摘要: 目的：通过替普瑞酮预处理SD大鼠，建立心肌缺血再灌注损伤模型，观察SD大鼠心肌形态和超微结构改变、热休克蛋白70(HSP70)表达、血生化(LDH、CK、CK-MB)变化，探讨替普瑞酮预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用。 方法：随机选取30只SD大鼠，雌雄不... 展开 目的：通过替普瑞酮预处理SD大鼠，建立心肌缺血再灌注损伤模型，观察SD大鼠心肌形态和超微结构改变、热休克蛋白70(HSP70)表达、血生化(LDH、CK、CK-MB)变化，探讨替普瑞酮预处理对心肌缺血再灌注损伤保护作用。 方法：随机选取30只SD大鼠，雌雄不限，体重控制在300-350g，分成3组：假手术组(Sham组10只)、缺血再灌注组(I/R组10只)、替普瑞酮+缺血再灌注组(GGA组10只)。Sham组：术前3天每天予以生理盐水2ml灌胃一次(共三次)，术前当天禁食禁饮，左前降支走行区域只穿缝线不结扎，150分钟后颈动脉采血，并摘除心脏进行下一步处理。I/R组：术前3天每天予以生理盐水2ml灌胃一次(共三次)，术前当天禁食禁饮，左前降支走行区域穿过缝线并结扎左前降支，30分钟后剪断缝线恢复左前降支血供，恢复血供120分钟后(实验从结扎开始计时总时间150分钟)颈动脉采血，并摘除心脏进行下一步处理。GGA组：术前3天每天予以替普瑞酮溶于生理盐水(称量GGA组SD大鼠并编号，按400mg/kg/d计算出GGA组每只老鼠每天所需替普瑞酮量)2ml灌胃一次(共三次)，后续步骤同缺血再灌注组(I/R组)。颈动脉采集动脉血液分析LDH、CK、CK-MB浓度变化，心脏摘除后分别行HE染色、心肌组织WesternBlot测HSP70、电镜透视观察心肌结构。 结果：1.三组实验所得血清LDH、CK、CK-MB浓度通过统计分析结果为：GGA组和I/R组所测血清LDH、CK、CK-MB浓度值要高于Sham组，P＜0.05，有统计学意义；GGA组较I/R组所测LDH、CK、CK-MB浓度降低，P＜0.05，有统计学意义。 2.HE染色结果：Sham组心肌组织染色均匀，形态正常，结构清晰，细胞完整，规律排列，未见出血坏死，可见少量炎性细胞浸润，未见明显异常。I/R组心肌心肌排列紊乱，肌纤维出现血肿坏死，心肌破坏严重，肌纤维断裂，可见大量炎性细胞浸润。GGA组HE染色心肌组织排列紊乱，但较I/R组紊乱程度低；肌纤维间质水肿，部分心肌坏死，水肿坏死程度较I/R组低；可见中量炎性细胞浸润。 3.三组实验心肌组织WesternBlot测HSP70灰度比值通过统计分析结果为：Sham组灰度比值：0.25±0.04、GGA组灰度比值：0.69±0.04、I/R组灰度比值：0.47±0.08。替普瑞酮预处理的缺血再灌注组HSP70灰度比值(0.69±0.04)与假手术组(0.25±0.04)对比，GGA组明显要高，P＜0.05，有统计学意义；缺血再灌注组HSP70灰度比值(0.47±0.08)较假手术组(0.25±0.04)高，P＜0.05，有统计学意义；替普瑞酮预处理的缺血再灌注组HSP70灰度比值(0.69±0.04)与缺血再灌注组HSP70灰度比值(0.47±0.08)比较，GGA组HSP70灰度比值高，P＜0.05，有统计学意义。 4.Sham组心肌组织超微结构(电镜)示心肌形态正常，结构清晰，细胞内线粒体、细胞核等结构完整，线粒体内有高度发达的嵴，细胞规律排列，肌丝均匀，细胞内无空泡状；I/R组示大多数心肌细胞出现核固缩或破裂，肌纤维排列不规则及线粒体肿胀(部分线粒体内嵴破坏严重、少部分出现空泡状)，肌丝排列紊乱，部分肌丝断裂；GGA组心肌组织超微结构(电镜)示口服GGA预处理后大鼠心肌结构得到保护，心肌细胞核完整，线粒体肿胀程度较I/R组轻，线粒体内嵴较密集，未见明显空泡状，提示在替普瑞酮预处理的缺血再灌注组(GGA组)心肌超微结构破坏程度低于缺血再灌注组(I/R组)。 结论： 1.替普瑞酮预处理能有效诱导心肌热休克蛋白70表达； 2.替普瑞酮预处理减少大鼠心肌缺血再灌注后LDH、CK、CK-MB的释放，减轻心肌细胞损伤； 3.替普瑞酮预处理改善心肌缺血再灌注时组织形态学破坏，起到心肌保护作用。 收起