摘要: 第一部分Cdt1和Geminin在Jurkat细胞中的表达 目的:为探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞中的表达。为白血病的发病机制、诊断治疗和预后判断提供依据。 方法:培养白血病细胞系Jurkat细胞，以处于对数生长期的Jurkat细... 展开 第一部分Cdt1和Geminin在Jurkat细胞中的表达 目的:为探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞中的表达。为白血病的发病机制、诊断治疗和预后判断提供依据。 方法:培养白血病细胞系Jurkat细胞，以处于对数生长期的Jurkat细胞作实验组；以正常人外周血淋巴细胞作对照组。利用RT-PCR方法检测细胞中Cdt1和Geminin mRNA的表达，进行半定量分析；利用流式细胞仪对细胞荧光强度进行定量分析，以检测细胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表达。 结果: ①处于对数生长期的Jurkat细胞Cdt1 mRNA及蛋白表达显著高于对照组。 ②处于对数生长期的Jurkat细胞Geminin mRNA及蛋白的表达显著高于对照组。 结论: ①人T淋巴细胞性白血病细胞系Jurkat细胞，Cdt1的表达水平显著增高，可能与白血病细胞恶性增殖有关。 ②人T淋巴细胞性白血病细胞系Jurkat细胞，Geminin的表达水平显著增高，可能参与了白血病细胞恶性增殖。 第二部分Cdt1和Geminin在K562细胞周期各时相中的表达 目的:为探讨细胞复制允许因子Cdt1和复制抑制因子Geminin在白血病细胞细胞周期各时相中的表达。 方法:培养白血病细胞系K562细胞，使用胸苷将细胞同步化。利用流式细胞仪检测K562细胞同步率(用PI染色)。同时用流式细胞仪检测细胞周期各时相细胞中的Cdt1和Geminin蛋白的表达，对细胞荧光强度进行定量分析。 结果: ①K562细胞被胸苷阻断24h后，细胞蓄积在G1/S转换期，释放4h，细胞全部进入S期，释放12h细胞绝大部分进入G2/M期，释放24h，细胞重新恢复到对数生长期。 ②Cdt1和Geminin蛋白在.K562细胞周期各个时相均有表达。 ③各时相Cdt1和Geminin在蛋白水平表达有显著差异在G1/S转换期最低，在G2/M转换期最高。 结论: ①白血病细胞系K562细胞在细胞周期各时相中，Cdt1蛋白和Geminin蛋白均有表达。 ②Cdt1蛋白表达在K562细胞周期各时相分布异常，可能导致白血病细胞异常增殖。 ③白血病细胞K562细胞中，Geminin蛋白在细胞周期各时相分布大致正常。 收起