中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 夏武峰四川农业大学 2010年硕士导师: 王小蓉共41页

摘要 : 悬钩子属RubusL.，是蔷薇科Rosaceae中的一个大属。全世界有悬钩子属植物750-1000种，中国有200多种，其中有130多种是特有种。我国西南地区是悬钩子属植物的多样性分布中心，拥有丰富的种质资源，其野生资源在各种抗性、易成活性、果实风味都优于从国... 展开悬钩子属RubusL.，是蔷薇科Rosaceae中的一个大属。全世界有悬钩子属植物750-1000种，中国有200多种，其中有130多种是特有种。我国西南地区是悬钩子属植物的多样性分布中心，拥有丰富的种质资源，其野生资源在各种抗性、易成活性、果实风味都优于从国外引进的栽培品种，具有重要的栽培价值和育种价值。本研究在形态学调查的基础上利用RAPD和ISSR分子标记技术对33份材料属空心莓组(Sect. Idaeobatus)属绒毛叶亚组(Subsect. Stimulantes Yu&Lu)的茅莓(R.parvifolius)16份、属柔毛叶亚组(Subsect. Pungentes(Focke)Yü&Lu)的插田泡(R. coreanus)16份以及新发现的疑似杂种1份（该杂种疑为茅莓×插田泡自然杂交所产生）进行了遗传差异分析和初步鉴定。主要结果如下： 1.通过优化反应体系，确立了茅莓和插田泡在ISSR分析中引物的最佳退火温度。即每个引物由于其碱基数目和组合的不同，退火温度有明显差异，但又与本身Tm值无规律可循，在筛选出的效果较好的引物退火温度范围在55.2-59.1℃，为ISSR技术在茅莓和插田泡中应用打下了基础。 2.从UBC#9（哥伦比亚大学开发的一套共100条ISSR引物）引物中筛选出12个多态性强、稳定性好、重复性高的ISSR引物，用于33份茅莓和插田泡的ISSR分析。扩增DNA片段长度在200-4000bp之间，多集中于400-2000bp之间。扩增DNA谱带总数358条，多态性条带339条，多态性达94.69%。得到了12个引物对33份茅莓和插田泡材料清晰的指纹图谱，能够充分鉴定种间和种内关系。 3.利用已筛选出的18条随机引物，对供试的33份茅莓与插田泡材料进行RAPD分析。扩增DNA片段长度在200-4000bp之间，多集中于400-2000bp之间。扩增谱带总数498条，其中多态性条带462条，多态性达92.77%。得到的清晰指纹图谱，亦能够充分鉴定种间和种内关系。 4.依据RAPD和ISSR标记数据，分别计算出33份茅莓与插田泡材料的遗传相似系数，并将供试材料划分为2大类。UPGMA聚类分析显示与形态学上分类结果基本一致。茅莓和插田泡各自种内的体现出一定的地理差异。 5.通过RAPD和ISSR分析，对疑似杂种的可能亲本进行了推定，认为该疑似杂种可能为茅莓和插田泡的自然杂种。 6.通过RAPD和ISSR对茅莓和插田泡种群遗传关系分析，RAPD和ISSR的重复性和稳定性得到了进一步验证，且ISSR比RAPD表现出更好的多态性，也为更好地利用DNA分子标记提供依据。收起

关键词 : RAPD标记 ISSR标记茅莓插田泡杂种鉴定

2. 利用RAPD,ISSR,SRAP标记方法对白桦遗传多样性的研究

[学位论文] 张晓蕾东北林业大学 2011年硕士导师: 魏志刚共77页

摘要 : 白桦(Betula platyphylla)耐寒性强、适应性好、生长速度快,是我国极为重要的山地造林树种之一,为了进一步提高白桦育种的效率和制定科学合理的种质资源保护策略,则就必要对其遗传多样性进行全面而系统的研究。本项研究通过不同标记技术研究了白桦遗传... 展开白桦(Betula platyphylla)耐寒性强、适应性好、生长速度快,是我国极为重要的山地造林树种之一,为了进一步提高白桦育种的效率和制定科学合理的种质资源保护策略,则就必要对其遗传多样性进行全面而系统的研究。本项研究通过不同标记技术研究了白桦遗传多样性,主要研究结果如下: 1、引物数量对白桦各遗传参数影响不同以含有20个个体的15个白桦种源为材料,研究了SRAP不同标记数量(5、7、9、11、13、15、17对)对白桦遗传多样性研究结果影响,结果表明:SRAP引物数量对揭示的白桦群体总位点数、多态位点数量、群体内与群体间遗传变异和基因流研究结果产生极显著和显著影响,而对多态位点百分率影响不显著。引物数量对不同种源遗传距离和聚类结果均产生一定影响。引物数量为4对和7对时,遗传距离最小的的种源分别是清源和宁夏与莫尔道嘎和桓仁,遗传距离最大的种源分别是凉水和乌伊岭与凉水和东方红,此时15个种源分别聚成4类,种源间亲缘关系也不同。而引物数量11对以上时,遗传距离大的种源均为凉水和草河口,遗传距离最小的种源均为莫尔道嘎和桓仁。同时,15个种源分别聚成5个进化群体,而每个进化分枝中包含的种源基本相同。 2、各种源样本容量对白桦遗传参数影响各异运用SRAP技术和17对引物,研究不同样本容量(每个种源含有4、8、12、16、20个个体)对白桦遗传参数的影响,结果表明:不同种源亲本容量对白桦遗传参数的影响不同,其中,样本容量对白桦群体多态位点百分率、群体内遗传变异和群体间遗传变影响显著,对总位点数、多态位点数和基因流影响不显著。样本容量对不同种源遗传距离和聚类结果均产生一定影响。每个种源个体数量超过8个时,遗传距离最小和遗传距离最大的种源均相同,而且15个种源的均聚成5个类群,每个类群中包含的种源也相同。每个种源数量为4个时,其遗传距最小的种源分别是清源和宁夏种源,遗传距离最大的种源是桓仁和乌伊岭种源,而且15个种源聚类成6个类群。 3、基于不同标记技术的白桦遗传多样性研究 (1)不同标记技术揭示的白桦遗传多样性结果不同分别采用15个RAPD引物、15个ISSR引物和15对SRAP引物对包含15个种源,每个种源含有20个随机个体的白桦群体研究多样性进行了研究,结果表明,引物数量相同和样本容量相同的情况下,不同标记种类得到的白桦群体遗传多样性参数不同。如RAPD共检测到186个位点,平均每个引物扩增出12.3个条带,多态位点数185,多态位点百分率99.46％。基因多样性Ht为0.2394,群体内基因多样性Hs为0.1948,群体间遗传多样性Gst为0.1862,81.37％的遗传变异存在于群体内,18.63％的遗传变异存在于群体间；ISSR共检测到127个位点,其中多态位点124个,多态位点百分率达到97.64％,总基因多样性Ht为0.3438,群体内基因多样性Hs为0.1892,55.03％的遗传变异存在于种群内,44.97％的遗传变异存在于种源间；SRAP共检测120个位点,其中多态位点118个,多态位点百分率达到98.33％,总基因多样性Ht为0.2623,群体内基因多样性Hs为0.1730,65.96％的遗传变异存在于种群内,34.05％的遗传变异存在于种源问。 (2)基于不同标记的白桦遗传多样性参数之间相关性不同 ISSR得到的各种遗传参数分别与SRAP与RAPD遗传参数之间呈显著或极显著相关(除SRAP与ISSR标记间有效等位基因数),而SRAP与RAPD标记得到的各种遗传参数相关性均不显著 (3)基于不同标记的白桦群体间的遗传距离和聚类关系不同标记反映的各种源间亲缘关系的远近和聚类结果不同。RAPD技术反映出辉山和草河口亲缘关系最近,ISSR为清源和宁夏,SRAP则为莫尔道嘎和桓仁种源；RAPD技术揭示的15个种源中,亲缘关系最远的两个种源分别为莫尔道嘎和新疆,ISSR为淖尔和新疆,SRAP则为淖尔和凉水；RAPD将15个种源划分为6个类群,而ISSR和SRAP则划分为5个类群,但各类群包含的种源却不相同。收起

关键词 : RAPD标记 ISSR标记 SRAP标记白桦遗传多样性

3. 大别山地区杜鹃遗传多样性的ISSR标记分析及SCAR标记开发

[学位论文] 张蓓林华中农业大学 2018年硕士导师: 干建平;王书珍共73页

摘要 : 本研究采用ISSR标记，分别对黄冈大别山地区不同地理位置生长的野生杜鹃（Rhododendron simsii Planch.）居群间的遗传多样性差异，以及罗田县黄狮寨林场不同坡向的杜鹃种群遗传多样性的差异进行了分析，并对杜鹃SCAR标记进行了开发，得出以下成果： ... 展开本研究采用ISSR标记，分别对黄冈大别山地区不同地理位置生长的野生杜鹃（Rhododendron simsii Planch.）居群间的遗传多样性差异，以及罗田县黄狮寨林场不同坡向的杜鹃种群遗传多样性的差异进行了分析，并对杜鹃SCAR标记进行了开发，得出以下成果：（1）大别山地区3个不同地理位置的野生杜鹃居群共扩增出132个位点，多态性位点共130个，其中多态性位点数量最多的是“吴家山”居群，共检测到 124 个多态性位点，比率高达 93.94 %；“五脑山”居群最少，检测到 102个多态性位点，比率仅为 77.27%。3 个居群内 Nei’s 基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）变化范围分别为0.3004-0.3495和0.4554-0.5187。3个居群内，Nei’s基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）最高的均为“吴家山”居群，分别为0.3495（h）和0.5187（I）；最低的是“狮子峰”居群，两项指数分别为 0.3004 （h）和 0.4554 （I）。居群总体水平上，Nei’s 基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）分别为0.3780和0.5596。3个野生杜鹃居群的总遗传变异程度（Ht）为0.3732±0.0112，群体内的遗传变异程度（Hs）为0.3078±0.0097，说明总的遗传变异主要来自于居群内。杜鹃居群间的遗传分化系数（Gst）为0.1752，检测到的所有遗传变异中，发生于3个居群之间的只有17.52%，其他 82.48%的遗传变异均发生于居群内部。68 个杜鹃样本的平均基因流（Nm）为2.3545。研究结果显示大别山地区野生杜鹃具有较高的遗传多样性水平。（2）3个不同坡向杜鹃居群内多态性位点数最多的是北坡和南坡，均检测到33个位点，多态性比率高达86.84%；西坡最少，仅检测到26个位点，多态性比率仅为68.42%。3个居群内Nei’s基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）变化范围分别为0.2170-0.2954和0.3298-0.4409。居群总体水平上，Nei’s基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）分别为0.2750和0.4238。3个居群内，Nei’s基因多样性指数（h）和Shannon信息指数（I）最高的均为南坡群体，指数分别为0.2954和0.4409；最低的是西坡群体，指数分别为0.2170和0.3298。3个居群内总遗传变异Ht为0.2689±0.0284，其中发生于居群内的遗传变异Hs为0.2527±0.0254，居群间遗传分化系数Gst为0.0601。居群间的遗传变异程度非常小（6.01%），几乎所有遗传变异（93.99%）都存在于3个杜鹃居群的内部。10个ISSR引物检测到的平均基因流Nm为7.8196，居群间如此频繁的基因流动可以高效降低种群由于遗传漂变而造成的分化。（3）选取了2个ISSR标记引物中的特异性条带，并以此为基础向SCAR标记进行转化，共设计SCAR标记引物2个，扩增结果表明SCAR标记引物保持了转化前ISSR标记引物的位点多态性，转化成功。本研究探究了大别山地区野生杜鹃种群遗传多样性的现状以及坡向对杜鹃遗传多样性的影响，阐述了大别山野生杜鹃的遗传分化程度，丰富了研究案例，并探索了ISSR标记向SCAR标记的转化，丰富了杜鹃花SCAR标记的研究，为大别山地区野生杜鹃资源遗传多样性的保护以及可持续开发与利用提供科学依据。收起

关键词 : 杜鹃遗传多样性 ISSR标记 SCAR标记

4. 甜橙种质资源的ISSR标记研究

[学位论文] 黄晓丹浙江大学 2006年硕士导师: 应铁进共51页

摘要 : 本研究以重庆果树研究所提供的22个甜橙(Citrussinensis(L.)Osbeck)样品为材料，利用ISSR标记对其进行种质鉴定。主要研究结果如下： (1)获得了一种省时、简便的适用于ISSR-PCR扩增的甜橙基因组DNA提取的方法。通过该法提取甜橙基因组DNA所需时间... 展开

关键词 : 甜橙 ISSR标记分子标记种质鉴定种质资源

5. 不同重金属污染经历的玉米（Zea mays L.）种群的遗传结构变化与分子生态分化

[学位论文] 郭涛云南大学 2002年硕士导师: 段昌群共71页

摘要 : 利用RAPD、ISSR、SSR三种分子标记方法分析了易地种植条件下生长的CK、S、M及L的遗传结构的变化及分子生态分化.利用POPGEN32软件包分析不同种群的多态条带比率（PPB）、单位引物条带条带数,并计算基于各引物条带表型的Shannon多样性指数;计算观测等位... 展开

关键词 : 玉米遗传结构 RAPD SSR ISSR 分子标记 RAPD分析 ISSR分析

6. 分子标记技术在小麦抗白粉病育种及指纹图谱分析中的应用研究

[学位论文] 王心宇南京农业大学 2000年博士导师: 陈佩度共113页

摘要 : 分子标记技术是80年代中期以来随着分子生物学理论与技术的飞速发展建立起来的以遗传物质NDA为基础的新型的遗传标记体系,虽然其产生只有十几年时间,但已广泛应用于遗传育种领域,如构建分子遗传图谱、进行基因标记和基因克隆,重要农艺性状的标记辅助选... 展开

关键词 : 分子标记分子标记辅助选择抗性基因 RAPD标记 ISSR标记

7. 应用表型性状、ISSR和SRAP进行矮牵牛自交系亲缘关系的研究

[学位论文] 叶为华中农业大学 2007年硕士导师: 包满珠共44页

摘要 : 矮牵牛(Petunia hybrida)，原产于南美洲，一年或多年生草本花卉，是茄科矮牵牛属植物，普遍应用于花坛配置。矮牵牛有很强的杂种优势，进行矮牵牛自交系亲本的亲缘关系分析，可以为矮牵牛的亲本选配和杂种优势预测提供理论依据。本研究采用了形态标记... 展开

关键词 : 矮牵牛自交系亲缘关系形态标记 ISSR标记 SRAP标记

8. 7种重要养殖鱼类的同工酶和ISSR分析

[学位论文] 吴兴兵南京师范大学 2006年硕士导师: 许璞;杨家新共52页

摘要 : 以取自江苏水域的7种重要养殖鱼类，青鱼(Mylopharyngodon piceus)、草鱼(Ctemryngodon idellus、鲢鱼(Hypothalmichthys molitrix)、鳙鱼(Aristicflthysnobilis)(以下简称四大家鱼)、团头鲂(Megalobrama amlycephala)、翘嘴红鮊(Eryhroculterilishac... 展开以取自江苏水域的7种重要养殖鱼类，青鱼(Mylopharyngodon piceus)、草鱼(Ctemryngodon idellus、鲢鱼(Hypothalmichthys molitrix)、鳙鱼(Aristicflthysnobilis)(以下简称四大家鱼)、团头鲂(Megalobrama amlycephala)、翘嘴红鮊(Eryhroculterilishacformis)和鳜鱼(Siniperca chuatsi)为研究对象，先后进行了同工酶和ISSR遗传标记的研究。在同工酶遗传标记方面，对7种鱼肌肉组织的数种同工酶(LDH、EST、MDH、ME、ADH、GDH和POX)在各鱼种中表达的位点和条带数目作了分析，根据所统计的位点和酶带数目计算出6种鲤科鱼间遗传距离和相似性系数。聚类分析显示，青鱼、草鱼和鲢鱼、鳙鱼分别汇聚，然后再汇聚成一个单元，团头鲂与翘嘴红鲌汇聚成一个单元，最后这两个单元汇聚在一起，这与分类学结论一致。通过将本次实验结果与历次研究结果比较显示：江苏水域良种场的四大家鱼和团头鲂仍保持着天然种群的遗传性状，仍属良种种群；鳜鱼和翘嘴红鲐不同种群由于地域或繁殖上彼此隔离，形成生化遗传水平上的差异。在ISSR遗传标记方面，从100个引物中筛选出了适合7种鱼的引物共22个，这些引物都能扩增出清晰稳定，并且可重复的条带。22个引物为二碱基重复序列，包括7个(AG)n，5个(CT)n，4个(GA)n，3个(TC)n，2个(AC)n和1个(GT)n，引物的锚定碱基位于3’端(除884外)，这些引物在7种鱼中的分布存在差异性。扩增图谱显示，同一引物对不同鱼的扩增图谱也存在不同。不同鱼的多态性位点比例显示青鱼的多态性指数最高为70.49％。通过对7种鱼的扩增结果进行分析，可以看出ISSR扩增的差异性一方面取决于用于研究的物种基因组或引物中重复序列的类型；另一方面还取决于锚定序列的位置和类型。7种鱼ISSR扩增结果与其在系统发育上的地位存在一致性。收起

关键词 : 同工酶 ISSR 遗传标记鱼类

9. 红麻雄性不育系的选育和不育基因的ISSR标记

[学位论文] 李辉中国农业科学院 2008年硕士导师: 李德芳共37页

摘要 : 红麻不育系的选育为红麻杂种优势的利用提供了新的途径。红麻雄性不育基因的分子标记，可用于优良不育系或保持系的选择。采用单株选择回交的方法进行不育系的选择，用BSA法进行ISSR引物的筛选。利用中国农业科学院麻类研究所红麻育种课题组在海南三亚... 展开

关键词 : 红麻雄性不育 ISSR标记不育基因选育

10. 百合离体授粉远缘杂交及胚拯救技术研究

[学位论文] 谈晓林云南大学 2010年硕士导师: 刘飞虎共35页

摘要 : 有性杂交尤其是远缘杂交是百合育种的主要手段，而杂交不亲和及胚败育等是其主要障碍。离体授粉和胚拯救技术作为克服杂交受精前后障碍的有效手段，在百合育种工作中得到广泛应用，但还有不少技术问题需要解决。本实验以4个百合杂种系的16个品种和1个... 展开有性杂交尤其是远缘杂交是百合育种的主要手段，而杂交不亲和及胚败育等是其主要障碍。离体授粉和胚拯救技术作为克服杂交受精前后障碍的有效手段，在百合育种工作中得到广泛应用，但还有不少技术问题需要解决。本实验以4个百合杂种系的16个品种和1个野生种为试材，研究不同离体授粉方法对百合杂交结实的影响，探索胚拯救方式、胚拯救时间、植物生长调节剂和杂交组合类型对胚拯救效果的影响，应用ISSR分子标记技术对杂交后代真实性进行鉴定，获得如下主要结果： 1.离体授粉方法对百合杂交结实的影响对于近缘杂交，离体柱头授粉的子房膨大率和结实率分别为30％和15％，离体切割花柱授粉的分别为15％和5％，离体子房授粉的分别为25％和5％；远缘杂交组合3种授粉方法的子房膨大率和结实率分别为17％和13％、3％和3％、10％和3％。 2.胚拯救接种方式和时间对胚拯救效果的影响杂种总萌发率、愈伤形成率和成苗率，胚珠培养的分别为3.7％、1.2％和2.0％，胚培养的为19.1％、4.2％和16.7％；授粉后30-40天接种的为6.3％、1.8％和4.0％，授粉后40-50天接种的为3.0％、1.1％和2.3％，授粉后50-60天接种的为5.8％、1.4％和3.5％。 3.植物生长调节剂和杂交组合类型对胚拯救效果的影响杂种总萌发率、愈伤形成率和成苗率，在添加NAA+6-BA各0.1mg/L的培养基上分别为5.4％、1.6％和2.4％，添加0.1mg/LNAA的培养基上为5.6％、1.1％和3.2％，添加0.1mg/L6-BA的培养基上为6.5％、2.1％和5.2％，对照培养基上为2.7％、1.0％和2.2％；而组合L×O为14.7％、4.3％和9.3％，O×O为1.2％、0.1％和0.7％，LA×W则均为0。 4.离体授粉杂交后代的真实性分别用2个ISSR引物对杂交组合L×O3和L×O5的亲本及3-4个子代进行检测，两个杂交组合均检测到9个位点，且子代与父、母本具共有带。上述结果表明，不论是近缘还是远缘杂交，离体柱头授粉克服受精前障碍的效果最好，离体切割花柱授粉和离体子房授粉的效果基本相同；在授粉后30-40天将胚接种在含0.1mg/L6-BA的培养基上拯救培养的效果最好；在严格控制下经离体授粉获得的子代与父本出现ISSR标记共有带，证明所获得杂种是真实的。收起

关键词 : 百合离体授粉胚拯救 ISSR标记