摘要: 本研究从动物整体器官组织和细胞水平上，通过病理学与生理生化相结合的方法，较系统、全面地对铅致海马有关病理和机理进行探讨。 从细胞水平上用MTT法检测海马神经细胞存活率，不同浓度醋酸铅(低、中和高浓度)分别作用24h后，0D570值降低逐渐明显... 展开 本研究从动物整体器官组织和细胞水平上，通过病理学与生理生化相结合的方法，较系统、全面地对铅致海马有关病理和机理进行探讨。 从细胞水平上用MTT法检测海马神经细胞存活率，不同浓度醋酸铅(低、中和高浓度)分别作用24h后，0D570值降低逐渐明显，呈现剂量和时间依赖关系；培养上清中乳酸脱氢酶释放明显增加(p<0.01)，胆碱酯酶活力明显下降。尼氏体染色，HE染色和Giemsa染色发现铅能使海马神经元表面粗糙、胞体变小、突起细小、回缩，断裂，甚至减少、出现裸核，细胞之间网络疏松，胞体与胞浆之间界限逐渐模糊不清，且有剂量和时间依赖关系。激光扫描共聚焦显微镜定量分析海马神经元胞浆中游离Ca2+的平均荧光强度，铅在一定浓度范围和作用时间内使海马神经元细胞内Ca2+浓度明显升高(p<0.01)，细胞内Ca2+浓度升高可能与铅致海马神经元损伤和诱导其凋亡有重要关系。流式细胞仪检测结果显示各醋酸铅组作用后细胞凋亡数量明显升高(p<0.01)，且与染铅剂量有很好的相关性。免疫细胞化学染色发现低、中、高铅组分别作用3d、6d、9d后，Bcl-2蛋白阳性的神经细胞数目显著降低，而Bax蛋白阳性的神经细胞数目显著增加；iNOS在随着铅浓度的增大，iNOS表达明显增加；醋酸铅可以促进大鼠海马细胞中P53基因的表达，并有良好的剂量反应关系。 整体动物研究发现，饮用含铅水0.5 g/L、1.0g/L和2.0 g/L(低、中和高铅组)暴露1月、3月和6月后，各实验组大鼠摄食量、饮水量逐渐减少，尤其是高铅暴露组染毒3月、6月时，平均总饮水量和平均总摄食量均显著低于对照组(p<0.01)。各组血铅水平均明显高于对照组(p<0.01)， 2.0 g/L亚组的血铅水平均明显高于组内的0.5 g/L亚组(p<0.01)，随染铅时间的延长、浓度的增加，血铅水平有所升高，但三组的组间血铅水平相比均无明显差异(p>0.05)。各组脑匀浆铅水平均明显高于对照组(p<0.05)。饮用高铅水1月、3月、和6月后各组脑区尼氏体均有不同程度的减少，神经元固缩，且与染毒时间和剂量有关：免疫组织化学染色图像分析发现，海马区Bcl-2蛋白表达阳性神经元细胞均随染铅剂量增大而减少，染色强度逐渐降低，平均灰度值逐渐增大；Bax蛋白则与Bcl-2蛋白相反。iNOS在铅处理组大鼠海马、皮层的表达明显上升，随染毒剂量增加，iNOS的表达明显增加，有良好的剂量-反应关系。大鼠脑组织海马P53表达阳性细胞数显著增加，表达强度有升高趋势：铅诱导的神经细胞凋亡与P53的表达呈正相关。 综合上述研究结果，长期饮用高铅水后大鼠生长缓慢，造成慢性全身性疾病和对大鼠脑组织的破坏。高铅经体内代谢后部分通过血脑屏障，对脑实质造成损害和引起大鼠神经细胞变性，固缩及坏死；尼氏体减少，以及海马细胞凋亡等组织病理形态学改变。氧化损伤和细胞凋亡可能是铅致脑毒性的机理之一。 收起