摘要: 背景：肝细胞癌是常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率高，预后差。深入研究其发生发展机制，寻找能够用于原发性肝癌早期诊断和治疗的靶点是改善原发性肝癌预后的重要途径。GIPC1是一种胞内支架蛋白，在细胞膜受体转运和调节中起重要作用，近年研究发... 展开 背景：肝细胞癌是常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率高，预后差。深入研究其发生发展机制，寻找能够用于原发性肝癌早期诊断和治疗的靶点是改善原发性肝癌预后的重要途径。GIPC1是一种胞内支架蛋白，在细胞膜受体转运和调节中起重要作用，近年研究发现GIPC1是一个新的肿瘤相关抗原和潜在的肿瘤治疗靶标。关于GIPC1在肝癌发生发展中的作用及其分子机制尚不清楚。 目的：探究GIPC1与肝癌发生发展的相关性;观察GIPC1对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响，并探讨其分子机制。 方法：1）采用免疫组化检测肝癌组织芯片中不同组织GIPC1的表达情况;2）构建GIPC1shRNA敲低和回补过表达Flag-GIPC1的SMMC-7721肝癌细胞模型;采用细胞计数法、CCK-8实验、集落形成实验、划痕实验和Transwell实验以及裸鼠皮下成瘤实验，分别检测GIPC1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力以及裸鼠皮下肝癌移植瘤生长的影响;3）采用Western Blot和q-PCR检测GIPC1相关信号分子的表达变化，明确其分子机制。 结果：1）肝硬化组织、肝癌原发灶、癌旁组织及肝癌转移灶中GIPC1表达水平较正常肝组织均有不同程度升高，表明GIPC1表达量与肝癌发生发展呈正相关。2）与shControl组肝癌细胞相比，shGIPC1敲低后肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力受到显著抑制，而回补Flag-GIPC1后肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力得到明显恢复，表明GIPC1具有显著促进肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用。动物实验结果显示GIPC1可促进肝癌细胞在裸鼠皮下成瘤和肿瘤生长。3）研究发现GIPC1敲低后肝癌细胞PDGFR-β的蛋白和mRNA表达水平均显著下调，PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平也显著降低;而过表达回补Flag-GIPC1后PDGFR-β的mRNA和蛋白表达水平显著回升，PI3K、AKT和mTOR磷酸化水平也相应升高。进一步研究发现p300和H3K27ac也与GIPC1表达水平变化一致，提示GIPC1可能通过上调p300调控PDGFR-β的表达。研究还发现AKT抑制剂可显著抑制肝癌细胞增殖迁移并降低AKT磷酸化水平;而补充PDGF-bb可促进肝癌细胞增殖迁移并升高AKT磷酸化水平，表明GIPC1促进肝癌细胞增殖迁移依赖于PDGFR-β介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活。 结论：GIPC1与肝癌的发生发展呈正相关;GIPC1具有显著促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭及肿瘤生长的作用，其分子机制可能为:GIPC1通过上调p300，促进组蛋白乙酰化，增强PDGFR-β启动子转录活性，使PDGFR-β表达上调，并激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，从而促进肝癌细胞增殖迁移和裸鼠皮下移植瘤的生长。 本研究分别从临床样本、细胞水平和动物模型三个层面，探明了GIPC1与肝癌发生发展的相关性;明确了GIPC1与对肝癌细胞增殖迁移和侵袭以及对裸鼠移植瘤生长的促进作用，并初步阐明其分子调控机制;探讨了将GIPC1作为肝癌治疗新靶点的可行性，为基于GIPC1为靶点的肿瘤靶向治疗提供新的依据和理论基础。 收起