摘要: 目的：观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、背根神经节和脊髓内TNF-α和SP的表达变化及吗啡、曲马多、酚妥拉明、艾司洛尔、阿托品预先给药的干预效应，探讨(1)TNF-α和SP在心肌缺血伤害性刺激诱发机体神经源性反应机制中的作用及机理；(2)局部心肌急性... 展开 目的：观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、背根神经节和脊髓内TNF-α和SP的表达变化及吗啡、曲马多、酚妥拉明、艾司洛尔、阿托品预先给药的干预效应，探讨(1)TNF-α和SP在心肌缺血伤害性刺激诱发机体神经源性反应机制中的作用及机理；(2)局部心肌急性缺血诱发整体心肌损伤的机制；(3)痛觉干预在缺血心肌保护中的作用及机制。 方法：第一部分：TNF-α和SP的表达变化实验选用雄性SD大鼠随机分为三组：(1)动物对照组(Controlgroup，C组)，麻醉后直接取材；(2)手术对照组(Shamgroup，S组)，只开胸不结扎冠脉；(3)结扎冠状动脉组(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO组)，单纯扎闭冠状动脉左前降支。其中，Sham组和CAO组又分为八个时点的亚组：0.5h组、1h组、3h组、6h组、1day组、2day组、3day组、7day组。采用免疫组化和ELISA技术观察结扎大鼠冠状动脉不同时点心肌、背根神经节和脊髓内TNF-α和SP的表达变化； 第二部分：TNF-a和SP的表达变化的干预研究根据第一部分实验结果，分别选取CAO后TNF-α和SP表达最强的时点进行药物干预研究。采用雄性SD大鼠随机分为八组：(1)动物对照组(Controlgroup，C组)；(2)手术对照组(Shamgroup，S组)；(3)结扎冠状动脉组(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO组)；(4)吗啡预处理组(Morphinegroup，M组)；(5)曲马多预处理组(Tramadolgroup，T组)；(6)酚妥拉明预处理组(Rigitinegroup，R组)；(7)艾司洛尔预处理组(Esmololgroup，E组)；(8)阿托品预处理组(Atropinegroup，A组)。各药物干预组分别在结扎左冠状动脉前15min经尾静脉给予吗啡1.25mg.kg-1、曲马多12.5mg.kg-1、酚妥拉明0.4mg.kg-1、艾司洛尔3.0mg.kg-1、阿托品1.0mg.kg-1。采用免疫组化、ELISA和RealTimeRT-PCR技术观察各药物的干预效应。 结果：(1)CAO后大鼠心肌、背根神经节及脊髓TNF-α水平较对照组显著升高，心肌TNF-α在CAO1h达高峰，背根神经节及脊髓TNF-α在CAO0.5h达高峰；血运阻断区心肌TNF-α水平较非血运阻断区心肌显著升高；背侧和腹侧脊髓TNF-α水平比较无显著性差异；各药物干预组TNF-α水平明显低于CAO组，各药物干预组之间TNF-α水平无显著性差异。(2)CAO后大鼠心肌、背根神经节及脊髓SP水平较对照组显著升高，心肌、背根神经节及脊髓SP在CAO3h达高峰；血运阻断区心肌SP水平较非血运阻断区心肌显著升高；背侧脊髓SP水平较腹侧脊髓显著升高；各药物干预组SP水平明显低于CAO组，各药物干预组之间SP水平无显著性差异。(3)在心肌组织和背根神经节，CAO组TNF-αmRNA和SPmRNA的表达水平均较对照组显著升高(P＜0.05)，各药物干预组明显低于CAO组(P＜0.05)，各药物干预组之间无显著性差异。与蛋白水平变化一致；但在脊髓，CAO组TNF-αmRNA和SPmRNA的表达水平与对照组、各药物干预组比较无显著性差异。 结论：(1)结扎冠状动脉可诱发大鼠心肌、背根神经节及脊髓TNF-α和SP水平明显升高，提示：急性心肌缺血作为一种伤害性刺激可能诱发、激活了机体神经源性反应机制；TNF-α和SP可能在这种神经源性机制中发挥了作用；神经源性机制可能参与了急性心肌缺血伤害性刺激诱发的心肌损伤及其调制的病理学过程。(2)吗啡、曲马多、酚妥拉明、艾司洛尔和阿托品预先给药可显著降低结扎冠状动脉诱发的大鼠心肌、背根神经节及脊髓TNF-α和SP水平的升高，提示：吗啡受体、肾上腺素能受体和胆碱能受体参与急性心肌缺血伤害性刺激的感受及信息传递和调制，抑制伤害性刺激诱发的神经源性机制的激活。吗啡、曲马多、酚妥拉明、艾司洛尔和阿托品痛觉干预可通过不同的作用机制降低急性心肌缺血伤害性刺激的感受及信息传递，抑制伤害性刺激诱发的神经源性机制的激活。 收起