摘要: 目的:研究雪上一枝蒿生物碱提取、纯化工艺条件;初步考察雪上一枝蒿的毒性和有效性。 方法:以雪上一枝蒿甲素（雪甲素）和雪上一枝蒿总生物碱（雪总碱）提取率为评价指标，采用正交试验优选雪总碱提取工艺;采用单因素法考察雪总碱的纯化工艺;以急性... 展开 目的:研究雪上一枝蒿生物碱提取、纯化工艺条件;初步考察雪上一枝蒿的毒性和有效性。 方法:以雪上一枝蒿甲素（雪甲素）和雪上一枝蒿总生物碱（雪总碱）提取率为评价指标，采用正交试验优选雪总碱提取工艺;采用单因素法考察雪总碱的纯化工艺;以急性毒性试验和药效试验，寻找雪上一枝蒿不同制剂的治疗窗范围;采用大鼠心脏毒性试验、豚鼠皮肤刺激性和过敏性试验，初步评价雪总碱微乳、雪总碱溶液皮肤用药的安全性。 结果:雪上一枝蒿提取工艺条件为:水煎煮法提取3次，每次1h，每次加12倍量水;纯化工艺采用001×7型阳离子交换树脂，树脂径高比为1∶9，上样药液浓度以含生药量计为0.25 g·mL-1，以2.0 mE· min-1流速动态上样5BV，2.0mL·min-1流速水洗10BV，0.02 g·mL-1氯化钠-50％乙醇作为解析液，以0.5mL·min-1流速洗脱20BV;解析液调pH值至6～7，解析液干燥物用10倍量乙醇回流提取1次，时间1h;乙醇提取干燥物用氯仿回流提取2次，第一次8倍量氯仿，第二次6倍量氯仿，每次1.5h，所得纯化物中雪甲素的纯度为19.55％、雪总碱的纯度为60.57％。经皮给药试验中，雪上一枝蒿药材醇提液、雪总碱微乳及雪总碱溶液均无中毒反应及死亡情况。雪总碱微乳、雪总碱溶液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具有一定的抗炎作用，其中雪总碱微乳发挥抗炎作用所需剂量减少。皮内注射给药试验中，雪总碱微乳、雪总碱溶液及药材醇提液发挥镇痛作用的治疗指数TI分别为10.460、6.825、5.25，安全系数SF分别为1.788、1.650、1.178;发挥抗炎作用的治疗指数TI分别为4.083、2.751、3.405，安全系数SF分别为1.070、0.700、0.851。心脏毒性试验中，雪总碱微乳与雪总碱溶液给予相同剂量时，经皮给药对大鼠心脏毒性与正常组无显著性差异;皮内注射给药，雪总碱微乳对大鼠心电图及心功能各项指标的影响与正常组比较有显著性差异。皮肤刺激性试验中，雪总碱微乳、雪总碱溶液及其相应赋形剂单次给药与多次给药对完整皮肤及破损皮肤刺激性的平均分值均小于0.49。皮肤过敏性试验中，阳性对照组豚鼠的致敏率达到100％，雪上一枝蒿各药物组及相应赋形剂组受试区皮肤自激发给药6～72h均未出现红斑及水肿。此外，均未出现哮喘、站立不稳及休克等严重的全身性过敏反应。 结论:雪上一枝蒿生物碱提取纯化工艺稳定、可行，所制得纯化物纯度达到要求。雪上一枝蒿药材醇提液、雪总碱微乳及雪总碱溶液经皮给药不产生急性毒性，且具有一定的抗炎作用。雪总碱微乳皮内注射发挥镇痛、抗炎作用的治疗窗均较雪总碱溶液、药材醇提液的宽。雪总碱微乳与雪总碱溶液经皮给药对大鼠不产生心脏毒性作用，皮内注射给予相同剂量时，雪总碱微乳最先产生心脏毒性。雪总碱微乳与雪总碱溶液单次给药与多次给药对完整皮肤、破损皮肤均无刺激性，也无皮肤过敏性反应。 收起