摘要: 【目的】 1.构建EHM-FA/TPP纳米载药系统及进行相应的表征； 2.探究EHM-FA/TPP纳米颗粒的体外性质，包括光热转换能力、清除不同种类自由基能力等。 3.评估EHM-FA/TPP对巨噬细胞（RAW264.7）的作用，包括巨噬细胞对纳米颗粒的摄取行为，纳米... 展开 【目的】 1.构建EHM-FA/TPP纳米载药系统及进行相应的表征； 2.探究EHM-FA/TPP纳米颗粒的体外性质，包括光热转换能力、清除不同种类自由基能力等。 3.评估EHM-FA/TPP对巨噬细胞（RAW264.7）的作用，包括巨噬细胞对纳米颗粒的摄取行为，纳米颗粒调节活化巨噬细胞内氧化水平能力以及对巨噬细胞分型调控能力等； 4.评估EHM-FA/TPP对胶原诱导型类风湿性关节炎小鼠的治疗作用。 【方法】 1.利用刻蚀法制备粒径均匀的中空介孔二氧化硅，载药后在表面进行修饰形成纳米颗粒。用透射电子显微镜（TEM）、动态激光衍射仪（DLS），傅里叶红外分光光度计（FT-IR）、比表面积分析仪（BET）和热重量分析仪（TGA）等方法进行表征。 2.采用808nm近红外激光（NIR）照射EHM-FA/TPP混悬液，用红外热成像仪记录溶液的温度变化。利用DPPH和TMB等指示剂探究纳米颗粒清除自由基能力。 3.采用荧光共定位探究纳米材料在巨噬细胞中的分布情况，利用DCFH-DA以及MitoSOX荧光探针观察巨噬细胞内活性氧水平变化。免疫荧光染色探究巨噬细胞的极化情况。 4.构建CIA小鼠模型，利用光热成像，免疫组化，ELISA等方法对治疗效果进行评估。 【结果】 1.成功构建EHM-FA/TPP纳米颗粒，EGCG载药率达到24.53%。 2.在体外具有清除羟自由基，DPPH等自由基物质的能力。在808nm激光照射下也具有理想的光热转换能力，转化效率可达75.05%。 3.EHM-FA/TPP能被活化后的M1型巨噬细胞识别并吞噬，在巨噬细胞内首先到达溶酶体，然后到达目标位置线粒体。通过808nm激光照射，部分细胞发生凋亡。同时，纳米颗粒在线粒体上缓慢释放药物，清除过量的活性氧，调节细胞内的氧化还原水平，促进巨噬细胞向M2型极化。 4.在CIA模型中通过关节腔原位注射纳米颗粒并给予808nm激光照射治疗，减轻足部炎症，ELISA反映小鼠体内炎症水平下降。 【结论】 1.构建的EHM-FA/TPP纳米载药体系具有较为理想的载药能力，同时能发挥光热转换能力以及清除活性氧的能力。 2.通过功能化修饰，EHM-FA/TPP靶向M1型巨噬细胞线粒体的前提下有效重构关节炎模型小鼠中关节的炎症微环境，下调M1巨噬细胞的比例，提高M2巨噬细胞的比例，减轻炎症症状。 收起