旧院黑鸡差异不显著。料肉比方面，90日龄优质鸡料肉比3.13显著低于旧院黑鸡的3.98和广元灰鸡的4.26，90、120和150日龄旧院黑鸡的料肉比3.98、4.86和5.91显著低于广元灰鸡的4.26、5.34、6.12。 (2)屠宰性能:90、120和150日龄广元灰鸡和旧院黑鸡屠宰率均达到了85％以上，且150日龄全净膛率达到了57％以上。随着饲养日龄增长，广元灰鸡母鸡全净膛率从90日龄的59.72％升到150日龄的61.97％，旧院黑鸡母鸡全净膛率从90日龄的58.26％上升到150日龄的60.99％。不同日龄、品种其内脏器官也存在显著差异，内脏器官重量随日龄增长而增重，且公鸡大于母鸡，但皮脂厚与日龄无关。 (3)肉品质:广元灰鸡胸肌肉色方面，90日龄母鸡L值（亮度）最大为66.31，120日龄母鸡L值最低为58.81，150日龄L值大于90、120日龄，但差异不显著，广元灰鸡的亮度和黄度随日龄增长而升高，红度与日龄无关。随着日龄增长，旧院黑鸡亮度值、红度值和黄度值有降低趋势。广元灰鸡和旧院黑鸡胸肌、腿肌pH值从90日龄到150日龄均在5.71～6.45之间，胸肌pH值从90日龄的5.86上升到150日龄的6.13，表现出随日龄增加而升高，而腿肌与日龄呈负相关。剪切力随日龄增加而增大，公鸡高于母鸡，腿肌高于胸肌，其150日龄剪切力达到3163.95g和3410.90g。120日龄广元灰鸡胸肌粗水分含量达74.33％，150日龄广元灰鸡腿肌达76.69％，腿肌显著高于胸肌，随日龄增长有上升趋势;90日龄旧院黑鸡胸肌为71.77％，90日龄是旧院黑鸡腿肌为74.80％，腿肌高于胸肌，日龄对其变化无规律。广元灰鸡和旧院黑鸡胸肌、腿肌肌内脂肪含量随日龄增长而升高;而广元灰鸡和旧院黑鸡胸肌、腿肌蛋白质含量随日龄增长而下降，且他们均是母鸡含量高于公鸡，腿肌高于胸肌。广元灰鸡和旧院黑鸡胸肌、腿肌鲜味氨基酸含量和肌苷酸含量均随日龄的增长而升高，而鲜味氨基酸含量为公鸡高于母鸡，胸肌高于腿肌，肌苷酸含量为母鸡显著高于公鸡，腿肌高于胸肌。 (4)经济效益:根据本试验数据可知，这两种地方鸡适合较长天龄的饲养，满足活禽市场传统的消费习惯，农户也能有一定的收益。其中，经济效益最高的是120日龄广元灰鸡达到11.10元/只、120日龄旧院黑鸡达到13.31元/只。综上所述，广元灰鸡、旧院黑鸡生产性能、屠宰性能和肉品质均在150日龄时最好，而120日龄广元灰鸡和旧院黑鸡经济效益最佳。综合广元灰鸡、旧院黑鸡生产性能、屠宰性能、肉品质和经济效益，以120日龄做为上市日龄最合适，但生产者需根据自己的实际情况和市场的需求选择合适的上市日龄。收起

关键词 : 广元灰鸡旧院黑鸡生产性能屠宰日龄肉品质经济效益