摘要: 番茄黄化曲叶病毒是一种以烟粉虱为媒介传播的双生病毒,它引起的番茄黄化曲叶病是严重威胁番茄生产的一种流行病害,其症状主要表现为植株矮化、叶片卷曲、叶边缘黄化等。该病在2002年传入我国南方省份;2005年以后,特别是最近几年,在我国广西、浙江、江... 展开 番茄黄化曲叶病毒是一种以烟粉虱为媒介传播的双生病毒,它引起的番茄黄化曲叶病是严重威胁番茄生产的一种流行病害,其症状主要表现为植株矮化、叶片卷曲、叶边缘黄化等。该病在2002年传入我国南方省份;2005年以后,特别是最近几年,在我国广西、浙江、江苏、山东、河北等地暴发流行;2007年9月扶沟县夏秋茬大棚番茄上发生黄化曲叶病,这是该病在河南省首次发生;2009年秋季该病在河南暴发,严重影响了番茄的产量和质量。 本研究对河南省16个番茄主产地区植株病样进行采集,提取叶片总DNA,并根据已报道病毒外壳蛋白基因保守序列设计简并引物,进行PCR扩增得到770bp的特异片段,将其克隆到pMD18-T载体中,进行测序和序列对比分析。结果发现:河南省16个番茄主产地区的番茄叶片总DNA含有病毒保守基因序列,说明已全部被烟粉虱传播的番茄黄化曲叶病毒侵害感染,且它们之间的同源性非常高,达到99.7%。 由于16个番茄主产地区病毒基因保守序列同源性非常高,可以确定是由同一病毒感染引起。以滑县样品为例,进行病毒全长测定。设计一对相邻背向引物,以番茄叶片的总DNA为模板,用PCR方法扩增病毒全基因组DNA-A的全序列。通过对DNA-A全基因组的扩增、回收、连接、转化、筛选、鉴定及序列分析发现,病毒基因组全长为2780 nt,含有6个开放阅读框:病毒链编码AV1和AV2,互补链编码AC1、AC2、AC3租AC4。滑县病原分离物全长与国内外已报道番茄黄化曲叶病毒全长的同源率均大于92%,其中与山东分离物DNA-A的同源率最高,达到99.4%。 另外我们用双生病毒DNAB的通用引物Beta01和Beta02对16个地区番茄的总DNA进行扩增,发现病毒只有中牟分离物的样品中含有DNAβ,该成分提高了寄主内病毒DNA分子的侵染能力。 收起