摘要: 热休克因子1(heat shock factor1，HSF1)是最早被发现的热休克转录因子。在各种应激反应，特别是热休克反应时调控HSPs(heat shockproteins，HSPs)的诱导表达中发挥重要作用。 目的：本研究以RAW264.7细胞系为研究对象，以烧伤血清刺激建立烧伤细胞... 展开 热休克因子1(heat shock factor1，HSF1)是最早被发现的热休克转录因子。在各种应激反应，特别是热休克反应时调控HSPs(heat shockproteins，HSPs)的诱导表达中发挥重要作用。 目的：本研究以RAW264.7细胞系为研究对象，以烧伤血清刺激建立烧伤细胞模型，在体外研究HSF1与HMGB1(high mobility groupbox)和IL-10(Interleukin-10)启动子区HSE(heat shock element)相互作用产生的抗炎症机制。 方法：Western blot法检测烧伤血清刺激后的RAW264.7细胞与正常对照组中HSF1与NF-κB表达量，应用凝胶阻滞(EMSA)法检测HSF1与炎症因子HMGB1和抗炎症因子IL-10启动子区相互作用，同时探索NF-κB是否参与上述HSF1-HSE的相互作用。 结果： (1)发现正常培养条件下的RAW264.7细胞几乎不表达HSF1少量表达NF-κB，而加入烧伤血清刺激后的细胞能够明显稳定表达HSF1同时大量表达NF-kB； (2)结果显示HSF1与HMGB1和IL-10的启动子区HSE有相互作用； (3)凝胶超阻滞法检测发现NF-κB并不参HSF1与HMGB1和IL-10启动子区HSE的结合。 结论： (1)烧伤血清刺激细胞后可诱导细胞发生自身保护反应，大量表达HSF1蛋白，通过一系列细胞信号通路抑制炎症反应的发生，也证明体外烧伤模型构建成功，同时NF-κB处理前后表达差异明显表明其快速介导炎症反应； (2)HSF1与HMGB1和IL-10的启动子区HSE结合，抑制HMGB1的表达的同时促进IL-10的表达，负反馈调节炎症反应； (3)凝胶超阻滞法检测发现NF-kB并不参与HMGB1和IL-10启动子区HSF1与HSE的结合，因此可以推断在炎症反应中HMGB1和IL-10的表达并不直接受NF-kB的调节。 收起