摘要: 目的:探讨Ⅵ型胶原蛋白在OA软骨中的空间分布较健康软骨Ⅵ型胶原的变化规律;其次通过研究HtrA1在OA软骨中的分布规律及其与Ⅵ型胶原分布改变的关系，探讨HtrA1在OA发病中的作用。 方法:利用模型组Hartley豚鼠自发性骨关节炎模型和对照组健康组豚鼠... 展开 目的:探讨Ⅵ型胶原蛋白在OA软骨中的空间分布较健康软骨Ⅵ型胶原的变化规律;其次通过研究HtrA1在OA软骨中的分布规律及其与Ⅵ型胶原分布改变的关系，探讨HtrA1在OA发病中的作用。 方法:利用模型组Hartley豚鼠自发性骨关节炎模型和对照组健康组豚鼠，取膝关节软骨做冰冻切片，进行旺染色和Ⅵ型胶原免疫荧光染色，而后利用Delta-Vision Elite成像系统和Imaris软件进行断层扫描、3D重建和定量分析，比较模型组和对照组软骨组织的细胞数量和体积、Ⅵ型胶原的厚度与体积以及Ⅵ型胶原体积与细胞体积比值的差异;其次，利用以上模型及对照组，取膝关节软骨做石蜡切片，进行番红O染色、HtrA1免疫组化染色以及HtrA1、Ⅵ型胶原免疫荧光双染色，比较两组软骨在大体形态、HtrA1免疫组化染色阳性率等方面的差异以及HtrA1与Ⅵ型胶原分布关系。 结果:正常软骨中，薄层Ⅵ型胶原层均匀包裹软骨细胞，各层细胞外Ⅵ型胶原层厚度无明显差别，体积随细胞深度增加而增加;骨关节炎软骨中，Ⅵ型胶原体积减小且空间分布不规则，移行层呈蜂窝状或出现空洞，放射层中呈点、片状弥散分布，且在细胞周基质外出现散在的Ⅵ型胶原。随着软骨组织的退化，OA组番红O染色与健康对照组软骨相比，软骨细胞外基质中的蛋白多糖含量明显减少，且蛋白多糖多集中与软骨囊(PCM和TM)内，符合OA关节退化特征。正常关节软骨组织内HtrA1的染色阳性细胞数较少，且在移行层和放射层较表面层较多;OA软骨内HtrA1的染色阳性细胞数接近100％，各层细胞阳性率无明显差别，且染色阳性的区域局限于胞核和胞质，胞外基质呈阴性。正常软骨中，移行层和放射层的Ⅵ型胶原和HtrA1共存;OA软骨中，移行层和放射层的Ⅵ型胶原分布不规则，且Ⅵ型胶原缺失的部位呈HtrA1荧光强阳性，表明HtrA1在Ⅵ型胶原分布的改变中有重要作用。 结论:在骨关节炎软骨中Ⅵ型胶原体积减少，不完全包裹软骨细胞，出现蜂窝、空洞和弥散分布的现象;骨关节炎软骨中几乎所有软骨细胞分泌的HtrA1增多，且分布于胞质和胞核内，其有可能在Ⅵ型胶原空间分布的变化中发挥重要作用，并通过诱导软骨细胞分化和基质降解，促进关节软骨退化和OA形成。 收起