摘要: [目的]铝在环境中的广泛存在和在日常生活中的广泛应用使人们接触铝的机会大大增加。我国正常人摄铝主要来源于食品添加剂、含铝药物和铝制品等，铝暴露的问题比较严重且未引起足够重视。研究表明，铝过多进入体内会对人体健康造成危害。铝是一种慢性... 展开 [目的]铝在环境中的广泛存在和在日常生活中的广泛应用使人们接触铝的机会大大增加。我国正常人摄铝主要来源于食品添加剂、含铝药物和铝制品等，铝暴露的问题比较严重且未引起足够重视。研究表明，铝过多进入体内会对人体健康造成危害。铝是一种慢性蓄积性神经毒素，铝在Alzheimer型老年性痴呆(AD)、透析性痴呆(Dialysis Encephalopathy，DE)等疾病中发挥的毒作用也已得到许多学者的肯定。目前已证明，铝是DE肯定的、唯一的致病因子。职业暴露的铝作业工人出现明显的神经功能性改变。目前临床上对于铝负荷过多引起的疾病倾向于使用铝螯合剂。本研究把DHPO(1，2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮)作为一种新型铝螯合剂进行动物实验，主要从DHPO对铝染毒动物学习记忆能力的改善情况、对肝、肾、脑组织的保护作用和海马区凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达的影响，来评价DHPO对动物神经元以及学习行为的保护作用。同时通过测定动物体内铝和其它必需元素含量对DHPO排铝作用和体内其它必需元素的影响等方面进行探讨，为寻找一种安全有效的排铝药物提供依据。 [方法] 1.DHPO的合成 2-甲基-3-羟基-4-吡喃酮与甲胺水溶液于95～100℃加热回流，得到白色结晶即DHPO。 2.DHPO对铝染毒小鼠学习记忆能力的影响 健康昆明种小鼠98只，雌雄各半，22～24g，自由饮水和进食。按体重随机分为7组，以灌胃方式给药，分组情况如下：阴性对照组，预防组，低剂量组，中剂量组，高剂量组，染毒组，脑复新对照组。实验结束前两天用跳台仪对小鼠进行跳台训练，24h后进行测试，记录小鼠跳台潜伏期和5min内的错误次数。 3．DHPO对铝染毒小鼠细胞凋亡的保护作用：给药结束后，小鼠心脏灌注进行固定，取海马组织，用免疫组织化学进行原位检测海马区Bax和Bcl-2蛋白的表达，检测DHPO对铝致细胞凋亡的保护作用。 4．DHPO对铝染毒小鼠排铝作用的研究：将小鼠以颈椎脱臼法处死，取其血清、肝、肾、脑和骨骼组织。湿法消化后用石墨炉原子吸收的方法分析小鼠血清中的铝含量。 5．DHPO对铝染毒小鼠其它有益元素的影响：取各组小鼠的肝、肾、股骨和脑组织消化后用原子吸收的方法分析小鼠各组织中的铜、锌、钙、铁、镁含量。 6．DHPO对铝致肝脏、肾脏和海马损伤恢复的形态学观察：小鼠肝脏、肾脏和海马苏木素．伊红染色(HE)染色，进行病理学观察，分析小鼠肝、肾脏和海马的形态学改变。 [结果] 1．DHPO的合成：结果表明：熔点、红外与核磁波谱符合目标化合物的结构特征。 2．对铝染毒小鼠学习记忆能力的影响：小鼠跳台实验表明：与染毒组相比，预防组、中、高剂量组潜伏期显著降低(P<0.05)，而低剂量组无统计学意义(P>0.05)，且各剂量组之间存在剂量效应关系；各剂量组与对照组相比均无统计学意义(P>0.05)。在错误次数的比较中，预防组明显低于染毒组(P<0.05)，低、中、高剂量组和脑复新对照组均低于染毒组但无统计学意义(P>0.05)，各实验组与对照组相比均无统计学意义(P>0.05)。 3．DHPO对铝染毒小鼠细胞凋亡的保护作用：低剂量组、染毒组和脑复新对照组Bcl．2蛋白表达与阴性对照组无统计学意义(P>0.05)，中、高剂量组和预防组均高于阴性对照组(P<0.05)；预防组、低、中、高剂量组均高于脑复新对照组(P<0.05)。染毒组、预防组、低剂量组Bax蛋白表达均高于阴性对照组(P<0.05)，中、高剂量组、脑复新对照组与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)；染毒组、预防组和低剂量组高于脑复新对照组(P<0.05)，高剂量组低于脑复新对照组(P<0.05)。 4．DHPO对铝中毒小鼠排铝作用研究：脑铝和肾脏铝中，预防组、低、中、高剂量组铝含量均低于染毒组(P<0.05)，预防组、低、中剂量组高于阴性对照组(P<0.05)，高剂量组与阴性对照组无统计学意义(P>0.05)。肝脏铝含量比较，预防组，低、中、高剂量均低于染毒组，但无统计学意义(P>0.05)。骨骼铝含量比较，预防组，低、中、高剂量均低于染毒组(P<0.05)，与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。血清铝比较，预防组、低、中、高剂量组均低于染毒组(P<0.05)，但高于阴性对照组(P<0.05)，低中高剂量组之间存在剂量反应关系。 5．DHPO对铝中毒小鼠其它必需元素的影响：脑、肝脏、肾脏和骨骼中的镁、铁含量各组之间均无统计学意义(P>0.05)。肾、肝、骨组织各组钙含量无统计学意义(P>0.05)。脑钙含量比较，低剂量组和染毒组均低于阴性对照组(P<0.05)；预防组、中、高剂量组和阴性对照组无统计学意义(P>0.05)。脑和肝脏中的锌含量各组之间均无统计学意义(P>0.05)。肾脏锌含量中剂量组高于其它各组(P<0.05)，其它各组之间两两比较均无统计学意义(P>0.05)。骨骼中预防组、低、中、高剂量组锌含量与阴性对照组之间均无统计学意义(P>0.05)，染毒组中的锌含量明显低于阴性对照组(P<0.05)。脑铜、骨骼铜和肝脏铜含量比较各组无统计学意义(P>0.05)。肾脏中低剂量组铜含量高于阴性对照组(P<0.05)，染毒组低于阴性对照组(P<0.05)，其它与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。 6．DHPO对铝致肝脏、肾脏和海马损伤的保护作用的形态学观察：对组织切片光镜下进行观察，染毒组肝脏、海马和肾脏均有明显损伤，用药各组损伤的组织均有一定程度的恢复。 [结论] 1．DHPO能够改善铝染毒小鼠的学习记忆能力。 2．DHPO对铝引起的凋亡相关蛋白改变有一定的调节作用。 3．DHPO排铝效果显著，同时对其它必需元素锌、镁、钙、铜、铁均无促排作用。 4．DHPO对铝引起的肝、肾、脑的病理损害在一定程度上具有保护作用。 收起