摘要: 竹子转基因技术尚未成熟，主要的障碍是无法建立起高效稳定的竹子再生体系。本文参考已建立的版纳甜龙竹再生体系的研究方法，以9属24种竹子的成熟种胚为材料，进行愈伤组织诱导及植株再生的研究，筛选出了分属于4个属的6个再生能力较强的竹种，在此基... 展开 竹子转基因技术尚未成熟，主要的障碍是无法建立起高效稳定的竹子再生体系。本文参考已建立的版纳甜龙竹再生体系的研究方法，以9属24种竹子的成熟种胚为材料，进行愈伤组织诱导及植株再生的研究，筛选出了分属于4个属的6个再生能力较强的竹种，在此基础上对泰国巨竹、印尼巨竹和云南巨竹的再生体系进行优化。同时，开展了相关的转基因研究。主要的研究结果如下: 1.不同竹种再生能力的比较 采用版纳甜龙竹再生体系所用的愈伤组织诱导和增殖培养基。在相同的诱导培养基中，9属23种竹子均都诱导出愈伤组织，且愈伤组织诱导率不同，最高可达98.34％，分属于簕竹属、牡竹属、巨竹属、泰竹属的7个竹种可诱导出致密颗粒状愈伤组织。将版纳甜龙竹的分化培养基中NAA浓度降低为0.3 mg·L-1，在此培养基中，灰竿竹、印尼巨竹、云南巨竹、泰国巨竹能分化出正常植株，小叶龙竹分化出白紫色畸形苗，爪哇巨竹仅分化出白化苗，泰竹的愈伤组织仅变绿，不能分化出植株。研究表明，簕竹属、牡竹属、巨竹属的再生能力较强;版纳甜龙竹再生体系所用的培养基有一定通用性，但不同的竹种间仍存在差异。 2.竹子再生体系的优化 (1)对泰国巨竹和云南巨竹愈伤组织诱导阶段2，4-D浓度进行筛选，结果表明，适宜其愈伤组织诱导的2，4-D浓度为3 mg·L-1，与版纳甜龙竹再生体系中所用的一致。在此培养基中，泰国巨竹的愈伤组织诱导率和致密、颗粒状愈伤组织诱导率分别为97.83％和31.23％，云南巨竹的愈伤组织诱导率和致密、颗粒状愈伤组织诱导率分别为100％和43.91％。 (2)在泰国巨竹和印尼巨竹的诱导培养基中添加3mg·L-1ABA，有利于致密、颗粒状愈伤组织的产生，提高愈伤组织的分化率，且能加快分化的进程;在云南巨竹愈伤组织诱导培养基中添加3mg·L-1ABA，可提高胚性愈伤组织的比例和愈伤组织的增殖系数。在此培养基中诱导的云南巨竹的愈伤组织在增殖培养基MS+30 g·L-1sucrose+0.3 mg·L-12,4-D+500 mg·L-1 Gln+500 mg·L-1 Pro+500 mg·L-1 CH+8 g·L-1 Type Aagar中，增殖系数达0.68。 (3)云南巨竹优化的分化培养基:MS+30 g·L-1 sucrose+1 mg·L-1 BA+1 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA+3 g·L-1 gelrite，愈伤组织分化率为23.33％，再生植株生长良好。 3.竹子转基因研究 将与水稻分蘖有关的High Tillering and Dwarf2（HTD2）基因的RNA干扰载体分别导入印尼巨竹、泰国巨竹、版纳甜龙竹的愈伤组织中。通过再分化获得版纳甜龙竹的6株再生苗（其中4株为白化苗），印尼巨竹2管带绿点的愈伤组织和1管分化出根的愈伤组织。目前尚未对其进行检测。 收起