摘要 :
目的建立辛德毕斯病毒核酸的SYBR GREEN I荧光PCR检测方法.方法根据辛德毕斯病毒基因组核苷酸序列特性设计引物.病毒在BHK-21细胞上繁殖扩增后提取RNA和逆转录.以病毒cDNA为模板分别进行SYBR GREEN I荧光PCR和常规RT-PCR扩增,并对SYBRGREEN I PCR法的...
展开
目的建立辛德毕斯病毒核酸的SYBR GREEN I荧光PCR检测方法.方法根据辛德毕斯病毒基因组核苷酸序列特性设计引物.病毒在BHK-21细胞上繁殖扩增后提取RNA和逆转录.以病毒cDNA为模板分别进行SYBR GREEN I荧光PCR和常规RT-PCR扩增,并对SYBRGREEN I PCR法的灵敏性、特异性、重复性等进行分析.结果最适退火温度为55℃,最适引物浓度为O.5 μmol/L.用该方法检测2株SIN病毒株YN87448和XJ160结果均为阳性,而对其他虫媒病毒如甲病毒属Geta病毒、乙脑病毒、Batai病毒、Banna病毒、环状病毒及西方马脑炎病毒合成模板检测时结果均为阴性.根据病毒空斑形成实验结果,将YN87448病毒悬液进行连续10倍稀释后分别用常规PCR和SYBR GREEN I荧光PCR方法进行检测.结果SYBR GREEN I荧光PCR检测敏感性比常规PCR方法要高近100倍,检出下限可达0.1 PFU/ml.对模拟感染的人血清标本检测结果表明人血清中成分对检测体系无明显影响.对151份不明原因发热和病毒性脑炎患者的血清或脑脊液标本进行检测,结果检测到6份标本阳性.结论本实验建立了辛德毕斯病毒特异性核酸的SYBRGREEN I荧光PCR检测方法,实验结果显示了较好的特异性、广谱性,初步证实可应用于临床标本的检测,为将来用于临床和调查辛德毕斯病毒在我国的流行情况提供了新的技术手段.
收起
摘要 :
目的:研究iASPP(inhibitor member of the ASPP family)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:用RT-PCR方法检测iASPP mRNA在60例胃癌及对应的癌旁组织中的表达,并研究其与临床病理特征的关系.结果:胃癌组织中iASPP阳性表达率明显高于癌旁组织...
展开
目的:研究iASPP(inhibitor member of the ASPP family)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系.方法:用RT-PCR方法检测iASPP mRNA在60例胃癌及对应的癌旁组织中的表达,并研究其与临床病理特征的关系.结果:胃癌组织中iASPP阳性表达率明显高于癌旁组织(P＜0.05),胃癌组织中iASPP表达水平(0.503 ± 0.336)明显高于癌旁组织(0.205 ±0.108).胃癌中iASPP的高表达同肿瘤分化程度和肿瘤浸润深度以及患者无瘤生存时间有关(P＜0.05).结论:iASPP与胃癌的发生发展有关,影响胃癌的分化及患者预后,有望成为胃癌治疗的新靶点.
收起
