摘要: 本文以水稻亚种一粳稻(O.sativa ssp．Japonica)日本晴(Nipponbare)为材料。当种子萌芽后，分别用去甲基化试剂5-氮胞苷(5-Azacytidine，5-Azac)和低温(4℃)条件预处理24h，移入含200mM NaCl的营养液中光照生长。取生长一周的幼苗，从表型和生理、生化... 展开 本文以水稻亚种一粳稻(O.sativa ssp．Japonica)日本晴(Nipponbare)为材料。当种子萌芽后，分别用去甲基化试剂5-氮胞苷(5-Azacytidine，5-Azac)和低温(4℃)条件预处理24h，移入含200mM NaCl的营养液中光照生长。取生长一周的幼苗，从表型和生理、生化角度分析了盐胁迫对水稻幼苗DNA甲基化水平的影响，及甲基化在早期幼苗胁迫生长调控中可能扮演的角色。 结合植物基因组甲基化的特点及不同胁迫条件诱导信号通路差异的观点进行分析。结果表明： (1) 5-Azac和低温的预处理作用，改变了盐胁迫中水稻幼苗的生长与分化进度。随着5-Azac浓度增大，幼苗趋向矮化和黄化，幼苗叶分化提前；低温延迟了早期生长进度。5-Azac的浓度梯度和低温的时间梯度与幼苗表型有较好的对应性。 (2)5-Azac与低温的预处理影响了盐胁迫下生长的水稻幼苗基因组甲基化水平。在高盐引起基因组甲基化水平增高的前提下，5-Azac和低温的预处理可以有效降低幼苗甲基化水平。 (3)5-Azac预处理对细胞周期产生了影响。随着浓度增大，G2/M期细胞减少且S期延长。而盐胁迫造成的甲基化水平增高可能引起了细胞有丝分裂指数下降；或造成DNA的损伤，影响了DNA复制。从低温处理后的生长恢复看，胁迫的生长抑制也可能来自细胞周期信号通路的阻断。 (4)5-Azac对叶绿素成分含量的影响有浓度依赖性，从胁迫对叶绿素总量及Ca/Cb的影响来看，高甲基化水平可能对核基因组与叶绿体基因组有影响。 (5)水稻幼苗的可溶蛋白浓度测定表明，盐胁迫降低了胞质蛋白的浓度，5-Azac并未有效改善这种状况，可能盐胁迫的甲基化位点多在重复序列处；低温预处理后，蛋白浓度增加，提示胁迫信号诱导对胞质蛋白的影响大。5-Azac的预处理产生了差异蛋白条带。 (6)选取水稻抗氧化胁迫基因的启动子顺式元件做探针，己知胁迫早期抗氧基因被上调，当5-Azac和低温预处理后，顺式元件的凝胶阻滞(EMSA)信号产生差异。 收起