摘要: 胃黏膜损伤是一种常见的胃肠道疾病，其特点是治疗周期长，且难以彻底治愈。此外，胃黏膜损伤的治疗药物价格昂贵，使用周期长，且存在各种副作用。目前，越来越多的研究表明，天然产物来源多糖具有安全有效的预防和治疗胃黏膜损伤的作用。杂豆在传统... 展开 胃黏膜损伤是一种常见的胃肠道疾病，其特点是治疗周期长，且难以彻底治愈。此外，胃黏膜损伤的治疗药物价格昂贵，使用周期长，且存在各种副作用。目前，越来越多的研究表明，天然产物来源多糖具有安全有效的预防和治疗胃黏膜损伤的作用。杂豆在传统食疗中具有增强肠胃蠕动和改善胃肠道疾病的作用。常见的豆类食材如小黑豆、豇豆、豌豆和鹰嘴豆具有较高的营养价值。多糖是杂豆中的一种重要活性成分，具有多种生物活性，包括抗氧化、降血糖、免疫调节和改善肠道菌群等功能。因此，本课题以小黑豆多糖（VignaMungopolysaccharide，VMP）、豇豆多糖（Vignaunguiculatapolysaccharide，VUP）、豌豆多糖（Pisumsativumpolysaccharide，PSP）和鹰嘴豆多糖（Cicerarietinumpolysaccharide，CAP）为研究对象，探究其对乙醇诱导小鼠急性胃黏膜损伤的辅助保护作用，并筛选出胃黏膜保护效果最佳的VMP。随后，通过建立乙酸诱导大鼠慢性胃溃疡模型初步探究VMP改善胃溃疡可能的作用机制。本论文主要研究内容与结论如下： （1）探究4种杂豆多糖对乙醇诱导小鼠急性胃黏膜损伤的辅助保护功能。采用水提醇沉法分别从小黑豆、豇豆、豌豆和鹰嘴豆中提取多糖，测定其基本营养组成、单糖组成和分子质量分布，并探究这4种杂豆多糖对乙醇诱导的小鼠急性胃黏膜损伤的保护作用及其潜在机制。研究结果表明，VMP、VUP、PSP和CAP的糖含量分别为66.40%、71.79%、67.41%、53.31%，分子质量分布较宽；VUP、PSP和CAP的单糖组成主要为Ara、Gal和GalA，属果胶类酸性多糖，而VMP主要由Gal和Man组成，属中性多糖。VMP、VUP和CAP组的胃黏膜损伤抑制率分别为37.1%、34.4%和29.8%，均可显著减轻小鼠胃黏膜损伤状况。其中，VMP可降低血清中白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量，并显著降低胃组织中丙二醛（MDA）含量及提高总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性和还原型谷胱甘肽（GSH）含量。因此，VMP表现出更好的胃黏膜保护功效，这可能与提高胃组织抗氧化能力及抑制炎症细胞因子的表达有关。 （2）探究VMP对乙酸诱导大鼠慢性胃溃疡的辅助保护功能。采用乙酸诱导大鼠胃溃疡模型，通过测定大鼠的胃溃疡面积、生化指标及血清中的代谢产物等，进一步探究了VMP对胃黏膜的保护作用及其潜在机制。结果表明，通过胃组织形态观察和病理观察发现，VMP可显著减小溃疡面积，促进溃疡愈合，其效果与西咪替丁相当。低剂量的小黑豆多糖（VMP-L）与高剂量的小黑豆多糖（VMP-H）均可显著提高胃组织中T-SOD活力和GSH含量，并显著降低MDA含量，但只有VMP-H增加了胃组织中表皮生长因子（EGF）和血管内皮生长因子（VEGF）的含量。此外，VMP调节了20种与胃溃疡相关的潜在生物标志物，且VMP-L的效果优于VMP-H。具体而言，VMP干预后增加了L-谷氨酰胺、抗坏血酸和异丁酰-L-肉碱等与抗氧化相关的代谢物，并影响了多种重要的代谢通路。因此，VMP促进胃溃疡的愈合机制可能与提高胃组织的抗氧化能力、促进生长因子的释放及调节血清中潜在生物标志物的含量有关。 （3）探究VMP对慢性胃溃疡大鼠肠道菌群的调节作用。采用16SrDNA高通量测序技术对胃溃疡大鼠的粪便进行测定分析，进一步探究VMP干预后对胃溃疡大鼠肠道菌群的影响。结果表明，VMP显著增加了胃溃疡大鼠结肠内容物中总短链脂肪酸（SCFAs）的含量，包括乙酸、丙酸、异丁酸、正戊酸和异戊酸的含量，且VMP-H组的总SCFAs含量显著高于VMP-L组。此外，VMP对胃溃疡大鼠的肠道菌群Alpha多样性指数无显著影响，但Beta多样性分析发现，VMP组的肠道菌群结构与正常组更为相似。VMP通过降低Firmicutes、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Quinella、Lactobacillus等菌群的相对丰度，同时增加Bacteroidota、Bacteroides、Oscillospiraceae_UCG-005、Muribaculaceae、Parasutterella和Ruminococcus等菌群的相对丰度，有效地改善了胃溃疡大鼠肠道菌群失调。另外，Parasutterella和Lachnospiraceae_NK4A136_group与SCFAs及多种血清代谢物存在显著相关性。因此，VMP可能通过调节Bacteroidota、Firmicutes、Parasutterella和Lachnospiraceae_NK4A136_group等关键菌群的相对丰度变化，促进SCFAs的产生，并影响血清代谢物的变化，从而有助于促进胃溃疡的修复。 综上所述，本论文比较了VMP、VUP、PSP和CAP对乙醇诱导小鼠急性胃黏膜损伤的辅助保护功能，发现VMP的预防效果最佳。然后，通过乙酸诱导大鼠慢性胃溃疡模型，发现VMP可以促进胃溃疡的愈合，其机制可能与提高胃组织的抗氧化能力、促进生长因子的释放及调节血清中潜在生物标志物的含量有关。此外，VMP还能通过促进SCFAs的产生及改善胃溃疡大鼠的肠道菌群结构，从而有助于加速胃溃疡的愈合过程。本研究旨在为杂豆来源多糖作为保护胃黏膜健康食品或食品辅料的开发与应用提供理论依据，为杂豆资源的多元化开发和高附加值利用提供参考。 收起