摘要: 目的：探讨肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia，IETM)与胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)之间的关系，研究IETM在非酒精性脂肪肝性肝病(nonalcoholic fattyliver disease.NAFLD)发生发展中的作用。 方法:实验1.Wistar大鼠32只，雌雄各半，... 展开 目的：探讨肠源性内毒素血症(intestinal endotoxemia，IETM)与胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)之间的关系，研究IETM在非酒精性脂肪肝性肝病(nonalcoholic fattyliver disease.NAFLD)发生发展中的作用。 方法:实验1.Wistar大鼠32只，雌雄各半，按随机区组设计，分配雌雄两个区组的大鼠为4组：正常对照组(normal control；NC)以正常饲料喂养，不饱和脂肪酸组(unsaturated fatty acid；NSFA)以不饱和脂肪酸饲料喂养，饱和脂肪酸组(saturatedfatty acid；SFA)以饱和脂肪酸饲料喂养，高糖高脂组(high sucrose and high-fat dict：HSF)以高蔗糖高饱和脂肪酸饲料喂养，每组8只，雌雄各半，分笼饲养，造模9周形成NAFLD模型。肝脏苏木素-伊红(HE)、sudanⅣ染色观察肝脂变，透射电镜下观察肝脏细胞及细胞外基质的超微结构变化。测定空腹血糖(FPG)、空腹血胰岛素(FINS)含量，外周血浆游离脂肪酸(FFA)，肝匀浆甘油三酯(TG)，外周血浆及肝组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，计算胰岛素抵抗指数(IRI，HOMA-IR及胰岛素敏感指数(ISI)。实验2.动物和分组同实验1，测定外周血浆内毒素(LPS)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)，血浆及肝组织匀浆丙二醛(MDA)含量。免疫组化法测肝脏和腹部脂肪组织TNF-α，检测各组动物肝脏和腹部脂肪组织免疫组化TNF-α的表达。 结果：1.NAFLD大鼠模型建立情况： 肝脏HE、sudanIV染色结果证实：造模九周后，NSFA大鼠为单纯性脂肪肝，SFA、HSF大鼠为脂肪性肝炎。电镜下观察肝脏线粒体肿胀变形，嵴排列紊乱，甚至断裂消失，说明存在肝损伤。 2.血浆FFA、FINS、肝匀浆TG、血浆及肝匀浆TNF-α测定及IRI、ISI计算结果：三个模型组各指标与NC组比均有统计学意义；外周血浆FFA：NSFA高于SFA，HSF高于SFA，但无统计学差异；肝匀浆TG：SFA组显著高于NSFA组，HSF组显著高于SFA组，有统计差异；FINS、IRI：SEA组高于NSFA组，HSF组高于SFA组，但无统计学差异；ISI：SFA组低于NSFA组，HSF组低于SFA组，但无统计差异；血浆及肝匀浆TNF-α：SFA组高于NSFA组，无统计差异，HSF组显著高于SFA组，有统计差异。 3.外周血浆LPS、ALT、血浆及肝匀浆MDA测定结果： 除NSFA组血浆ALT与NC组比无统计差异外，其他各组指标均有统计差异；血浆ALT、LPS、肝匀浆MDA：SFA组显著高于NSFA组，HSF组显著高于SFA组，有统计学差异；血浆MDA：SFA组高于NSFA组，HSF组高于SFA组，但无统计学差异。 4.肝组织及脂肪组织免疫组化TNF-α蛋白表达结果： 肝组织TNF-α：NSFA组与NC组比虽有增高，但无统计差异；SFA组、HSF组在统计学上均显著高于NC组；SFA组显著高于NSFA组，HSF组显著高于SFA组，有统计学差异。 脂肪组织TNF-α：NSFA组、SFA组、HSF组均显著高于NC组，有统计学差异；SFA组高于NSFA组，HSF组高于SFA组，有显著统计学意义。 5.电镜结果： 三个模型组肝细胞线粒体均有不同程度的肿胀、变形、嵴断裂消失等，SFA较NSFA严重，HSF较饱和组严重。 6.相关分析结果： (1)IR与体重、血浆FFA、血浆及肝匀浆。TNF-α间存在正相关。 (2)LPS与体重、血浆ALT、FFA、血浆及肝匀浆TNF-α、MDA、肝组织及脂肪组织TNF-α蛋白间存在正相关。 1.肝脂肪变、脂肪性肝炎大鼠发生了胰岛素抵抗，FFA、TNF-α与胰岛素抵抗形成有关。 2.肝脂肪变、脂肪性肝炎大鼠发生了内毒素血症，内毒素血症与胰岛素抵抗相关，LPS可能通过FFA、TNF-α启动IR，导致肝损伤。 由此可以认为：肠源性内毒素通过促进TNF-α的释放，进而引起FFA大量增多启动IR，导致脂肪肝的形成，继而向NASH发展。 收起