摘要: 目的：本研究应用甲状腺刺激抗体(TSAb)刺激体外培养的甲状腺细胞，分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在TSAb作用下人甲状腺细胞中的表达情况，并初步探讨PPARγ激动剂15-脱氧-△12，14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对TSAb作用下人甲状腺细胞存活和凋亡... 展开 目的：本研究应用甲状腺刺激抗体(TSAb)刺激体外培养的甲状腺细胞，分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在TSAb作用下人甲状腺细胞中的表达情况，并初步探讨PPARγ激动剂15-脱氧-△12，14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对TSAb作用下人甲状腺细胞存活和凋亡的影响。 方法：应用原代培养人甲状腺细胞为研究对象，TSAb作用细胞24h后，采用实时定量PCR法和Western-blot法分别检测TSAb组(2mg/mlTSAb阳性血清粗提IgG培养)、TSAb阴性组(2mg/ml正常人血清粗提IgG培养)及对照组(无血清的1640培养基培养)甲状腺细胞中PPARγ的表达情况；不同浓度15d-PGJ2(0、5、10、20、40μ mol·L-1)分别干预0、1224、48h后，应用MTT法检测甲状腺细胞的存活率；干预24h后，利用Hoechst-PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态、Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞技术测定细胞凋亡率。同时应用PPARγ拮抗剂GW9662阻断PPARγ途径，观察15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞凋亡的变化。 结果：⑴PPARγmRNA及其蛋白在TSAb组、TSAb阴性组及对照组甲状腺细胞中均有表达，而在TSAb作用下甲状腺细胞中的表达显著低于TSAb阴性组和对照组(P＜0.05)。⑵15d-PGJ2呈浓度和时间依赖性抑制TSAb作用下甲状腺细胞的存活，抑制高峰为20μ mol·L-115d-PGJ2作用24h;5-40μ mol/L15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞有促进凋亡作用(p＜0.05)，并呈剂量依赖关系；10μmol/LPPARγ拮抗剂GW9662能拮抗20μmol/L15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡作用(p＜0.05)。 结论：①PPARγ在TSAb作用下甲状腺细胞中的表达是显著降低的，作为GD主要致病因子的TSAb，可能通过抑制PPARγ而使细胞增殖增多、凋亡受抑制。②PPARγ激动剂15d-PGJ2可呈时间与剂量依赖性抑制TSAb作用下的甲状腺细胞存活。③PPARγ激动剂15d-PGJ2可诱导TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡，并呈一定的剂量依赖性，此效应可能是其抑制细胞存活的机制之一。④PPARγ激动剂15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡作用能部分被其拮抗剂GW9662阻断。提示其诱导甲状腺细胞凋亡可能主要通过PPARγ途径起作用，具体机制尚待进一步研究。⑤PPARγ激动剂可望成为治疗GD的新途径。 收起