摘要: 檀香SantalumalbumLinn.，是世界上最昂贵的珍稀树种之一，其用途广泛，经济价值极高，在我国南方的多个省市均有栽培。炭疽病是檀香苗木及其幼树生长的主要病害，严重影响檀香生长。目前此病害的林间防治方法主要是化学防治，还未有应用拮抗微生物防... 展开 檀香SantalumalbumLinn.，是世界上最昂贵的珍稀树种之一，其用途广泛，经济价值极高，在我国南方的多个省市均有栽培。炭疽病是檀香苗木及其幼树生长的主要病害，严重影响檀香生长。目前此病害的林间防治方法主要是化学防治，还未有应用拮抗微生物防治此病害的报道。本论文从檀香根际土壤中筛选出檀香炭疽病的拮抗细菌，对其中拮抗效果最好的菌株进行鉴定;优化其发酵工艺;研制拮抗细菌可湿性粉剂并对其进行了田间防效初步研究。主要研究结果如下: (1)檀香炭疽病拮抗细菌的分离筛选及鉴定。采集澄迈林场檀香优良单株的根际土壤，采用稀释平板法从中分离出71株细菌，以檀香炭疽病原菌为靶标菌，通过平板对峙法初筛和发酵液法复筛，获得具较强拮抗效果的细菌1株，编号为TXJ2-6;抗菌谱测定结果表明，该拮抗菌株对降香黄檀炭疽病、油茶软腐病、油茶叶枯病、油茶根腐病和油茶炭疽病5种病原真菌也具有明显拮抗效果;综合形态学观察、生理生化特性及16SrDNA序列分析，鉴定该拮抗菌株为甲基营养型芽孢杆菌Bacillusmethylotrophicus。 (2)甲基营养型芽孢杆菌菌株TXJ2-6发酵培养基的优化。通过单因素试验，得到适宜菌株发酵的最佳碳源为蔗糖，最佳氮源为酵母浸膏，最佳金属离子盐为NaCl。以TXJ2-6菌悬液的OD600为响应值，通过最陡爬坡试验确定最佳0水平点，使用Minitap16软件，利用Box-Behnken设计试验和响应面分析法(RSM)，得到最佳发酵培养基配方为:蔗糖6.2g/L、酵母浸膏13.0g/L、NaCl2.0g/L。并经重复摇瓶发酵试验验证了优化结果的可靠性。 以优化后的发酵培养基为基础，对Bacillusmethylotrophicus菌株TXJ2-6发酵培养条件进行优化。通过单因素实验和Plackett-Burman试验筛选出影响响应值OD600的主要因素分别为初始pH、培养温度和培养时间。使用Minitap16软件设计三因素三因子的Box-Behnken试验，并对结果所得数据进行响应面分析后，得到菌株TXJ2-6最佳发酵培养条件为:初始pH为8.2，培养温度为34.3℃，培养时间为37h。并经重复摇瓶发酵试验验证了优化结果的可靠性。 (3)甲基营养型芽孢杆菌菌株TXJ2-6可湿性粉剂的研制。以生物相容性、抑菌活性、润湿时间、悬浮率和稳定性为指标，对载体、分散剂、润湿剂、稳定剂、紫外保护剂进行筛选，确定了Bacillusmethylotrophicus菌株TXJ2-6可湿性粉剂的最佳配方为:原药70％，载体高岭土10％，分散剂木质磺酸钠6％，润湿剂十二烷基苯磺酸钠4％，稳定剂羧甲基纤维素钠2％，紫外保护剂抗坏血酸0.1％，并用高岭土补足至100％。检测该制剂的各项性能指标，均达到国家标准。通过贮存温度和贮存时间的测定，该菌剂均可贮存在室温(25℃)和低温4℃下，并可至少贮存4个月。田间防效实验表明:该菌剂100倍稀释液的防治效果高达75.74％，要好于化学农药多菌灵73.12％的防效，500倍稀释液73.86％的防治效果，也和多菌灵防治效果相当，说明该菌剂对檀香炭疽病有较好的防治效果。 收起