摘要: 本文以牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)为模型蛋白药物制备纳米脂质体，并对其制备工艺进行了研究。通过对脂质体表面进行修饰以及将脂质体包埋进水凝胶三维网络中，以达到稳定脂质体结构、改善脂质体药物缓释性能的目的。为设计和开发生物利... 展开 本文以牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)为模型蛋白药物制备纳米脂质体，并对其制备工艺进行了研究。通过对脂质体表面进行修饰以及将脂质体包埋进水凝胶三维网络中，以达到稳定脂质体结构、改善脂质体药物缓释性能的目的。为设计和开发生物利用度高，服用方便的功能性食品、蛋白质药物制剂提供实验依据。主要研究结果如下： (1)以牛血清白蛋白为模型蛋白，采用逆向蒸发法，制备牛血清白蛋白脂质体(bovine serum albumin liposomes, BSA-Lip)。在单因素试验考察卵磷脂与谷甾醇的质量比、牛血清白蛋白的浓度、有机相与内水相的体积比以及超声时间对牛血清白蛋白脂质体包封率的影响的基础上，进一步用Box-Behnken响应面法(BBD)优化牛血清白蛋白脂质体制备工艺。结果表明，最优试验工艺条件为：卵磷脂与谷甾醇质量比为3.58:1、牛血清白蛋白溶液浓度为8.71mg/mL、有机相与内水相的体积比为2.68:1、超声时间为3min。在此模型下，进行3次平行实验，所得牛血清白蛋白脂质体的包封率为26.31%。按照最优方案制备牛血清白蛋白脂质体的平均粒径为206.2nm，电位为-30.3mV，PDI为0.26。脂质体的透射电镜观察结果显示牛血清白蛋白脂质体呈圆球状，这些结果都表明脂质体的制备是成功的。 (2)用壳聚糖(chitosan, CH)对牛血清白蛋白脂质体表面进行修饰(BSA-Lip was coated with chitosan，CH-BSA-Lip)以增强脂质体的稳定性。结果发现，壳聚糖修饰后，脂质体的粒径有所增加，并且由于脂质体和壳聚糖之间的静电相互作用，其表面电势从负电荷变为正电荷，同时脂质体的包封率也有所增加。傅里叶变换红外光谱分析证实，牛血清白蛋白被包封在脂质体中、壳聚糖成功地覆盖在脂质体表面。透射电子显微镜显示颗粒为纳米尺寸和球形。通过观察粒径和电位的变化来检查脂质体的物理稳定性和体外消化稳定性，发现壳聚糖涂层显著增强了脂质体的稳定性。壳聚糖修饰后，脂质体的体外释放更加缓慢，并且non-Fickian转运是其主要的释放机制。 (3)为了研究包埋在pH敏感水凝胶中的脂质体相关成分的控制释放，将牛血清白蛋白脂质体包埋在由菠萝皮羧甲基纤维素(pineapple peel carboxymethyl cellulose, PCMC)和海藻酸钠(sodium alginate, SA)构建制备的水凝胶中。通过扫描电子显微镜(SEM)和傅立叶变换红外光谱(FIRT)表征表明，所制备的脂质体被成功地包埋在水凝胶中，同时水凝胶的晶体结构发生变化，但其热稳定性变化不大。溶胀研究表明，PCMC与SA的质量比对水凝胶的溶胀性能有显著影响，脂质体的引入降低了水凝胶的平衡溶胀率。用Fickian扩散和Schott的伪二级模型很好地解释了制备的水凝胶的溶胀动力学机理。此外，pH敏感性研究表明，制备的水凝胶的平衡溶胀率随pH值的增加而增加。体外释放研究表明，与纯脂质体或单一水凝胶相比，制备的脂质体水凝胶复合物中BSA的释放更缓慢，在72小时内，在pH1.2条件下的累积释放量为22.2％，而在pH7.2条件下BSA的累积释放量为46.7％，达到在不同pH环境中的控制释放效果。 收起