中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 黄丽洁西北农林科技大学 2023年硕士导师: 母海钵共80页

摘要 : 炎症性肠病（Inflammatoryboweldiseases,IBD）是一种慢性非特异性肠道炎症，发病时有腹痛、腹泻和便血等症状，严重影响患者的日常生活。近年来，IBD在我国及其他一些发展中国家的发病率显著上升。目前IBD无法治愈，治疗手段以缓解症状为主，传统药物... 展开炎症性肠病（Inflammatoryboweldiseases,IBD）是一种慢性非特异性肠道炎症，发病时有腹痛、腹泻和便血等症状，严重影响患者的日常生活。近年来，IBD在我国及其他一些发展中国家的发病率显著上升。目前IBD无法治愈，治疗手段以缓解症状为主，传统药物如免疫抑制剂和抗生素等，均存在溶解度低、稳定性差等缺陷，且这些药物可能加剧由IBD引起的肠道免疫系统紊乱和肠道菌群失衡，副作用较大。近年来，益生菌疗法是一种新兴的IBD治疗手段。益生菌可以发挥重塑肠道菌群、抑制炎症反应、调节肠道免疫等作用治疗IBD。然而，现有的益生菌口服制剂普遍存在口服利用度低和胃肠道驻留时间偏短等缺陷，导致益生菌疗法的疗效欠佳。在本研究中，我们构建了一种新型的益生菌递送系统，用于充分发挥益生菌疗法的疗效。该递送系统以甲基丙烯基修饰的透明质酸（MeHA）为骨架，以含缩硫酮键的二硫醇连接臂（linker）为交联剂，在生理条件下通过硫醇-烯点击反应形成活性氧（ROS）响应的透明质酸水凝胶（HA-gel），并负载罗伊氏乳杆菌（Lactobacillusreuteri,LR），得到益生菌递送系统HA-LR。首先，利用流变学实验和扫描电镜测试了水凝胶的物理性质和微观结构。随后通过体外模拟消化实验，测试了水凝胶在胃液和小肠液环境下对LR的保护作用。同时，为了研究HA-LR在结肠中的保留情况，我们分别在体外和体内测试了HA-gel在肠道炎症粘膜部位的粘附作用。最后，我们采用葡聚糖硫酸钠（DextranSulfateSodiumSalt,DSS）诱导的小鼠结肠炎模型，评估了HA-LR对IBD的体内疗效，并且利用病理学手段初步探究了其治疗机制。实验表明，罗伊氏乳杆菌被成功的包裹在水凝胶中，且水凝胶对乳杆菌具有显著的保护作用，在胃液中孵育的包封乳杆菌的存活率是未包封乳杆菌的106倍，保证了乳杆菌可以顺利到达结肠并保持活力。随后，我们验证了水凝胶可以通过正负电荷相互作用选择性粘附于结肠炎症部位，显著延长了乳杆菌在发炎结肠中的保留时间。在24h后，小鼠粪便中仍能检测到较高丰度的乳杆菌。到达结肠炎症部位后，高浓度的ROS可以氧化断开水凝胶结构中的缩硫酮键使其降解，从而释放包封的LR。同时对过量ROS有良好的清除效果，显著减轻细胞的氧化损伤。最后，体内实验表明，HA-LR对DSS诱导的小鼠结肠炎有显著的治疗效果，显著提高了小鼠存活率，减轻了IBD症状，抑制了促炎细胞因子的分泌，增加了抗炎细胞因子的分泌，且治疗效果优于未被包封的乳杆菌。综上所述，我们构建了一种ROS响应的靶向肠道炎症部位的水凝胶系统，并成功用于罗伊氏乳杆菌的口服递送以治疗IBD。该系统具有良好的靶向性、控释性和生物安全性，为开发用于肠道炎症相关药物和生物活性制剂的口服递送系统提供了研究方向。收起

关键词 : 结肠炎益生菌疗法益生菌递送系统

2. 益生菌L.casei Zhang在干酪中的应用研究

[学位论文] 董成内蒙古农业大学 2008年硕士导师: 张和平共45页

摘要 : 研究在在Cheddar干酪生产中添加2％，1％，0.1％，以及在Cottage干酪生产中添加2％，1％，0.5％的L.casei Zhang发酵剂制作益生菌干酪，并同时做不添加L.casei Zhang的空白对照组。对各组Cheddar干酪在8℃180d成熟期和各组Cottage干酪在4℃28d储藏期中... 展开

关键词 : 益生菌 Zhang 干酪

3. 益生菌L.casei Zhang固态发酵特性的研究

[学位论文] 崔景丽内蒙古农业大学 2008年硕士导师: 孙天松共38页

摘要 : 本课题对分离自内蒙古传统发酵酸马奶中的益生菌干酪乳杆菌Zhang(L.casei Zhang)进行固态发酵。经过培养基和发酵条件的优化后，以液态发酵(含水量90％)作比较，对基质初始含水量为55％的固态发酵下L.casei Zhang生长及代谢特性进行了初步研究。所得结... 展开本课题对分离自内蒙古传统发酵酸马奶中的益生菌干酪乳杆菌Zhang(L.casei Zhang)进行固态发酵。经过培养基和发酵条件的优化后，以液态发酵(含水量90％)作比较，对基质初始含水量为55％的固态发酵下L.casei Zhang生长及代谢特性进行了初步研究。所得结论如下: L.casei Zhang固态发酵培养基和发酵条件的优化结果是:每千克基料中含豆粕390g、麸皮490g、葡萄糖29g、乳清粉59g、碳酸钙29g、硫酸铵2g、硫酸镁1g，初始含水量55％(湿基)，发酵时间为60h。在0～60h的发酵期内，随着培养时间的延长，L.casei Zhang活菌数逐渐增加，固态发酵条件下最高可达(107.23±17.50)×10℃CFU/g，液态发酵条件下最高达(24.90±3.68)×108CFU/ml。固态发酵条件下L.casei Zhang对还原糖的利用与液态发酵有相似之处，发酵期内的前12h是L.casei Zhang利用还原糖的高峰期。在0.05的显著水平下，固态发酵18h合成的胞外多糖量显著高于同时间液态发酵的合成量，在24h、36h、60h固态发酵合成的胞外多糖则显著少于液态发酵的合成量，培养48h时二者差异不显著。 L.casei Zhang蛋白水解力随着菌体生物量的增加、发酵时间的延长呈上升趋势。在60h的发酵时间范围内，L.case Zhang蛋白水解活性在固态发酵条件下较液态发酵条件下弱，表现为OPA法测得液态发酵物中游离氨基氮的增加量最大可以达到163.61mg/L，而固态发酵物中游离氨基氮含量均低于未发酵的对照样；并且HPLC法分析得到，液态发酵条件下各种游离氨基酸总和显著大于固态发酵的各种游离氨基酸总和(P<0.05)。随培养时间的延长液态发酵体系中乳酸和乙酸含量逐渐增加，固态发酵体系中二者呈不规则变化。固态发酵与液态发酵条件下L.casei Zhang细胞膜中软脂酸(C16:O)和油酸(C18:1)的含量差异不显著，而液态发酵L.casei Zhang细胞膜中亚油酸(C18:2)和亚麻酸(C18:3)的含量显著高于固态发酵(P<0.05)。固态发酵基质的烘干温度为35℃时，L.casei Zhang的存活率较高为17.51％，其活菌数可达39.8×108CFU/g。收起

关键词 : 益生菌 Zhang 固态

4. 益生菌的黏附及免疫调节机理的初步研究

[学位论文] 李正上海海洋大学 2008年博士导师: 李健共90页

摘要 : 黏附能力是益生菌发挥有益作用的先决条件，也是评价益生菌功能的重要指标之一，研究益生菌的黏附对认识微生态学的基本规律有着重要意义。益生菌对机体免疫系统的调节及作用机制也是目前研究的热点问题之一。本论文以牙鲆和大菱鲆为研究对象，探讨了... 展开黏附能力是益生菌发挥有益作用的先决条件，也是评价益生菌功能的重要指标之一，研究益生菌的黏附对认识微生态学的基本规律有着重要意义。益生菌对机体免疫系统的调节及作用机制也是目前研究的热点问题之一。本论文以牙鲆和大菱鲆为研究对象，探讨了益生菌对上述两种鱼类肠黏液的黏附特性，并从Toll样受体信号转导途径初步探讨了益生菌调节牙鲆免疫功能的分子机理。研究内容分为两部分，第一部分主要研究益生菌黏附特性，包括黏附检测方法的建立，高黏附性能菌株的筛选，表面黏附蛋白及肠黏液受体的鉴定及益生菌的肠道定植能力分析；第二部分主要研究高黏附能力益生菌(鼠李糖乳杆菌)通过Toll样受体介导的信号途径调节牙鲆机体免疫功能的分子机理。 1．MTT比色法测定微生物黏附能力的条件优化：对MTT比色法测定微生物数量的多种影响因素进行优化，以期建立稳定的反应体系，并以该方法测定微生物的黏附能力。试验比较了DMSO、HCl-Isopropanol、DMSO-SDS、DMF-SDS四种溶剂对甲躜颗粒(FMZ)的溶解效果以及在上述溶剂中FMZ的吸收光谱特性，分析了MTT与微生物作用时间对光吸收值的影响。最后利用优化的MTT比色法测定黏红酵母、鼠李糖乳杆菌及纳豆芽孢杆菌的活菌数量。结果，SDS-DMF溶剂对FMZ的溶解效果最好，在570nm波长有较大吸收值，MTT与微生物的孵育时间以2h为宜。在一定的浓度范围内，上述三种微生物的活菌数量与FMZ的OD值存在良好的线性关系。其中纳豆芽孢杆菌在6．30×106～2．02×108 cfu·ml-1范围内，活菌数量与FMZ的吸光度值呈良好相关性(R2=0．9981 )，鼠李糖乳杆菌和黏红酵母的线性范围分别为5．40×106～1．73x108 cfu·ml-1 (R2=0．9899 )、1．51×106～0．98×108cfu·ml-1 (R2=0．9921)。 2．不同益生菌株对牙鲆及大菱鲆肠黏液黏附能力的比较：采用MTT比色法测定鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌、纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、黏红酵母和假丝酵母对牙鲆和大菱鲆肠黏液的黏附情况，获得对牙鲆和大菱鲆肠黏液具较强黏附能力的菌株，为后续的试验提供试验菌株。以碳烃化合物黏着法测定上述菌株的表面疏水性，以明确黏附能力与菌体表面疏水之间的相互关系。结果表明所有菌株均可黏附于牙鲆和大菱鲆肠黏液，黏附百分率在4％～25％之间。黏附能力由强到弱依次为：黏红酵母>鼠李糖乳杆菌>假丝酵母>嗜酸乳杆菌>枯草芽孢杆菌>纳豆芽孢杆菌。同一菌株对两种肠黏液的黏附能力无明显差别；但不同菌株对肠黏液的黏附能力则存在较大的差异。各菌株表面疏水性存在较大差异，其中黏红酵母表面疏水性最强；嗜酸乳杆菌疏水性最弱，枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌及鼠李糖乳杆菌的表面疏水性处于中间水平。所测试的6株益生菌的表面疏水性与其黏液黏附能力之间无明显相关性。结论，黏红酵母和鼠李糖乳杆菌对牙鲆及大菱鲆肠黏液都具有较强黏附能力，这种黏附能力具有种属特异性，受宿主黏液影响较小。 3．黏红酵母黏附牙鲆肠黏液的影响因子研究：采用MTT比色法研究了pH、温度、二价阳离子对黏红酵母黏附作用的影响以及不同生长阶段的黏红酵母对牙鲆黏液的黏附特点。结果显示，在10～30℃黏红酵母对牙鲆肠黏液的黏附随温度升高而增强，中性偏酸的环境有利于黏红酵母的黏附；Ca2+能显著增加黏红酵母的黏附，但Mg2+促黏附作用不明显；处于对数生长期的黏红酵母对牙鲆肠黏液的黏附能力最强，其次是延滞期的酵母，而稳定期和衰亡期的黏红酵母黏附能力显著减弱。上述结果说明黏红酵母对牙鲆肠黏液的黏附作用不仅受多种环境因子的影响，也受其自身生理状态的影响，其黏附作用具有可控性，这对黏红酵母在牙鲆肠道内黏附、定植的调控有一定的参考价值。 4．黏红酵母和鼠李糖乳杆菌在牙鲆肠道的定植：将上述两种益生菌添加到基础饲料中连续投喂牙鲆21d，然后改投基础饲料继续饲养14 d(试验组)，对照组一直投喂基础饲料。分别于试验的第0、7、14、21、28、35d取样测定牙鲆肠道弧菌、乳酸菌及酵母数量，计算对照组与试验组牙鲆的成活率。结果表明，前21d试验组牙鲆肠道黏红酵母数量达到了104 cfu·g-1，乳酸菌数量达到106cfu·g-1，显著高于对照组；试验组牙鲆肠道弧菌总数随黏红酵母及鼠李糖乳杆菌的增加而减少，并显著低于对照组。改投基础饲料后，试验组牙鲆肠道两种益生菌在肠道中的数量明显减少，但仍高于对照组；弧菌总数有所增加，但显著低于对照组。试验组牙鲆成活率高于对照组。结论：黏红酵母和鼠李糖乳杆菌能够在牙鲆肠道定植，并能降低牙鲆肠道弧菌总数，降低牙鲆死亡率。因此具有较好的应用前景。 5．黏红酵母表面黏附相关蛋白及黏液受体的初步研究：前期的试验发现黏红酵母对大菱鲆肠黏液具有较强黏附能力，为进一步了解其黏附机制。采用Western-blot技术，对黏红酵母表面黏附蛋白和肠黏液受体进行了初步研究。结果表明，黏红酵母表面蛋白预先与肠黏液孵育2h后，显著抑制了黏红酵母与肠黏液的结合，其黏附百分率下降了83．6％；Western-blot显示黏红酵母表面蛋白中分子量为38．5 ku和28．6 ku的两个蛋白参与对肠黏液的黏附过程，大菱鲆肠黏液中分子量为27．3 ku和22．3 ku两个蛋白可与黏红酵母表面蛋白特异性结合。糖原染色显示上述四个蛋白均为糖蛋白。 6．鼠李糖乳杆菌通过Toll样受体信号途径诱导牙鲆天然免疫反应：为阐明Toll样受体信号途径在鼠李糖乳杆菌诱导牙鲆天然免疫反应中的作用，将鼠李糖乳杆菌和牙鲆巨噬细胞共同培养2h，然后用半定量反转录PCR法分析巨噬细胞Toll样受体(TLR2、TLR22)及肿瘤坏死因子(TNF-α) mRNA的表达情况，用凝胶阻滞电泳测定核转录因子NF-κB的活化状态。结果表明巨噬细胞经鼠李糖乳杆菌刺激后TLR22，TLR2及TNF-α mRNA表达量显著增加，凝胶阻滞试验也证实鼠李糖乳杆菌刺激后巨噬细胞核转录因子NF-κB被激活。为进一步评价胞外信号调节酶(ERK)，p38MAPK及核转录因子NF-κB在鼠李糖乳杆菌诱导巨噬细胞TLR2、TLR22和TNF-α mRNA表达中的作用，巨噬细胞先用ERK、p38MAPK及NF-κB特异性抑制剂PD98058，SB203508和BAY11-7082分别预处理1h，然后再与鼠李糖乳杆菌共培养2h。结果显示p38MAPK抑制剂SB203580预处理巨噬细胞1h后，显著抑制了巨噬细胞TLR22,TLR2及TNF-α mRNA的表达。抑制核转录因子NF-κB也显著降低了TNF-α的表达，但是不能抑制巨噬细胞TLR22、TLR2 mRNA的表达。综上所述，鼠李糖乳杆菌可能通过TLR22、TLR2介导的信号途径诱导TNF-α mRNA的表达，从而起始牙鲆天然免疫反应，而p38MAPK信号途径参与了巨噬细胞TLR22，TLR2及TNF-α基因的表达调控。收起

关键词 : 益生菌免疫调节机理

5. 益生菌干预治疗儿童腹泻有效性的meta分析

[学位论文] 王长聪吉林大学 2021年硕士导师: 李波共78页

摘要 : 目的：尽管全球在降低儿童死亡率方面取得了很大成就，但腹泻仍然是对儿童健康的严重威胁，尤其是对于5岁以下儿童。益生菌可以用来预防和改善腹泻发生的严重程度，对腹泻具有积极作用，但国内外尚无研究报道益生菌干预对18岁以下腹泻患儿的治疗... 展开目的：尽管全球在降低儿童死亡率方面取得了很大成就，但腹泻仍然是对儿童健康的严重威胁，尤其是对于5岁以下儿童。益生菌可以用来预防和改善腹泻发生的严重程度，对腹泻具有积极作用，但国内外尚无研究报道益生菌干预对18岁以下腹泻患儿的治疗作用的meta分析。本研究通过检索收集益生菌干预和腹泻患儿的腹泻指标，利用meta分析的方法，对益生菌干预在腹泻患儿中的作用进行系统评估，为临床和实践提供参考。方法：在PubMed、WebofScience和Cochranelibrary等英文电子数据库，以及中国知网CNKI、万方、维普中文期刊全文数据库和中国生物医学文献数据库等中文电子数据库中，按照PICOS原则和纳入排除标准同时检索，对符合标准的文献进行数据摘取，使用Cochrane风险偏倚评估工具对文献进行文献质量评价。利用Rsoftwareversion3.6.2“meta”包对数据进行meta分析。连续性结果变量用标准均值差(SMD)和95%置信区间(CI)评价，二分类结果用风险比(RR)和95%CI描述。当原始文献中没有直接提供连续变量的标准差时，采用Cochrane手册中提供的公式计算相应的标准差。用I2统计量评估统计学异质性，进行敏感性分析检验结果的稳健性。用Egger检验识别可能的发表偏倚，并利用亚组分析探究潜在的异质性。结果：本研究检索到中文文献1583篇，其中万方数据库465篇，知网数据库13篇，维普数据库13篇，中国生物医学文献数据库1092篇；检索到英文文献14704篇，pubmed数据库7116篇，webofscience数据库6018篇，Cochrane数据库1570篇。去除重复文献并对文献的题目和摘要进行阅读，并对其中293中文文献和170篇英文文献进行全文阅读。本研究最终纳入了符合标准的文献140篇，其中中文文献87篇，英文文献53篇，其中研究指标包括腹泻持续时间、呕吐持续时间、发热持续时间、第三天腹泻次数、干预后腹泻次数、第三天腹泻频率和干预后腹泻频率等7项。本研究根据GRADE系统的标准要求，经过评估认为所有的结局指标均应当考虑降低至少一个质量等级，因此所有结果的证据等级均为中等质量。以I2为检验指标的异质性检验结果表明除第三天腹泻频率结局指标外，其余指标均具有高异质性的特征。分别有113篇、38篇和57篇文章研究腹泻持续时间和呕吐持续时间、发热持续时间。Meta分析的结果显示，益生菌干预可以有效减少腹泻患儿的腹泻持续时间[SMD=-1.456(-1.640,-1.273)]、呕吐持续时间[SMD=-1.142(-1.436,-0.848)]和发热持续时间[SMD=-1.485(-1.771,-1.199)]。此外，研究第三天腹泻次数的文章和干预后腹泻次数的文章分别有23篇和29篇，综合分析的结果同样表明，益生菌干预对于改善腹泻患儿的第三天腹泻次数[SMD=-0.373(-0.617, -0.128)]和干预后腹泻次数[SMD=-1.014(-1.376,-0.653)]也有积极有益的作用。本研究同时分析了益生菌干预对第三天腹泻频率和干预后腹泻频率的影响，结果发现益生菌干预还可以降低腹泻患儿在第三天和干预后腹泻发生率，益生菌组第3天的腹泻发生率为34.67%(1378/4001)，安慰剂或无效治疗对照组为58.22%(2224/3820)[RR=0.597(0.569,0.627)]。益生菌组干预后的腹泻发生率为29.38%(718/2444)，而安慰剂或无效治疗对照组为46.33%(1067/2303)[RR=0.651(0.582,0.729)]。结论： 1.益生菌干预可能可以有效缩短腹泻儿童的腹泻持续时间，且对不同类型的腹泻均有一定的积极作用； 2.益生菌干预还可能缓解腹泻儿童的其他常见症状，缩短腹泻患儿的呕吐持续时间和发热持续时间，还可以降低干预第三天和干预后的腹泻发生风险； 3.与非轮状病毒腹泻相比，益生菌对于治疗轮状病毒腹泻可能具有更好的效果； 4.联合使用多种益生菌可能会对腹泻儿童产生更好的治疗作用。收起

关键词 : 儿童腹泻益生菌 meta分析

6. 益生菌对桉树青枯病的防治效应

[学位论文] 邓兆峰广西大学 2008年硕士导师: 黄宝灵共68页

摘要 : 桉树(Eucalyptus spp.)是桃金娘科桉树属的总称，其原产地为澳大利亚和少数几个印度尼西亚及附近的岛屿。因其抗性强、耐干旱瘠薄、适应性广、种植容易、萌芽力强、速生高产等特点，成为我国最重要的速生商品林外来树种，在我国南方大面积种植。但是在... 展开桉树(Eucalyptus spp.)是桃金娘科桉树属的总称，其原产地为澳大利亚和少数几个印度尼西亚及附近的岛屿。因其抗性强、耐干旱瘠薄、适应性广、种植容易、萌芽力强、速生高产等特点，成为我国最重要的速生商品林外来树种，在我国南方大面积种植。但是在大面积的发展桉树速生丰产林的同时遇到了许多问题，其中在病害方面桉树青枯病是比较严重的。因此，通过合理的试验找出合适的方法防治桉树青枯病具有十分重要的意义。本文以研究益生菌对桉树青枯病的防治效应为目的，主要在益生菌对桉树的生长效应和防治效果方面作了综合的研究。初步试验结果如下： 1．从野外采样分离、筛选出四个致病力比较强的青枯病原菌菌株(Ⅴ-1-1、Ⅳ-1-1、Ⅴ-1-2、Ⅲ-2-2)，其中菌株Ⅴ-1-1的致病力最强。分离获得24个马勃类真菌菌株，经试验可以看出对青枯病菌都有不同程度的拮抗作用。本试验中固氮菌株N-3、解磷菌株P15、解钾菌株K4-3和K14对青枯病菌具有一定的拮抗作用，但仍需进一步的试验去验证。 2．供试的10个马勃类真菌对桉树幼苗的生长均具有不同程度的促进作用。接种3个月之后测量苗高、地径和生物量3个指标，其中苗高比对照增加14.5％-68.1％；苗木地径比对照增加8.1％-49.7％；幼苗生物量(干重)比对照增加5.3％-58.8％。根据桉树幼苗的生物量、苗高生长量、地径生长量3个指标选择对桉树生长效应良好的优良菌株，经综合比较后认为菌株1-6、2-1、2-3、5-6为优良菌株。供试的11个益生菌组合对桉树幼苗的生长均具有不同程度的促进作用。接种3个月之后测量苗高、地径和生物量3个指标，其中苗高比对照增加21.7％-62.7％；苗木地径比对照增加13.8％-48.8％；幼苗生物量(干重)比对照增加2.3％-88.3％。根据桉树幼苗的生物量、苗高生长量、地径生长量3个指标选择对桉树生长效应良好的优良菌株组合，经综合比较后认为菌株组合Z-3、Z-5、Z-8、Z-4、Z-2、Z-11为优良菌株组合。 3．接种不同马勃类真菌和益生菌组合形成的菌根化苗木，在人工接种青枯病菌的条件下，均可降低青枯病的死亡率和病情指数，或者可推迟青枯病的发生期。除个别菌株外，多数菌株在降低桉树青枯病发生的作用方面，确有一定效果。接种马勃类真菌的苗木最早发病天数普遍推迟2-9d，死亡率比对照苗降低6.7％-40％；病情指数比对照苗降低9.1％-40.8％，其中以菌株5-6、1-6、6-1、2-1、4-1的防病效果较好；接种益生菌组合的苗木最早发病天数普遍推迟1-9d，死亡率比对照苗降低20％-46.6％；病情指数比对照苗降低15％-46.6％，其中以菌株组合Z-4、Z-3、Z-8、Z-5、Z-6、Z-9的防病效果较好。因此，下一步经田间试验验证后，利用桉树菌根化苗木造林，将使当前青枯病害发生面积和分布范围逐年增加的现状得到部分改善。此方法也是目前防治桉树青枯病的有效且可行的方法之一。收起

关键词 : 益生菌桉树青枯病

7. 益生菌干预力竭运动大鼠胃肠组织Ghrelin、PYY、MTL和GAS表达的影响

[学位论文] 曾世程湖南科技大学 2019年硕士导师: 蔡建光共59页

摘要 : 目的：肠道是机体最长的消化器官，具有分解和吸收营养物质，维持机体的正常发育和生长。目前研究发现，中小强度运动训练能够有利于机体肠胃正常的生理功能。而长时间的激烈运动或高强度运动应激常引起肠道屏障功能受损，肠道微生态系统紊乱，而胃肠... 展开目的：肠道是机体最长的消化器官，具有分解和吸收营养物质，维持机体的正常发育和生长。目前研究发现，中小强度运动训练能够有利于机体肠胃正常的生理功能。而长时间的激烈运动或高强度运动应激常引起肠道屏障功能受损，肠道微生态系统紊乱，而胃肠道分泌的胃肠激素Ghrelin、PYY、MTL和GAS对机体内的胃肠道调节具有重要的生理作用。此外，益生菌是人和动物等宿主有益的微生物，具有增强肠道的消炎抗菌、抗氧化和提高肌肉的抗疲劳能力等作用。因此，为探讨运动员在益生菌干预后胃肠道的机能变化，拟建立力竭运动大鼠模型阐述运动员胃肠道激素的变化机制。方法：SD雄性大鼠40只，10周龄，体重(250±10)g。根据大鼠的运动状态以及补充剂量的情况，大鼠在适应性饲养1周后，将大鼠随机分为安静对照组(NC)，运动对照组(ME)，安静给药组(NCY)，运动给药组(MEY)。ME与MEY组进行6周运动训练至力竭，速度为19.3m/min，坡度为5o，每天训练1次，6d/周。NCY与MEY组每日灌胃益生菌溶液10.0mL/(kg.d-1)，浓度为2g/ml。力竭运动结束后，大鼠空腹24h，用乌拉坦溶液(浓度20%)按3mL/kg腹腔注射麻醉后迅速解剖取胃和肠，胃沿胃大弯处剪开分为二份，肠组织主要取结肠部分，然后采用RT-PCR和WesternBlot法检测大鼠胃和结肠组织中Ghrelin、PYY、MTL和GAS的表达变化。结果：(1)运动后大鼠胃、肠组织GhrelinmRNA及蛋白表达均高于安静对照组(P＜0.01)；但通过补充益生菌溶液后，MEY组大鼠胃、肠组织GhrelinmRNA和蛋白表达均高于NC组(P＜0.05或P＜0.01)。 (2)运动后大鼠胃、肠组织PYYmRNA和蛋白表达均高于NC组(P＜0.01);但通过补充益生菌溶液后，NCY和MEY大鼠胃、肠组织PYYmRNA和蛋白表达均低于ME组(P＜0.05或P＜0.01)。 (3)运动后大鼠胃、肠组织MTLmRNA和蛋白表达均低于NC组(P＜0.01)；但通过补充益生菌溶液后，MEY组大鼠胃、肠组织MTLmRNA表达均均高于ME组(P＜0.05或P＜0.01)。MEY组大鼠胃组织MTL蛋白表达高于ME组(P＜0.01)。 (4)运动后大鼠胃、肠组织GASmRNA和蛋白表达均低于NC组(P＜0.05或P＜0.01);MEY组大鼠胃、肠组织GASmRNA和蛋白表达均高于ME组(P＜0.05或P＜0.01)。结论：(1)长时间的运动训练致使大鼠胃、肠组织Ghrelin和PYY表达有上升的趋势，而MTL和GAS表达则发生下调的变化，这与与大鼠体内氧的缺乏，糖原或能量物质的耗尽导致机体内能量代谢失衡，以及胃肠的加速排空或产生胃肠道紊乱有关。 (2)补充一定量的益生菌致使大鼠胃、肠组织Ghrelin和PYY、MTL和GAS的表达都出现了上调的变化，这表明补充益生菌能够调节大鼠机体内胃肠道内能量代谢，抑制了胃肠道的排空，从而致使胃肠道在力竭运动中发生异常，达到保护胃肠道功能受到损伤的作用。(3)补充一定量的益生菌能够达到保护胃和肠组织黏膜细胞的损伤，从而维持胃肠道的相对稳态，防止胃肠道功能紊乱。收起

关键词 : 力竭运动胃肠组织益生菌

8. 益生菌L.casei Zhang高密度培养工艺的研究

[学位论文] 高鹏飞内蒙古农业大学 2008年硕士导师: 张和平共50页

摘要 : 高密度培养研究是发酵剂制备过程中重要的一环，对益生菌发酵乳制品的开发与应用具有重要的理论和实际意义。本文以一株具有良好益生特性的益生菌L.casei Zhang为研究对象，从培养基及培养条件的优化、底物抑制、营养物质的补充等方面进行研究，完成了... 展开高密度培养研究是发酵剂制备过程中重要的一环，对益生菌发酵乳制品的开发与应用具有重要的理论和实际意义。本文以一株具有良好益生特性的益生菌L.casei Zhang为研究对象，从培养基及培养条件的优化、底物抑制、营养物质的补充等方面进行研究，完成了益生菌L.casei Zhang的高菌体密度培养及益生菌发酵剂的制备。主要试验结果如下： 1.培养基的优化:通过单因素试验、正交试验和响应面设计得到L.caseiZhang菌体干重(Y)对碳源(X1)、氦源(X2)、缓冲盐(X3)的多项回归方程为：Y=2.30+0.47x1+0.59x2+0.22x3+0.18XlX2+0.16XlX3-0.047x2x3-0.25x12-0.27X22-0.084x3+0.100xlx2x3-0.41x1x2-0.039x12X3-0.20x1X22。并根据此方程得到了优化培养基:葡萄糖20.9g/L、大豆蛋白胨10.45g/L、酵母粉10.45g/L、磷酸氢二钾3.5g/L、乙酸钠14.6g/L、柠檬酸钠2.3g/L、MgS04·7H2O1g/L、MnSO4·5H2O54mg/L、吐温-801g/L。L.casei Zhang在此增殖培养基中经37℃18h培养活菌数可达到4.78×109cfu/mL。 2.培养条件的优化：通过单因素试验，得到较适培养条件为：温度37℃、摇床转速0rpm、起始pH6.5、接种量为1×106 cfu/mL。 3.生长动力学模型的推导:在优化培养基及培养条件确定的条件下选用Logistic Equation作为L.casei Zhang细胞生长动力学模型，研究得出其方程为：X(t)=0.0079e0.4716t/1-(0.0079/2.55)(1-e0.4716t)4。发酵罐发酵条件的探索：在发酵罐(3L)中研究了不同培养条件和培养方式对L.casei Zhang生长的影响，结果为：培养温度:37℃ 接种方式:种子液预培养10h后按7%接种(1.5×108 cfu/mL)搅拌速度:300rpm中和剂:17.5%氨水pH值:5.9(起始pH6.5)通气条件:间歇通氮气200mL/2h培养方式:一次性加入补料所需营养物质培养基成份:葡萄糖8.08g/L、酵母粉8.02g/L、大豆蛋白胨12.8g/L、磷酸氢二钾3.18g/L、乙酸钠13.27g/L、柠檬酸钠2.12g/L、MgS04·7H2O 0.88g/L、MnS04·5H2O 47.77mg/L、吐温-80 0.88g/L。在此培养基及培养条件下发酵12小时，L.casei Zhang活菌数可达到3.0×1010cfu/ml5.L.casei Zhang中试放大试验与菌粉的制备:在发酵罐较适培养基及培养条件的基础上，在发酵罐(30L)中得到活菌数为2.89x1010cfu/mL，将该发酵液制得发酵剂菌粉，活菌数可达4.0x1011cfu/g，活力为5.16u。收起

关键词 : 益生菌 Zhang 高密度

9. 三联益生菌的培养及其合生素的研制

[学位论文] 郭迎卫南京工业大学 2004年硕士导师: 张赣道共44页

摘要 : 本文以植物乳杆菌、地衣芽孢杆菌和两歧双歧杆菌这三种菌为益生菌,研究了联合培养三种菌的最优工艺条件,优化了该培养基,节约了生产成本。在增殖培养过程中,添加低聚多糖来缩短益生菌到达对数生长期的时间。该益生菌复配益生元制得合生素,研究了乳化缩... 展开

关键词 : 三联益生菌培养合生素

10. 长货架期益生菌酸乳的研制

[学位论文] 顾宝维江南大学 2006年硕士导师: 张灏共38页

摘要 : 含益生菌的活性酸乳是近年来国内外乳品市场上日渐兴起的一类乳制品。它因其独特的风味与口感，突出的营养保健功效而备受消费者青睐。针对目前国内市场上益生菌酸乳系列产品的空白，本文研究了具有较长货架期(约35d)的益生菌酸乳的发酵剂筛选方... 展开

关键词 : 货架期益生菌酸乳发酵