摘要: KAP1(又称TIF1β，TRIM28等)是一种转录中介因子，能介导多种转录调控过程。大量研究表明，KAP1在大多数情况下以共抑制因子的形式参与转录调控复合体的形成，其在精细胞发育、胚胎早期发育等生理过程中发挥了重要的调控作用。但是，调节KAP1自身活性的... 展开 KAP1(又称TIF1β，TRIM28等)是一种转录中介因子，能介导多种转录调控过程。大量研究表明，KAP1在大多数情况下以共抑制因子的形式参与转录调控复合体的形成，其在精细胞发育、胚胎早期发育等生理过程中发挥了重要的调控作用。但是，调节KAP1自身活性的机制尚不明确。 人类SIRT1基因是依赖于NAD+的组蛋白去乙酰化酶，也是一种新的抗肿瘤药物靶点。SIRT1的同源基因Sir2能够延长酵母、线虫、果蝇的寿命，在基因组稳定性、细胞代谢调节和衰老上起着不可缺少的作用，现已发现SIRT1能结合p53、E2F1、FOXO、NF-κB等非组蛋白，有抵抗氧化逆境、抑制肿瘤细胞凋亡和提高肿瘤细胞耐药性的作用。研究表明，SIRT1有着丰富的磷酸化修饰，明确磷酸化对SIRT1生物学功能的影响，对以SIRT1为靶点的药物开发具有重要意义。 结合分子克隆、病毒包装、稳定单克隆细胞筛选、RNA干扰、免疫荧光、免疫共沉淀、Western Blot和荧光定量PCR等技术进行研究后，本文发现，丝/苏蛋白磷酸酶PPM1A是KAP1和SIRT1的特异位点去磷酸化酶，且其对后两者特异位点的去磷酸化能影响后两者的功能。过表达PPM1A能使KAP1 Ser473去磷酸化，而当PPM1A的表达被抑制后，UV诱导的KAP1磷酸化响应衰减变慢，KAP1的下游抑制基因表达增强。PPM1A和SIRT1两者结合，过表达PPM1A能使SIRT1 Thr719去磷酸化，且使SIRT1对组蛋白H3的Lvs18去乙酰化作用减弱。 本文发现了PPM1A的两个新的底物，同时找到了调控KAP1和SIRT1功能的一个新的蛋白，完善了和PPM1A、KAP1、SIRT1三者有关的信号通路，为研究这三个蛋白提供了新的思路。 收起