摘要: 目的：过氧化物酶增殖体激活受体（PPAR）-α是配体激活的核受体PPARs家族的三个亚型之一。Wy14643是PPAR-α选择性激动剂，其对重要脏器的保护作用可能与PPARα激动剂具有抗炎和抗氧化作用相关。在肝脏中，肝细胞大量表达PPAR-α，而肝枯否细胞不表达。我... 展开 目的：过氧化物酶增殖体激活受体（PPAR）-α是配体激活的核受体PPARs家族的三个亚型之一。Wy14643是PPAR-α选择性激动剂，其对重要脏器的保护作用可能与PPARα激动剂具有抗炎和抗氧化作用相关。在肝脏中，肝细胞大量表达PPAR-α，而肝枯否细胞不表达。我们前期研究表明，Wy14643对在体肝脏部分缺血/再灌注损伤有保护作用，但不同剂量Wy14643对原代肝细胞缺氧/复氧损伤的保护作用尚未报道，本文研究不同剂量Wy14643对原代大鼠肝细胞缺氧/复氧损伤的影响并初步探讨其机制。 方法：SD雄性大鼠50只，体重250-300g，通过两步灌流法取原代肝细胞。将分离培养的肝细胞按1×105/ml种于培养板中，每组6孔。随机分成6组：正常组（C）、缺氧复氧组（H/R）、DMSO组（D）、Wy14643（10、30、100umol/L）组。Wy14643组，缺氧/复氧前2小时将Wy14643加入培养液中，使培养液中Wy14643的终浓度调整为10、30、100umol/L。将肝细胞放入培养箱中，缺氧培养（37℃、95%N2-5%CO2）4小时，复氧培养（37℃、95%O-5%CO2）10小时诱导细胞损伤，然后分别收集肝细胞和细胞培养上清液，分别测定肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶（AST）活性及肝细胞丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）的活性；肝细胞线粒体内谷胱甘肽（GSH）的含量；MTT法测定肝细胞的存活率；电子显微镜观察肝细胞的损伤；RT-PCR检测PPARαmRNA的表达。统计学处理：采用SPSS11.5软件进行统计学处理，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。 结果：与C组相比较，H/R组的肝细胞培养上清液中ALT、AST，肝细胞内MDA明显增高(P<0.01)，而肝细胞内SOD、GSH明显下降（P<0.01）。与H/R组比较，Wy14643各剂量处理组，肝细胞培养上清液中的ALT、AST活性明显降低，并且呈剂量依赖性（P<0.05）；Wy14643 10umol/L组中，肝细胞内的SOD的活性和GSH的含量增强，而MDA的含量降低，但无统计学意义(P>0.05)；Wy14643 30umol/L组中，肝细胞内的SOD、GSH的活性增强（P<0.05），而MDA的含量降低(P<0.05)；Wy14643 100umol/L组中，肝细胞内的SOD、GSH的活性增强（P<0.01），而MDA的含量降低(P<0.01)，差异显著。与C组相比，H/R组细胞活性降低，PPARαmRNA表达明显降低（P<0.01）；与H/R组相比，Wy14643 10umol/L组、Wy14643 30umol/L组随着浓度的增加，PPARαmRNA表达和细胞活性升高（P<0.05或P<0.01）；Wy14643 100umol/L组的细胞活性显著升高，PPAR-αmRNA表达明显升高，差异显著（P<0.01）。电镜可见：与C组相比，H/R组线粒体肿胀明显，膜破坏，有足肿和空泡变性，嵴破坏，粗面内质网较少，溶酶体和核糖体较少。与H/R组相比，Wy14643各剂量组的线粒体、粗面内质网、溶酶体和核糖体改变随剂量增加明显减轻。 结论：Wy14643对肝细胞缺氧/复氧损伤有保护作用，其机理可能是通过上调PPAR-α的表达，增强细胞抗抗氧化能力。 收起