摘要: 目的：观察过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(RSG)和结缔组织生长因子单克隆抗体(CTGFmAb)对人胃癌细胞系BGC823生长、侵袭和迁移的影响，初步探讨PPARγ、CTGF在胃癌形成机制中的作用以及它们之间的联系，以期为临床治疗提供新的思路... 展开 目的：观察过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮(RSG)和结缔组织生长因子单克隆抗体(CTGFmAb)对人胃癌细胞系BGC823生长、侵袭和迁移的影响，初步探讨PPARγ、CTGF在胃癌形成机制中的作用以及它们之间的联系，以期为临床治疗提供新的思路。 方法：体外培养人胃癌细胞系BGC823，分别经不同浓度RSG或CTGFmAb作用，观察不同时间处理前后BGC823细胞的形态改变；MTT法测定肿瘤细胞活力；Boyden小室法观察癌细胞侵袭、迁移能力的改变；RT-PCR检测BGC823细胞CTGFmRNA、COX-2mRNA和MMP-2mRNA表达水平；应用免疫组织化学技术检测PPARγ、CTGF、COX-2和MMP-2在BGC823胃癌细胞中的表达。 结果： (1)RSG处理BGC823细胞，浓度5μmol/L的RSG对BGC823细胞的增殖抑制作用不明显，浓度25μmol/L以上的RSG明显抑制BGC823细胞的生长，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P<0.01)。大于50μmol/L时无明显量效关系(P＞0.05)。 (2) 不同浓度CTGFmAb处理BGC823细胞，10mg/L～100mg/L范围的CTGFmAb可以明显抑制BGC823细胞的生长(P＜0.05或P<0.01)，而0.1mg/L及1mg/LCTGFmAb对BGC823细胞生长的抑制作用不明显。 (3)细胞形态学观察显示RSG作用于BGC-823细胞后，细胞增殖减慢，体积变小，贴壁细胞逐渐减少，核染色质浓缩、聚积于核膜周边，核深染，培养液出现悬浮细胞。CTGFmAb处理组的细胞胞核变小，核仁明显，细胞逐渐变圆、皱缩，核染色质固缩积聚至核膜周边，核深染。而对照组BGC-823细胞刚贴壁时通常为圆形，随后细胞形态伸展，呈多角形，呈上皮样贴壁生长，生长旺盛，细胞轮廓清楚，核大，染色深，培养液中仅见少许漂浮的细胞。 (4)50μmol/L RSG处理组BGC823细胞侵袭穿膜数为74.73±7.35，迁移穿膜数为61.23±7.28，与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 (5)10mg/L CTGFmAb处理组BGC823细胞其侵袭穿膜细胞数为79.94±6.08，迁移穿膜细胞数为66.74±5.12，与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 (6)PRARγ,蛋白在BGC823细胞中有表达，RSG处理组PRARγ染色阳性强度强于对照组PRARγ,染色(P＜0.05)。 (7)CTGF蛋白在BGC823细胞中有表达，RSG处理组、CTGFmAb处理组CTGF染色阳性强度均弱于对照组CTGF染色(P<0.01)。 (8)COX-2蛋白在BGC823细胞中有表达，RSG处理组、CTGFmAb处理组COX-2染色阳性强度均弱于对照组COX-2染色(p＜0.01)。 (9)MMP-2蛋白在BGC823细胞中有表达，RSG处理组、CTGFmAb处理组MMP-2染色阳性强度均弱于对照组MMP-2染色(P<0.01)。 (10)50μmol/LRSG处理组BGC823细胞，其CTGFmRNA、COX-2 mRNA和MMP-2mRNA相对光密度值均显著低于对照组相对光密度值，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。 (11)10mg/LCTGFmAb处理组BGC823细胞，其COX-2mRNA和MMP-2mRNA相对光密度值均显著低于对照组相对光密度值，差异有统计学意义(p＜0.01)。 结论 (1)PPARγ激动剂RSG能抑制BGC-823细胞增殖，并且在一定范围内呈剂量时间依赖性。RSG可明显抑制细胞的侵袭和迁移。提示RSG的作用可能与激活PPARγ介导的信号途径有关(2)CTGFmAb能够抑制BGC-823细胞增殖，同时能够降低BGC-823细胞的侵袭和迁移能力。提示CTGF可能促进BGC-823细胞的增殖、侵袭和迁移。 (3)RSG、CTGFmAb均能诱导BGC-823细胞形态的改变。 (4)RSG、CTGFmAb分别下调BGC-823细胞COX-2和MMP-2表达，提示RSG、CTGFmAb对于BGC-823细胞生物学行为的影响，可能是通过负性调控COX-2和MMP-2而实现的。 (5)RSG下调BGC-823细胞CTGF表达，提示活化的PPARγ对BGC-823细胞的抑制作用可能是通过部分下调CTGF的表达而实现的。 收起