中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

[学位论文] 王安琪中国科学院大学 2022年博士导师: 韩宁共151页

摘要 : 近地面臭氧污染会对人体健康、生态系统、气候变化等方面产生严重危害。面对当前臭氧污染呈现的快速上升和蔓延态势，亟需研究和开发高效稳定、安全环保且经济的室温催化剂。其中过渡金属氧化物由于价格低廉，具有氧化还原性、价态可变、稳定性好等优... 展开近地面臭氧污染会对人体健康、生态系统、气候变化等方面产生严重危害。面对当前臭氧污染呈现的快速上升和蔓延态势，亟需研究和开发高效稳定、安全环保且经济的室温催化剂。其中过渡金属氧化物由于价格低廉，具有氧化还原性、价态可变、稳定性好等优点，在催化和吸附方面具有广阔的应用前景。本论文以n型ZnO为半导体模型，通过缺陷工程的构建探究了臭氧与催化剂之间的电子转移过程，并证实了n型金属氧化物半导体催化剂由于中间产物难以有效脱附导致催化活性低，且构造缺陷对其催化性能的提升有限，因此进一步对p型金属氧化物半导体进行研究。通过对比贵金属改性和小尺寸效应，发现减小尺寸对性能的提升更具潜力，因此通过构建缺陷工程对小尺寸Cu2O纳米颗粒进行改性以在尺寸优势基础上进一步提高其催化臭氧分解性能。在Cu2O粉末催化剂的实际应用过程中，为了充分发挥其高性能，对蜂窝铝基底进行改性并制作加工了高效负载型整体式催化剂。在原位合成策略指导下，采用一步成型工艺开发了铜基纳米线整体式催化剂，克服了传统涂敷工艺流程复杂，活性组分均匀性、分散性和锚固力较差等弊端，同时也是进一步提高p型Cu2O比表面积的一种延伸，为催化剂的应用奠定了基础。具体研究内容和结果如下: (1)通过共沉淀-煅烧法制备了n型ZnO作为半导体模型，通过在H2和O2中退火以及掺杂Ga和Li来调整其晶体缺陷。H2退火的ZnO对20 ppm O3的分解活性远高于纯ZnO和O2退火ZnO，掺杂Ga供体和Li受体进一步提高了其活性。机理研究表明，H2退火和Ga掺杂诱导产生的氧空位等施主缺陷对催化臭氧分解活性有利，而O2退火诱导产生的氧间隙等受主缺陷则抑制催化剂活性。这意味着晶体缺陷、O3和中间吸附氧物种之间存在电子转移。此外，催化剂的失活归因于中间吸附氧物种对氧空位的填充。以上结果为进一步改进臭氧降解催化剂提供了基本的认识，即构建施主缺陷能够为催化剂提供更多功能更强的活性位点以促进催化反应的开始和进行，非补偿型受主缺陷有利于中间吸附氧物种的脱附以促进限速步骤的进行和活性位点的恢复。但对于以电子载流子为主的n型半导体来说，仅通过构建受主缺陷对催化剂性能的提升有限。 (2)通过液相还原法制备了不同粒径和Ag掺杂/负载的p型Cu2O纳米颗粒，催化臭氧分解性能显示催化剂尺寸减小与贵金属改性对催化活性的提升力度相当，因此合成了一系列金属(Mg、Fe、Ni)掺杂的小尺寸Cu2O纳米颗粒。其中Mg掺杂Cu2O在600，000 mL g-1 h-1质量空速和1500 ppm臭氧的恶劣环境中显示出88.4％的高臭氧去除效率。光致发光和电子顺磁光谱表征表明，以空穴载流子为主的p型Cu2O本身由于有利于限速步骤的进行而具有较高催化活性，在此基础上掺杂Mg增加了施主缺陷浓度，增强了载流子迁移率，对臭氧降解有利。同时，原位漫反射傅里叶变换红外光谱显示臭氧降解过程中占主导的中间氧物种由纯Cu2O的O22-转变为Mg-Cu2O中易于脱附的O2，这有利于活性位点的恢复和催化反应的进行。以上结果表明，相较于n型ZnO，p型Cu2O可在苛刻条件下表现出更高的臭氧去除能力，其中Mg-Cu2O在高效去除臭氧方面具有广阔的前景。 (3)对蜂窝铝载体进行表面亲水改性处理及叠层组装，有利于水性催化剂前体负载量和分散性的提高及气流与催化剂的充分接触，改进了蜂窝铝载体的应用效果。在其上负载Cu2O催化剂制备而成的整体式催化剂在24，000 h-1体积空速下，对11 00 ppm O3的去除率在145h的寿命测试中始终＞99.3％。通过原位热氧化-还原法开发了Cu2O/CuO-Cu纳米线新型臭氧整体式催化剂，泡沫铜不仅作为载体起支撑作用，同时还是催化活性相的前体物。其对20 ppm O3表现出高催化活性，臭氧转化率在11，000 h-1的体积空速下保持为100％，在38，000 h-1时保持为94％左右。其优异性能归因于生成的Cu+/Cu2+氧化还原电对、施主/受主型点缺陷和Cu2O-CuO p-p异质结。以上结果为合成高效整体式催化剂提供了新策略。收起

关键词 : 臭氧污染半导体催化剂晶体缺陷臭氧去除能力

2. 基于现场总线技术的木材加工车间环境监控系统

[学位论文] 吕兵伟北京林业大学 2007年硕士导师: 韩宁共119页

摘要 : 现阶段,木材加工车间存在严重的环境污染问题,如:噪声、粉尘、有害气体、电磁辐射、火灾等,对作业工人的劳动安全和外部环境造成了严重危害,进而影响了车间工作效率和企业效益.为了木材加工企业的可持续发展和实现清洁生产的目标,企业必须投入大量人力... 展开现阶段,木材加工车间存在严重的环境污染问题,如:噪声、粉尘、有害气体、电磁辐射、火灾等,对作业工人的劳动安全和外部环境造成了严重危害,进而影响了车间工作效率和企业效益.为了木材加工企业的可持续发展和实现清洁生产的目标,企业必须投入大量人力、物力到改善车间环境上来,而更好的改善车间环境需要首先建立先进的车间环境监控系统,加强车间环境监督力度. 本课题通过对木材加工车间环境现状的调查研究与分析,利用先进的LonWorks现场总线技术构建适合木材加工车间的环境监控网络系统,实现对车间环境的实时监测控制,并将相关数据进行网络共享,为木材加工车间环境的现场监督管理,或改善车间环境而进行的工艺改造等工作提供思路和技术支持.该系统的研究与构建将有助于提高企业数字化管理水平,加快企业信息化建设步伐. 笔者以北京XX家具公司机加工车间为研究背景,以车间环境监控网络为研究对象,在实验室条件下进行系统的设计研发,并取得以下成果: 1.建立了基于现场总线技术的车间环境监控系统的总体结构与功能模型. 2.提出了基于LonWorks控制网络的木材加工车间环境监控系统的解决方案. 3.深入剖析了LNS技术、LonWorks智能节点的软硬件结构及其开发技术,完成了节点应用程序的开发和底层监控网络Infranet的构建. 4.着重研究了车间环境监控系统的网络化内部集成和外部集成技术,完成了集中监控管理软件、数据通信接口软件的设计开发及相关网络设备的二次开发,实现了Infranet、Intranet和Intemet三网的无缝连接. 5.完成了系统的调试工作. 总之,本文自主研究与设计了对木材加工车间进行环境监控的系统,更是首次将工业控制方法和现场总线技术应用其中.因条件限制,笔者仅仅完成了系统的初步研究,实现了其基本功能,还有许多问题值得继续研究. 收起

关键词 : 木材加工车间环境监控现场总线 LonWorks控制网络清洁生产

3. 周围性面瘫中医用药规律及临床研究

[学位论文] 徐慧山东中医药大学 2018年硕士导师: 韩宁共115页

摘要 : 目的：寻找周围性面瘫的中医用药规律并归纳出病因病机，从而拟定中药方并设立临床随机对照试验，以检验其临床效果，验证此次文献研究的价值。方法：搜集整理2001-2016年发表在期刊文献上的关于周围性面瘫的文献，用Clementine12.0软件对常用药... 展开

关键词 : 周围性面瘫加味牵正散用药规律临床疗效

4. 空调冷负荷的建筑信息化模型应用研究

[学位论文] 刘学成北京林业大学 2012年硕士导师: 韩宁共113页

摘要 : 随着城市化进程的加快与经济的迅速增长，中国的能源形势日益严峻。建筑能源消耗量占社会总能耗的30％，且该比重逐年提高，其中中央空调系统能耗占建筑运行总能耗的比例高达40％～60％。因此，使用先进的科学技术手段进行空调系统能耗分析是寻找建筑... 展开随着城市化进程的加快与经济的迅速增长，中国的能源形势日益严峻。建筑能源消耗量占社会总能耗的30％，且该比重逐年提高，其中中央空调系统能耗占建筑运行总能耗的比例高达40％～60％。因此，使用先进的科学技术手段进行空调系统能耗分析是寻找建筑节能的有效途径之一。在设计阶段，模拟空调能耗进而优化设计方案是实现建造阶段空调系统节能的首要环节，但由于目前的建筑设计信息无法被能耗分析工具共享，造成了建筑设计与能耗分析的严重脱节。另一方面，在空调系统的运营阶段，建筑设备自动监控系统采集的运行数据没有得到充分利用，缺少智能化节能专家系统的分析，因而无法提出节能优化控制方案。针对上述问题，本文引入建筑信息化模型(Building Information Modeling，BIM)技术，在建筑全生命周期内对空调系统开展节能分析研究，并取得了如下成果: (1)提出了基于建筑信息化模型技术的空调冷负荷计算方法，引入工业基础类标准(Industry Foundation Classes，IFC)作为建筑信息化模型的数据转换标准，通过可扩展标记语言(Extensible Markup Language，XML)对IFC文件进行处理，提高了以IFC文件为载体的建筑信息的跨平台共享能力。 (2)创建了IFC文件与能耗分析工具EnergyPlus输入数据文件(Input Data File，IDF)之间的信息映射关系，实现了建筑信息化模型数据向能耗分析工具的转换，并使用空调专业真实设计案例说明了数据转换功能的作用，实验分析结果证明了该方法能够有效提高建筑信息在建筑专业与暖通专业间的共享能力，对建筑设计方案的优化具有实际推广意义。 (3)分析了建筑运营管理阶段对建筑设计信息的需求，在上述转换方法研究的基础上，开发了筑信息化模型与建筑运营管理数据库的接口。 (4)根据调研的工程经验补充开发了某跨国公司的空调机组节能运行管理规则，并研制了基于人工神经网络理论的制冷机负荷预测分析模型，为空调节能专家诊断系统的设计奠定了基础。本课题搭建出建筑信息化模型与能耗分析诊断方法之间的桥梁，为建筑设计信息在建筑全生命周期内可重复利用提供了新颖的解决方案，并通过C#语言开发了一套数据转换应用程序，分别实现了BIM与能耗分析工具EnergyPlus、BIM与建筑管理数据库之间的数据接口，进而提出了空调节能专家系统的设计方案，为建筑运营数字化管理提供了技术支持。收起

关键词 : 建筑设计信息化模型空调能耗冷负荷分析 EnergyPlus 节能专家系统

5. 基于机器视觉的强化木地板表面瑕疵检测方法研究

[学位论文] 杨丽丽北京林业大学 2010年硕士导师: 韩宁共103页

摘要 : 以小径材为原材料强化木地板俗称人造木地板,具有耐磨、美观、环保、防潮、阻燃、防蛀、安装便捷、易于清洁护理、经济实用等诸多优点,且具有价格优势,所以应用发展迅速。然而在国内强化木地板生产线上,对于产品表面粘贴的木纹装饰纸的外观质量检验目... 展开

关键词 : 机器视觉强化木地板图像分割特征提取 BP神经网络

6. 张祜乐府诗研究

[学位论文] 刘凯河北大学 2015年硕士导师: 韩宁共100页

摘要 : 张祜是中晚唐时期乐府创作大家。本文确立了张祜乐府诗的文献，以郭茂倩《乐府诗集》为基础，补之以《梦江南》、《氐州第一》两首，总38题50首。对张祜乐府创作背景进行了梳理，从时代因素和个人因素两方面总结了其乐府创作的可能性与必然性。时代因... 展开

关键词 : 张祜乐府诗文献留存创作背景中晚唐时期

7. 盐碱处理对酿酒葡萄果实膨压和成熟进程的影响

[学位论文] 李芬齐鲁工业大学 2019年硕士导师: 韩宁共92页

摘要 : 为探讨盐碱处理果实对果实成熟启动及果实品质形成过程的影响，以酿酒葡萄品种“赤霞珠”为试验试材，采用50mmol·L-1NaCl和50mmol·L-1NaHCO3，并以水为对照，从花后38天(38 DAA)开始，每隔14天对葡萄果实进行直接喷施，共五次，每种处理选取的果穗... 展开为探讨盐碱处理果实对果实成熟启动及果实品质形成过程的影响，以酿酒葡萄品种“赤霞珠”为试验试材，采用50mmol·L-1NaCl和50mmol·L-1NaHCO3，并以水为对照，从花后38天(38 DAA)开始，每隔14天对葡萄果实进行直接喷施，共五次，每种处理选取的果穗数量均为60穗。重点探讨了盐碱处理酿酒葡萄果实对成熟过程中葡萄果实基本指标、果实膨压及相关关键基因表达量、ABA含量及ABA合成关键基因表达量的影响，从而明确果实成熟启动、ABA及果实膨压三者之间的关系。随后为了进一步探明ABA及果实膨压之间的关系，设计了ABA及氟啶酮(ABA合成抑制剂)处理果实试验。最终为探索盐碱处理改变葡萄果实发育进程机理奠定初步基础。主要结果如下： 1.在果实成熟过程中NaCl及NaHCO3处理果实粒重始终小于对照，直至88DAA果实粒重大于对照。说明盐碱处理果实推迟了成熟过程中葡萄果实粒重的增长，但没有影响成熟期果实的最终粒重，而处理却明显降低了果实成熟过程中花色苷及还原糖的积累量，同时降低了可滴定酸含量的下降幅度。并且NaCl及NaHCO3处理果实降低了果实的固酸比，说明盐碱处理果实延缓了果实的成熟进程。 2.随后使用qPCR检测与果实花色苷合成和糖积累相关的基因表达量。结果显示，各处理葡萄果实中的花色苷关键基因VvUFGT均在66DAA时开始表达；在78DAA时出现最高值，但对照组VvUFGT基因的表达量显著高于NaCl处理组。在葡萄成熟过程中各处理糖转运蛋白VvHT1和VvHT3的基因表达量不断下调，但对照组VvHT1和VvHT3的基因表达量显著高于同时期NaCl处理组。由此可知，盐处理果实后通过降低花色苷合成通路关键基因的表达量来减少果皮中花色苷的积累，并且下调果实糖转运蛋白基因的表达量造成处理后果实糖积累量下降。 3.选取NaCl处理组以进一步探讨其对果实发育进程的影响是否与果实ABA有关。因此本研究利用液质联用仪LC-ESI-MS测定了各处理葡萄果皮和果肉ABA含量，并使用qPCR测定ABA合成关键基因表达量。结果发现，在果实成熟进程中，NaCl处理的果皮和果肉ABA含量始终明显低于对照。而且在66DAA时，对照果肉和果皮ABA含量均已达到最大值，而NaCl处理组果肉和果皮的ABA含量在78DAA才达到最大值。因此，NaCl处理组推迟了果皮及果肉的ABA合成，且显著降低了ABA升高的幅度。荧光定量的结果也表明，NaCl处理不仅推迟了果皮及果肉ABA合成过程中关键基因VvNCED转录时间，而且明显降低了VvNCED的转录量，与ABA含量变化趋势一致。同时，使用质构仪对果实硬度进行测定的结果显示，和对照相比NaCl处理的葡萄果实在成熟过程中一直保持在较高水平，其果实的相对含水量也一直高于对照组。进一步分析与葡萄果实硬度相关的细胞壁修饰酶基因VvPME、VvPL、VvEXP和VvXTH表达量发现，NaCl处理推迟了细胞壁相关代谢酶基因表达量到达高峰的时间。由此可得，NaCl处理减缓了细胞壁解聚，加上果实含水量较高，从而导致果实膨压下降缓慢，使得NaCl处理组葡萄果实膨压高于对照组。 4.为了进一步探明ABA及果实膨压之间的关系，从花后38天开始，对葡萄果实喷布250mg·L-1ABA和氟啶酮(ABA合成抑制剂)，每两周进行一次喷布，共3次。结果表明，ABA处理果实能够增加成熟过程中果实糖及花色苷的含量，降低可滴定酸的含量，使果实提前转色，加快葡萄果实的成熟进程，同时提高了葡萄果实的内在及外观品质。通过对葡萄果实的成熟过程中细胞壁修饰酶基因VvPME、VvPL、VvEXP和VvXTH表达量的分析发现，ABA处理组表达量的上调幅度高于对照组或上调的时期比对照组提前，且ABA处理组的果实硬度显著低于对照组，而氟啶酮处理组则与ABA处理组呈现相反的效果，说明外源ABA的使用可以上调细胞壁修饰酶关键基因的表达量，从而加速葡萄果实硬度的下降，而对于葡萄果实相对含水量的分析结果也表明，ABA处理组的果实相对含量水低于对照组，进一步加速了ABA处理组果实膨压的下降。ABA处理组的VvUFGT基因表达量率先开始急速上调且相对表达量也较高，有利于果实花色苷的合成，氟啶酮处理组的VvUFGT基因上调时期较晚且基因表达量也较低，与此处理果实花色苷含量积累时间较晚，积累量较低相吻合。从糖转运蛋白VvHT1和VvHT3基因的表达状况来看，ABA处理能够提高基因表达量而氟啶酮处理的效果则相反。由此可知，ABA处理葡萄果实能够降低果实硬度，上调细胞壁相关酶的基因表达量，减少果实的相对含水量，从而使果实膨压下降，同时增加果实的糖、花色苷含量及与糖和花色苷相关的关键基因表达量，使果实的成熟启动提前，有利于葡萄果实内在及外观品质的形成。综合本试验研究结果：盐碱处理通过影响葡萄果实中的ABA合成关键基因的表达量而影响果实ABA含量，因降低了葡萄果实中ABA含量导致细胞壁相关代谢酶的基因表达量的下调，推迟了果实硬度的下降，又因盐碱处理使葡萄果实的相对含水量较高，进一步导致果实膨压下降时间的推迟及下降幅度的降低，从而减少了始熟期叶源端和果实库端的膨压差，下调了同化物运输的驱动力，最终延迟果实成熟启动及果实糖、花色苷等物质的积累。收起

关键词 : 酿酒葡萄盐碱处理果实成熟进程 ABA合成

8. 异源表达HSPs基因对酒酒球菌乙醇耐受性的影响

[学位论文] 刘朋齐鲁工业大学 2023年硕士导师: 韩宁共90页

摘要 : 在葡萄酒苹果酸-乳酸发酵（MalolacticFermentation，MLF）阶段，通过乳酸菌可以将酒中的苹果酸转化为乳酸，以改善葡萄酒的质量，其中乳酸菌中的酒酒球菌是执行苹乳发酵的重要菌种。随着对酒酒球菌特性的研究，发现酒酒球菌可以生长于低pH值、高乙醇... 展开在葡萄酒苹果酸-乳酸发酵（MalolacticFermentation，MLF）阶段，通过乳酸菌可以将酒中的苹果酸转化为乳酸，以改善葡萄酒的质量，其中乳酸菌中的酒酒球菌是执行苹乳发酵的重要菌种。随着对酒酒球菌特性的研究，发现酒酒球菌可以生长于低pH值、高乙醇等不利于大多数微生物生长的恶劣环境中，当然这种恶劣环境也会大大降低酒酒球菌的发酵速度和发酵能力。因此，提高酒酒球菌的抗逆性尤为重要。前期大量研究表明，在逆境条件下，生物体内的热激蛋白（HSP）具有防止蛋白异常折叠和聚集的特点，可以提升微生物对不利环境的耐受性。然而，在逆境条件下，不同来源的热激蛋白功能差异较大，对微生物抗逆的影响也各不相同。因此，本文克隆了两种不同来源的热休克蛋白基因，首先利用对乙醇不耐受的乳酸乳球菌为宿主进行异源表达，通过比较重组菌在不同乙醇含量的培养基中的生长情况来筛选对乙醇耐受能力影响最大的Hsp；然后利用优化后的酒酒球菌表达载体将对筛选出的热激蛋白基因转化酒酒球菌，并研究酒酒球菌转化菌株的乙醇耐受性及对葡萄酒苹乳发酵的影响。研究结果如下: 1.OoHsp18与LpHsp19.5基因的克隆及L.lactisMG1363/pMG36e-OoHsp18与L.lactisMG1363/pMG36e-LpHsp19.5表达菌株构建。通过PCR分别从酒酒球菌与植物乳杆菌基因组DNA中克隆出两种不同热激蛋白基因OoHsp18与LpHsp19.5。使用同源重组酶将OoHsp18与LpHsp19.5与乳酸乳球菌表达载体pMG36e进行连接，并转化进入大肠杆菌Fast-T1，随后筛选出阳性菌株进行测序验证。将验证成功的两个质粒pMG36e-OoHsp18和pMG36e-LpHsp19.5电转化到乳酸乳球菌MG1363中，构建L.lactisMG1363/pMG36e-OoHsp18与L.lactisMG1363/pMG36e-LpHsp19.5重组菌。 2.重组菌株L.lactisMG1363/pMG36e-OoHsp18与L.lactisMG1363/pMG36e-LpHsp19.5的pH与乙醇耐性测定。以野生型菌株作为对照组，两种重组菌株作为实验组，在不同pH与乙醇浓度条件下，测定了野生型菌株与两种重组菌株的生长曲线。结果显示野生型菌株与两种重组菌株均适宜在pH7中性条件下生长。LpHsp19.5基因与OoHsp18基因对乳酸乳球菌在不同pH条件下的生长影响不大。尽管在无乙醇条件下，野生型菌株与两种重组菌株的生长量无明显差异，但是在乙醇胁迫条件下，LpHsp19.5表达菌株生长优于OoHsp18表达菌株。进一步发现，在乙醇含量为6.0%条件下，野生型菌株与OoHsp18表达菌株相对电导率要高于LpHsp19.5表达菌株。因此我们推测表达LpHsp19.5使得菌株具有较好的耐乙醇能力。 3.酒酒球菌表达载体优化及LpHsp19.5过表达酒酒球菌构建。将实验室前期构建的酒酒球菌表达载体pHH60进行了启动子优化，以增加下游外源基因的表达量。结果显示，在pHH60基础上改造获得的pHH40表达载体使得下游报告基因GFP的绿色荧光信号明显呈现在酒酒球菌转化菌株中，而pHH60的转基因菌株基本观察不到相应的荧光信号，说明pHH40表达载体确实提高了外源基因在酒酒球菌的表达量，可以增加外源基因对酒酒球菌相应性状的影响。随后，使用pHH40载体与对菌株乙醇耐受性提高更大的LpHsp19.5进行重组，转化大肠杆菌Fast-T1，并从验证成功的阳性菌中提取重组质粒pHH40-LpHsp19.5，经电转化进入酒酒球菌，构建O.oeni/pHH40-LpHsp19.5重组菌株。 4.对重组菌株O.oeni/pHH40-LpHsp19.5进行乙醇耐受性测定。在不同乙醇浓度条件下，测定了野生型菌株与两株重组菌株的生长曲线及相对电导率。结果显示，野生型菌株在乙醇含量为12%时生长量明显下降，但重组菌株仍有较高生长量。此外在乙醇含量为10%条件下，O.oeni/pHH40-LpHsp19.5菌株的相对电导率明显低于野生型菌株。说明LpHsp19.5基因能够明显提高菌种抗乙醇的能力。 5.利用O.oeni/pHH40-LpHsp19.5菌株进行干白葡萄酒与干红葡萄酒苹乳发酵。将野生型酒酒球菌作为对照组，O.oeni/pHH40-LpHsp19.5菌株作为实验组，分别发酵酒精度为9.5（%v/v）干白葡萄酒和酒精度为10.2（%v/v）干红葡萄酒。结果表明两种菌株对干白的利用率及苹果酸转化率基本一致，并且对干白酒精度没有影响，在干红中也有同样表现。在两种菌发酵的干白和干红葡萄酒中苹果酸与柠檬酸含量皆下降，乳酸含量均升高，有机酸整体含量变化趋势一致，但是O.oeni/pHH40-LpHsp19.5菌株发酵的两款酒葡萄酒中，苹果酸的下降速度更快，表现出更快的降酸能力，并且发现与野生型菌株相比，重组菌株对干白与干红最终酯类物质总含量影响不大。综上所述，与来自于酒酒球菌的热激蛋白基因OoHsp18相比，来自于植物乳杆菌的LpHsp19.5可以更好地提高乳酸乳球菌转化菌株的乙醇耐受性，可能与热激蛋白对质膜的保护让其在逆境环境中维持稳定有关。随后LpHsp19.5基因通过优化后的酒酒球菌表达载体pHH40转化到酒酒球菌中，可以使转化菌株的乙醇耐受性提高20%，而且通过干白葡萄酒与干红葡萄酒的苹乳发酵试验可知，转化菌株使得葡萄酒苹乳发酵速度加快，保证在高乙醇环境中能顺利完成苹乳发酵。收起

关键词 : 葡萄酒酒酒球菌 HSPs基因乙醇胁迫苹果酸

9. 酒酒球菌表达体系构建及酯酶功能研究

[学位论文] 侯冬冬齐鲁工业大学 2021年硕士导师: 韩宁共90页

摘要 : 由于酒酒球菌（Oenococcus oeni,O.oeni）在葡萄酒酿造中的重要地位，越来越多的研究者对酒酒球菌做了相关研究。主要研究内容为酒酒球菌的培养和分离鉴定、酒酒球菌基因组中苹果酸-乳酸发酵（Malolactic Fermentation，简称苹乳发酵）启动有关基因及... 展开由于酒酒球菌（Oenococcus oeni,O.oeni）在葡萄酒酿造中的重要地位，越来越多的研究者对酒酒球菌做了相关研究。主要研究内容为酒酒球菌的培养和分离鉴定、酒酒球菌基因组中苹果酸-乳酸发酵（Malolactic Fermentation，简称苹乳发酵）启动有关基因及酒酒球菌抗极端环境基因等的研究。由于目前缺少高效表达的酒酒球菌转化体系，一般将这些基因异源表达于酿酒酵母中。但是，这对于研究上述基因与性状之间的相关性，带有明显的缺陷。因此，本文依据酒酒球菌基因组复制原点、大肠杆菌复制原点、酒酒球菌基因高效表达启动子及终止子和红霉素抗性基因构建了适合酒酒球菌的高效表达载体pHH40，并建立了合适的转化方法和参数，用于酒酒球菌基因功能研究及遗传改造。随后，将克隆到的酯酶基因插入到pHH40表达载体中转化酒酒球菌，以利用酒酒球酯酶表达工程菌进行酯酶基因功能的研究和酒酒球工程菌发酵性能稳定性测定。其结果如下： 1.酒酒球菌培养条件优化。选择不同培养基、培养温度以及氧气条件进行培养条件优化。在培养基方面，使用ATB、MRSM以及mFT80三种培养基培养酒酒球菌，结果显示，酒酒球菌在mFT80培养基中生长量最高，稳定期OD600值达到2.37；随后，使用mFT80培养基在20℃、25℃、28℃以及32℃温度条件下培养酒酒球菌，发现25℃条件下到达指数期的时间相比其他温度提前50h，稳定期OD600值达到2.83；而酒酒球菌在厌氧条件下生长速度优于有氧气条件，其稳定期OD600值在厌氧条件下能达到3.04。综上所述，酒酒球菌在mFT80培养基、25℃和厌氧条件下能够达到最佳生长状态。 2.酒酒球菌表达体系构建。利用同源重组技术将酒酒球菌基因组复制原点、大肠杆菌复制原点、酒酒球菌基因高效表达启动子及终止子和红霉素抗性基因重组在一起成功构建了酒酒球菌表达载体pHH40。同时，红霉素耐受性实验发现，酒酒球菌的红霉素抗性上限浓度为20μg/mL，该浓度可以作为酒酒球菌转化后的红霉素筛选浓度。随后，对酒酒球菌感受态和酒酒球菌转化参数进行研究，将表达载体pHH40转入酒酒球菌，获得酒酒球菌转化菌株O.oeni/pHH40，成功构建了酒酒球菌表达体系。 3.酯酶表达酒酒球工程菌构建及酯酶功能研究。将酯酶基因插入到表达载体pHH40中，构建酯酶表达载体pHH40-esterase。转化酒酒球菌后获得酯酶表达工程菌株O.oeni/pHH40-esterase。以野生型菌株作为对照，O.oeni/pHH40和O.oeni/pHH40-esterase作为实验组，分别发酵模拟葡萄酒和泽香葡萄酒，检测两种葡萄酒的残糖、酒精度和苹果酸等基本指标。结果表明：野生型菌株和两株遗传改造菌株的残糖、酒精度和苹果酸含量基本一致，无显著性差异。由此可以得出，酒酒球菌的遗传改造并不影响其本身发酵性能。接着使用GC-MS检测发酵酒中酯类物质种类和含量，结果表明：野生型菌株和O.oeni/pHH40发酵两种酒样中酯类物质种类和含量均没有明显差异。然而，O.oeni/pHH40-esterase发酵的模拟葡萄酒和泽香葡萄酒相对于野生型菌株酯类物质总含量分别降低了23.6%和54.9%。其中模拟葡萄酒中共有6种乙基酯含量明显降低，包括乙酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、癸酸乙酯、月桂酸乙酯以及棕榈酸乙酯，其含量分别降低了34.6%、14.4%、24.8%、33.6%、49.4%和41.7%；泽香葡萄酒中共检测到8种物质含量明显降低，除了上述6种乙基酯，还有2种乙酸酯含量也有明显降低，分别为乙酸异戊酯和乙酸己酯，其含量分别降低了50.1%、46.6%、52.0%、77.3%、47.9%、84.6%、83.4%和85.5%。以上含量降低的8种酯类物质大都具有水果类香气。由此可以推论，该酯酶能够在葡萄酒环境中保持活性，并且具有水解多种酯类物质的能力，能够平衡葡萄酒中酯类物质的含量。综上所述，本研究以酒酒球菌为研究对象，成功构建酒酒球菌表达载体pHH40和转化体系。并通过该表达载体和转化体系将来自于植物乳杆菌的酯酶基因转入酒酒球菌中，获得转化菌株O.oeni/pHH40-esterase。通过发酵模拟葡萄酒和泽香葡萄酒得知，酒酒球菌的遗传改造并不影响其本身的发酵性能；另外，本研究中的酯酶能够适应严苛的葡萄酒环境，具有广泛的底物范围，并且能够主导葡萄酒中酯类物质的分解作用，对于调节葡萄酒中酯类物质的含量有潜在的利用价值。收起

关键词 : 葡萄酒酿造酒酒球菌基因表达体系酯酶功能

10. 抑郁症与焦虑症中医用药规律分析及病机探讨

[学位论文] 亓淑杰山东中医药大学 2017年硕士导师: 韩宁共85页

摘要 : 目的：探讨中医治疗郁证的用药规律，并总结抑郁症及焦虑症用药和规律的异同点，分析郁证的病因病机以指导临床用药。方法：通过对CNKI中文期刊全文数据库文献的检索，范围规定为2001年1月1日至2016年12月1日，根据条件依次筛选出符合标准的文献... 展开目的：探讨中医治疗郁证的用药规律，并总结抑郁症及焦虑症用药和规律的异同点，分析郁证的病因病机以指导临床用药。方法：通过对CNKI中文期刊全文数据库文献的检索，范围规定为2001年1月1日至2016年12月1日，根据条件依次筛选出符合标准的文献，利用EXCEL表格建立数据库，将数据规范化，利用中医传承辅助平台（V2.5）软件进行数据分析，得出对应中药的使用频次情况、药物的性味与归经分布情况等，根据用药之规律探讨归纳郁证发病之病机，同时根据抑郁症及焦虑症用药之异同点，来探讨两者病因病机之异同点，为临床上治疗该类病证提供更有力的依据。结果：共纳入文献412篇，中药256味（甘草除外），用药总频数为6335次；其中药性四气温、寒、平居于前列，五味中绝大多数属甘、苦、辛，肝（胆）、心、脾经在归经中居于前列。抑郁症和焦虑症用药排名前10味中，有7味相同，归经前4位均为肝（胆）、心、脾、肺，药性以甘、苦、辛为主。结论：1.治疗中医郁证的常用中药排名前10位依次是：柴胡、茯苓、白芍、酸枣仁、郁金、当归、香附、枳实、半夏、远志。前10味药中以理气药、补虚药及安神药为主；四气温、寒、平性居多，五味以甘、苦、辛居多，归经以肝（胆）、心、脾经居多；2.根据中医用药归经分析郁证的发病与肝胆关系最为密切。3.郁证根本病机为气机升降失调，枢机不利所致的情志失常。具体表现为肝郁脾滞，临床治疗应调理枢机、疏肝降浊，必要时补气养血。4.抑郁症和焦虑症发病与肝胆密切相关，且均涉及到心、脾、肺；两者主要的病机根本均为人体气机升降失调，以致整个机体的脏腑及阴阳气血功能失调；其病理产物主要为体内郁火或郁热不得发，两者发病均以气郁为先，久则伤及气血津液及脏腑。差异性在于，抑郁症多为阴证，与七情中的“悲”或“思”相通应；焦虑症多为阳证，与七情中的“怒”或“恐”相通应。抑郁症病位较深，临床虚证较多出现；焦虑症病位较浅，临床多见实证。抑郁症主要与气机的不升有关，重在调理脾胃；焦虑症的发病主要与气机的不降有关，重在降肺胃之气。收起

关键词 : 抑郁症焦虑症中医药用药规律病机分析