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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 乳腺癌合并肺癌是多原发肿瘤中较常见的新型恶性肿瘤,严重威胁着女性健康。随着精准医疗和基因工程的研究发展,对乳腺癌合并肺癌的早期诊断、治疗及预后也更加重视。lncRNA在乳腺癌和肺癌发生发展过程中起重要的调控作用,但lncRNA在乳腺癌合并肺癌... 展开 乳腺癌合并肺癌是多原发肿瘤中较常见的新型恶性肿瘤,严重威胁着女性健康。随着精准医疗和基因工程的研究发展,对乳腺癌合并肺癌的早期诊断、治疗及预后也更加重视。lncRNA在乳腺癌和肺癌发生发展过程中起重要的调控作用,但lncRNA在乳腺癌合并肺癌中的表达水平尚不明确,探究乳腺癌合并肺癌中lncRNA的表达和调控机制对乳腺癌合并肺癌或其他类型的复合癌筛查和诊断有潜在的指导作用。 本研究利用TCGA数据库和实验室特有的lncRNA基因芯片共筛选出11条乳腺癌差异表达的lncRNA,8条肺癌差异表达的lncRNA。通过RT-qPCR技术在11例乳腺癌合并肺癌组织中验证目标lncRNA的表达,分别在7例单纯原发乳腺癌和7例单纯原发肺癌中验证差异表达的lncRNA,筛选出表达趋势不同的lncRNA。结果发现PVT1,SNHG6,NEAT1在乳腺癌合并肺癌和单原发癌中的表达趋势相反;分析lncRNA在患者各临床病理指标上的表达水平,发现PVT1在ER,PR,HER2,p53阳性水平上显著下调;此外,分析lncRNA在不同年龄组水平上的表达得出结论,乳腺癌合并肺癌患者预后程度与第二原发癌肺癌的发病年龄呈正相关;统计乳腺癌合并肺癌预后及门诊回访信息发现lncRNA的表达水平不影响患者的五年生存期。综合说明PVT1,SNHG6,NEAT1可以联合作为一组乳腺癌合并肺癌的分子标记物,结合临床成熟指标帮助判断复合癌和转移癌,对其他种类复合癌的分子水平研究提供一定的指导思路。 本研究选择乳腺癌中表达上调的lncRNA MALAT1在细胞水平进行调控机制的研究。生物信息学软件预测miR-339-5p与MALAT1相互作用,并且结合能力最强,进一步预测BLCAP为miR-339-5p的潜在靶基因,并利用双荧光素酶报告法进行验证。RT-qPCR实验深入探究MALAT1-miR-339-5p-BL CAP在乳腺癌中的调控方式。双荧光素酶报告结果显示MALAT1与miR-339-5p相互结合,miR-339-5p可以结合BLCAP的3'UTR区影响mRNA的表达。RT-qPCR结果表明:对乳腺癌MCF7细胞分别转染MALAT1和miR-339-5p mimic时BLCAP表达水平均下降;共转染MALAT1和miRNA时mRNA表达下调,但下调幅度要小于单独转染。结果表明MALAT1可作为ceRNA与BLCAP竞争结合miR-339-5p的结合位点,使miR-339-5p介导的抑制BLCAP mRNA的转录或翻译途径遭到削弱。MALAT1-miR-339-5p-BLCAP作为lncRNA-miRNA-mRNA调控网络上的一支,揭示了乳腺癌中多种类RNA之间的基因表达调控模式,为研究乳腺癌或其他癌症非编码RNA的调控机制提供一定的基础。 收起
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