摘要: 研究背景和目的：肾癌又称肾细胞癌、肾腺癌，是最常见的肾脏实质性肿瘤，其中以透明细胞癌最常见。其起病隐袭，死亡率高，根据统计，发病率居泌尿系肿瘤第二位。侵袭和转移是性肿瘤的生物学特征之一，肾癌也不例外，由于肾癌早期缺乏典型的临床症状... 展开 研究背景和目的：肾癌又称肾细胞癌、肾腺癌，是最常见的肾脏实质性肿瘤，其中以透明细胞癌最常见。其起病隐袭，死亡率高，根据统计，发病率居泌尿系肿瘤第二位。侵袭和转移是性肿瘤的生物学特征之一，肾癌也不例外，由于肾癌早期缺乏典型的临床症状，大约1/4-1/3病人就医时已有转移，可有血行转移，也可以经淋巴转移。膀胱癌是我国泌尿生殖系肿瘤中最常见的肿瘤，临床上90％以上为移行细胞癌，容易复发及对化疗药物不敏感，保留膀胱的各种手术治疗，2年内超过50％以上肿瘤要复发。研究肾透明细胞癌及膀胱癌侵袭和转移的分子机制，不仅有助于为临床判断预后提供有价值的分子标记物，而且有助于设计和寻找抗肿瘤侵袭和转移的新思路和新途径，进一步改善肾癌及膀胱癌的预后。 TFAR19(TF-1cellapoptosis-relatedgene19、PDCD5)基因是由北京大学人类疾病基因中心1999年在国际上首先报道的一个人类新基因，是从人白血病细胞株TF-1细胞中克隆到的凋亡相关新基因(GenBank登记号AF014955)，参与调控细胞凋亡过程。PDCD5的mRNA在50种人类组织中均有表达，并不限定于造血系统，其中在成年心、睾丸、肾脏、肾上腺及胎盘中高表达，其中胚胎组织表达明显低于成年组织，国内外已有多家实验室利用不同技术发现PDCD5在疾病情况下，特别是在肿瘤、自身免疫性疾病和局部损伤的表达明显下降。PDCD5除参与细胞凋亡外，预测还与泛素有功能相关性，并可能参与蛋白质的翻译调控。目前有几个研究表明，PDCD5在多种肿瘤中呈现低表达，在正常组织中呈现高表达，其表达与肿瘤侵润、转移及预后密切相关。 但迄今为止，对PDCD5在肾细胞癌中的表达及其与肾细胞癌转移的相关性研究国内未见报道。本研究目的是检测PDCD5在肾细胞癌中的表达，探讨二者间的关系及其在肿瘤转移中的作用，以期寻找判断肾细胞癌转移及估计预后可靠的分子标记物和抗肿瘤治疗新靶点。 方法：63例肾组织标本均来自我院肾癌标本数据库，为2002年3月至2005年10月手术治疗的肾细胞癌患者标本；42例膀胱组织标本均来自我院2004年10月至2005年10月手术治疗的膀胱癌患者标本；其中43例肾癌标本为肾透明细胞癌，所有患者术前均未接受放疗、化疗及免疫治疗。20例肾癌旁正常肾组织(远离肿瘤边缘＞5cm)作为对照，10例膀胱癌旁正常膀胱组织(远离肿瘤边缘＞3cm)作为对照，并经病理切片证实，用免疫组织化学SABC法检测PDCD5的表达。用已知宫颈上皮细胞切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。采用免疫组织化学的方法，对43例肾透明细胞癌组织(按照病理分期，Ⅰ期17例、Ⅱ期16例、Ⅲ～Ⅳ期10例；按照临床TNM分期，包括T1期14例、T2期13例、T3～4期16例)和20例正常肾组织切片进行PDCD5的免疫组化染色；对32例膀胱癌组织和10例正常膀胱组织切片进行PDCD5的免疫组化染色。采用人工阅片评分及计算机辅助染色强度判定2种方法判断肾组织PDCD5的染色阳性率及染色强度，用单因素方差分析法及列联表的卡方检验和关联度测量判断PDCD5的表达与正常肾、肾透明细胞癌组织的相关性；采用人工阅片判断膀胱组织PDCD5的染色阳性率。并用图像分析系统对切片进行光密度分析。应用SPSS10.0统计软件对数据进行统计学处理，采用列联表的卡方检验分析和关联度测量。 结果：免疫组织化学的结果显示，在正常肾组织肾小管区中，PDCD5表达多呈强阳性，肾透明细胞癌组织表达随着分期的增加呈递减趋势。正常肾组织、Ⅲ期、Ⅲ期、Ⅲ～Ⅳ期、T1期、T2期、T3～4期肾透明细胞癌组织之间PDCD5的平均光密度值分别为0.180、0.160、0.141、0.121、0.160、0.145、0.130，按病理分型F=37.173，p=0.000，按TNM分型F=29.006，p=0.000。提示无论是病理分期还是临床分期，PDCD5表达的平均光密度值在肾透明细胞癌各期差异有统计学意义。光镜分析结果判定，按病理分型X3=34.175，p=0.000，列联程度Gamma=-0.640，按TNM分型X3=26.185，p=0.000，列联程度Gamma=-0.627。两种分期内各级病变之间差异均有显著性，并且负关联，提示无论是病理分期还是临床分期，PDCD5表达的平均光密度值在肾透明细胞癌各期差异有统计学意义，且随着肾透明细胞癌分期的上升，PDCD5的表达逐渐下调。分组统计结果显示不同性别、年龄肾透明细胞癌患者PDCD5表达无显著性差异，提示肾透明细胞癌中PDCD5的表达在不同性别、年龄组中差异无统计学意义(t=0.330，P=0.743，t=0.373，P=0.711，P＞0.05)；分组统计结果显示肿瘤大小，有无转移肾透明细胞癌患者PDCD5表达有显著性差异，提示肾透明细胞癌中PDCD5表达在不同肿瘤大小，有无转移组中差异有统计学意义(t=2.414，P=0.020；t=2.637，P=0.012)。正常膀胱、膀胱癌组织中PDCD5未见显著表达。 结论： 1.在正常肾组织肾小管区中，PDCD5表达多呈强阳性，肾透明细胞癌组织表达随着分期的增加呈递减趋势，可能是肾细胞癌组织表达的重要负性调控因子之一； 2.PDCD5表达在不同性别、年龄组中差异无统计学意义； 3.PDCD5表达在不同肿瘤大小，有无转移组中差异有统计学意义； 4.PDCD5在正常膀胱组织及膀胱癌组织未见显著表达； 5.PDCD5有望成为判断肾细胞癌转移和预后等生物学行为的重要参考指标，而且随着研究的不断深入，将可能成为肿瘤治疗的新靶点。 收起