中国科学技术信息研究所--国家工程技术数字图书馆

2. KISS1、TAC3和TACR3基因多态、表达对柯乐猪繁殖性状的影响

[学位论文] 谭元成贵州大学 2023年硕士导师: 张依裕共87页

摘要 : 柯乐猪是贵州省优良的地方猪品种之一，具有耐寒、耐粗饲、抗病能力强和肉质优良等特点，但是繁殖率较低，因而提高繁殖力是目前柯乐猪育种工作中急需解决的首要瓶颈问题。转移抑制基因（KISS1）、速激肽3（TAC3）和速激肽3受体（TACR3）协同调控下丘... 展开柯乐猪是贵州省优良的地方猪品种之一，具有耐寒、耐粗饲、抗病能力强和肉质优良等特点，但是繁殖率较低，因而提高繁殖力是目前柯乐猪育种工作中急需解决的首要瓶颈问题。转移抑制基因（KISS1）、速激肽3（TAC3）和速激肽3受体（TACR3）协同调控下丘脑-垂体-性腺轴（HPG），进而影响动物初情期的启动以及生殖周期的维持。本文旨在探究KISS1、TAC3和TACR3基因遗传变异与柯乐猪繁殖性状的关联性，以及KISS1、TAC3和TACR3基因在不同生长发育时期柯乐猪生殖器官中的mRNA表达规律。本试验以220头柯乐猪为研究对象，利用PCR扩增直接测序法筛查KISS1、TAC3和TACR3基因SNP位点，采用RT-qPCR检测KISS1、TAC3和TACR3基因在不同生长发育时期柯乐猪子宫、卵巢和输卵管的表达水平。主要研究结果如下： 1、KISS1基因第1外显子检测到g.64835073 A＞G；第1内含子检测到g.64835529 G＞A，共2个SNP位点。2个SNP位点均产生3种基因型，均为中度多态位点，且均符合Hardy-Weinberg平衡。2个位点之间连锁平衡，2个SNP位点联合产生 4种单倍型和7种双倍型。关联性分析结果表明：g.64835529 G＞A位点AA基因型个体在初生平均重上显著高于GA基因型（p＜0.05）、AA基因型个体在断奶平均重上显著高于GG基因型（p＜0.05）， 2个SNP位点联合对初生平均重有显著影响。 2、TAC3基因第1内含子检测到g.22329038 T＞C；第2外显子检测到g.22329329 G＞A；第2内含子检测到g.22329384 A＞T；第4内含子检测到g.22333209 G＞A，共4个SNP位点。4个SNP位点均产生3种基因型，均为中度多态位点，且均符合Hardy-Weinberg平衡。g.81465153 C＞G位点和g.81465176 A＞G位点完全连锁，4个SNP位点联合产生 5种单倍型和8种双倍型。关联性分析结果表明：g.22329038 T＞C位点TC基因型个体在初生窝重上显著高于CC基因型（p＜0.05），4个SNP位点联合对产活仔数、初生平均重、断奶仔猪数和断奶平均重均有显著影响。 3、TACR3基因第1内含子检测到g.117686266 T＞C、g.117686381 A＞G和g.117686384 A＞G、第2内含子检测到g.117688503 T＞C和g.117688518 T＞C，共5个SNP位点。5个SNP位点均产生3种基因型，均为中度多态位点，且均符合Hardy-Weinberg平衡。g.81465153 C＞G位点和g.81465176 A＞G位点完全连锁，5个SNP位点联合产生 7种单倍型和15种双倍型。关联性分析结果表明：g.117686381 A＞G位点GA基因型个体在初生窝重、断奶仔猪数和断奶窝重上显著高于AA基因型（p＜0.05），g.117686384 A＞G位点GA基因型个体在初生窝重、断奶仔猪数和断奶窝重上显著高于AA基因型（p＜0.05），5个SNP位点联合对总产仔数、产活仔数、初生窝重、初生平均重、断奶仔猪数、断奶窝重和断奶平均重均有显著影响。 4、KISS1、TAC3和TACR3基因在柯乐猪生长发育不同时期子宫、卵巢、输卵管均存在表达。对柯乐猪生长发育不同时期子宫、卵巢和输卵管中的表达规律进行分析，显示KISS1、TAC3和TACR3基因在2月龄至4月龄表达量呈上升趋势；4月龄至6月龄表达量呈下降趋势。柯乐猪KISS1、TAC3和TACR3基因在4月龄子宫和卵巢的表达量显著高于2月龄和6月龄；在6月龄子宫和卵巢的表达量显著高于2月龄，表明KISS1、TAC3和TACR3基因的表达与柯乐猪初情期的启动有关。收起

关键词 : 柯乐猪转移抑制基因速激肽3 速激肽3受体基因多态性繁殖性状生长发育

3. 草鱼大脑和垂体中神经肽挖掘及速激肽功能鉴定

[学位论文] 叶城华中农业大学 2020年硕士导师: 呼光富共188页

摘要 : 在脊椎动物中，大脑和垂体是机体内极其重要的器官。大脑可以通过合成与释放神经肽调节垂体激素的合成与分泌，进而参与机体生长、生殖、应激和免疫等生理过程的调控。与哺乳动物不同，鱼类的下丘脑-垂体轴缺失了门脉系统，因此调控垂体激素合成与分泌... 展开在脊椎动物中，大脑和垂体是机体内极其重要的器官。大脑可以通过合成与释放神经肽调节垂体激素的合成与分泌，进而参与机体生长、生殖、应激和免疫等生理过程的调控。与哺乳动物不同，鱼类的下丘脑-垂体轴缺失了门脉系统，因此调控垂体激素合成与分泌的上游神经肽变得更为庞大和复杂。基于此，本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为研究对象，首先，通过组织切片技术分析草鱼不同大脑亚区及垂体的形态和显微结构，并结合生物信息学方法初步探究草鱼各脑区和垂体的功能及各脑区间的相互关系。接着，基于草鱼基因组数据库和草鱼大脑各亚区和垂体的转录组数据，挖掘草鱼大脑和垂体中的神经肽编码基因及其相关受体信息，并对它们在草鱼大脑不同亚区和垂体内的分布进行分析。最后，以挖掘出的速激肽家族的神经肽为切入点，分别研究了TAC3编码产物NKB和NKBRP以及TAC4编码产物HK1和HK2在草鱼垂体内的功能及其作用机制。主要研究结果如下： 1、草鱼大脑和垂体的形态学和组织学H.E染色切片结果显示，草鱼大脑主要由6个亚区构成，包括嗅球、端脑、视顶盖、下丘脑、小脑和延脑。与软骨鱼类和哺乳类不同，草鱼大脑和垂体间无下丘脑-垂体门脉系统，下丘脑的神经元直接伸入并终止于前腺垂体内。通过分析草鱼不同脑区和垂体的转录组测序数据，本研究发现嗅球可能与生殖和免疫有关；端脑可能参与食欲和生殖的调控；视顶盖不仅在视觉系统中发挥重要功能，并可能涉及摄食行为的调控；下丘脑在摄食和生殖过程中扮演重要角色；延脑与听觉系统有关；垂体在能量代谢、器官发育和生殖过程中起关键作用。相关性分析结果显示，下丘脑和端脑不仅在结构上高度相关，其功能也存在重叠性，表明端脑和下丘脑可能是硬骨鱼类摄食和生殖的调控中心。 2、结合草鱼基因组数据库和草鱼大脑各亚区及垂体的转录组数据，本研究系统地挖掘了来自23个家族共计91个神经肽前体编码基因，以及上述神经肽相对应的112个受体基因。基于RNA-seq数据，对上述基因在草鱼6个不同大脑亚区和垂体内的转录本表达水平进行分析。最后，结合已有研究和本研究的结果，对神经肽及其受体在草鱼大脑和垂体的主要合成区域和功能行使位置进行了预测。 3、以草鱼垂体细胞为研究对象，转录组分析表明NKB能够诱导垂体内729个基因的差异表达，这些基因涉及了激素活性、食物摄入、信号转导和代谢等。体外细胞培养和RT-qPCR结果显示，NKB在草鱼垂体细胞中可以以时间和剂量依赖的方式诱导四种厌食肽(UTS1、CART、POMCb和NMB)mRNA的表达。受体选择性和受体后信号通路实验结果显示，NKB对草鱼垂体中UTS1、CART、POMCb和NMB表达的刺激作用均能由NK3R介导。这些反应激活了腺苷酸环化酶/蛋白激酶A(cAMP/PKA)通路、磷脂酶C/肌醇1，3，5-三磷酸/蛋白激酶C(PLC/IP3/PKC)通路和Ca2+/钙调蛋白/CaM-依赖性蛋白激酶II(Ca2+/CaM/CaMK-II)通路。此外，腹腔注射NKBa能够显著诱导草鱼垂体内这四种厌食肽mRNA表达。此外，摄食实验结果显示，草鱼进食后下丘脑内的TAC3a和TAC3bmRNA表达显著提高。这些结果表明，NKB是一个饱感因子，它能够通过调节垂体中厌食肽的表达参与硬骨鱼类摄食调节。 4、以草鱼为研究对象，本研究从草鱼大脑和垂体中克隆得到TAC4基因及其受体NK1Rb和NK3Ra1。序列分析显示草鱼TAC4能够编码HK1和HK2成熟肽。组织表达分析表明TAC4在下丘脑、嗅球和延脑中高表达，受体NK1Rb、NK3Ra2和NK3Rb等均在垂体中有较高的表达，预示TAC4在草鱼垂体中可能发挥重要功能。通过在HEK293T细胞膜上表达NKRs，HK2对6个NKRs均有较高的激活效率，其中对NK2R应是HK2的特异性受体；而HK1仅能微弱激活NK2R、NK3Ra2和NK3Rb。转录组测序和生物信息学分析结果显示，HK2能够诱导垂体细胞内1051个基因差异表达，这些基因主要涉及食欲的负调节、激素活性、受体配体结合和G蛋白偶联受体信号通路等。在草鱼垂体原代细胞中，HK2能够以时间依赖性和剂量依赖性的方式促进PRL、SLα、UTS1、NMB1、CART2和SN2mRNA表达，而HK1对上述基因均无显著反应。为了解析HK1在草鱼垂体内的失活原因，本研究将含VFGLM基序的HK1修改为FFGLM基序的HK1突变体(HK1-M)。受体-配体反应表明，不同于HK1，HK1-M对6个NKRs展现了很高的激活效率。同时，HK1-M能够显著诱导草鱼垂体细胞内UTS1、PRL和SLαmRNA表达。此外，HK1和HK2共处理垂体细胞实验显示，HK1不能有效阻断HK2在垂体中的功能，表明HK1不是HK2的内源性拮抗剂。综上结果表明，HK2可以直接作用于草鱼垂体细胞，通过受体NKRs的介导，促进垂体内PRL、SLα、UTS1、CART2、NMB1和SN2的mRNA表达；而HK1因其FXGLM序列突变致使其功能丢失。综上所述，本研究建立了草鱼不同大脑亚区和垂体的解剖学和转录组数据库，对草鱼不同脑区以及垂体的结构和功能做出了初步分析，深入挖掘了草鱼大脑和垂体内的神经肽前体及其受体基因，并以速激肽家族为切入点，研究了TAC3编码产物和TAC4编码产物在垂体中的功能及作用机制。本研究有助于丰富我们对鱼类大脑不同亚区显微结构和功能的认识，为进一步深入研究鱼类神经肽的功能提供了基础。收起

关键词 : 草鱼大脑垂体神经肽速激肽转录组

4. 速激肽来源抗菌肽的促伤口愈合活性研究

[学位论文] 李思思兰州大学 2017年硕士导师: 王锐共82页

摘要 : 慢性伤口治疗给患者和社会带来巨大的压力，细菌感染会进一步延迟创伤愈合。由于耐药菌的出现，传统抗菌药物对于感染伤口治疗效果差强人意，因此，研发新型伤口抗感染药物迫在眉睫。抗菌肽因其作用机制独特，不易产生耐药性的优点，将成为感染伤口治... 展开慢性伤口治疗给患者和社会带来巨大的压力，细菌感染会进一步延迟创伤愈合。由于耐药菌的出现，传统抗菌药物对于感染伤口治疗效果差强人意，因此，研发新型伤口抗感染药物迫在眉睫。抗菌肽因其作用机制独特，不易产生耐药性的优点，将成为感染伤口治疗的希望药物之一。速激肽是一类参与多种生理过程的神经肽，广泛分布于人体内,在损伤修复中发挥着重要的作用。而速激肽的抗菌活性较弱，限制其用于感染伤口的治疗。速激肽具有与抗菌肽相似的结构特点（带正电荷，两亲性），因此，在抗菌活性方面具有改造潜力，有望发展成为既能抗感染又促进伤口愈合的先导化合物。本课题以速激肽家族中的人Hemokinin-1（hHK-1）和P物质（SP）为研究对象，旨在设计出具有抗感染和愈合活性的抗菌肽，为研发治疗慢性伤口感染药物提供思路。课题组的前期工作是在hHK-1的N末端引入LKKW序列（亮氨酸-赖氨酸-赖氨酸-色氨酸），增加正电荷数和疏水性，设计合成了一系列类似物，并进行了抗菌活性和机制的研究。结果显示，改造的 hHK-1类似物的抗菌活性增强。hH K-1系列保留了 C端的序列，可能具有促伤口愈合的活性，因此本课题对hH K-1系列进行了小鼠伤口愈合，感染伤口治愈，细胞增殖和迁移的活性研究，最终筛选出具有较高的抗伤口感染和促进伤口愈合活性的类似物HK-3和HK-5。前期研究显示，虽然 P物质（SP）具有明显的促伤口愈合活性，但其抗菌活性很弱。而研究用于治疗糖尿病足溃疡感染的培西加南（MSI-78）具有强烈的抗菌活性，因此我们将 MSI-78和 SP的活性片段嵌合，设计合成系列类似物。我们对MSI-78及其类似物进行了体外抗菌活性和细胞毒性的检测，发现MSI-78系列均具有高抗菌活性和低细胞毒性。同时MSI-78系列可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成。在小鼠伤口愈合和感染伤口治愈实验中，筛选出了既有抗菌活性又加速伤口愈合的抗菌肽BM-5。本课题筛选出的类似物HK-3、HK-5和BM-5可作为促伤口愈合抗菌肽的先导化合物，为研发治疗慢性伤口药物提供了新方法。收起

关键词 : 速激肽抗菌肽伤口愈合实验药理

5. 中华鲟下丘脑和垂体中神经肽挖掘及速激肽功能鉴定

[学位论文] 谢云轶华中农业大学 2023年硕士导师: 呼光富共91页

摘要 : 下丘脑和垂体是重要的神经内分泌器官，能够分泌多种神经肽和激素，参与生殖、生长、应激和摄食等多种生理活动的调节。中华鲟是一种软骨硬鳞鱼类，具有特殊的进化地位，但有关其神经内分泌系统的资料比较少。本研究以中华鲟下丘脑-垂体轴的转录组数据... 展开下丘脑和垂体是重要的神经内分泌器官，能够分泌多种神经肽和激素，参与生殖、生长、应激和摄食等多种生理活动的调节。中华鲟是一种软骨硬鳞鱼类，具有特殊的进化地位，但有关其神经内分泌系统的资料比较少。本研究以中华鲟下丘脑-垂体轴的转录组数据为参考，鉴定了46个下丘脑神经肽基因，分别参与了生殖、生长、应激和摄食的调节。此外，本研究还鉴定了6个中华鲟垂体激素基因，包括生殖激素:卵泡刺激素(FSH)和促黄体生成素(LH);生长相关激素:生长激素(GH)/催乳素(PRL)/生长乳素(SL);以及应激相关激素基因:阿黑皮素原(POMC)。与硬骨鱼类相似，中华鲟垂体的免疫组织荧光定位分析表明，LH和FSH位于中腺垂体，SL位于前腺垂体，POMC位于前腺垂体和后腺垂体。速激肽是一个大型的、进化上保守的脑/肠肽家族，参与哺乳动物多种生理功能,包括生殖调节。然而，关于古老鱼类谱系中的速激肽的信息却很少。本研究从中华鲟大脑和垂体中鉴定了三个速激肽基因(分别命名为tac1、tac3和tac4)和三个神经激肽受体(分别命名为nk1r、nk2r和nk3r)。序列分析表明，tac1编码物质P(SP)和神经激肽A(NKA),tac3编码神经激肽B(NKB)和NKB相关肽(NKBRP),tac4编码hemokin1(HK-1)和hemokin1(HK-2)。组织表达分析显示，三个速激肽基因在端脑和下丘脑中大量表达，而神经激肽受体基因则在外周组织中广泛表达。时空表达分析显示，三个速激肽基因在性腺未发育个体中表达量较高。腹腔注射实验表明，asSP和asNKB能提升中华鲟血清中促黄体生成素(LH)的分泌水平。在转录水平上，asSP和asNKB能显著降低垂体促卵泡激素β(fshβ)mRNA的表达，同时诱导垂体生长激素(gh)mRNA的表达。此外，雌二醇(E2)可以刺激下丘脑的tac3mRNA表达。综上所述，本研究将丰富中华鲟神经内分泌系统的信息，同时提供了中华鲟速激肽家族的基础信息，发现asNKB和asSP参与垂体生殖和生长相关激素的调节。收起

关键词 : 中华鲟下丘脑垂体神经肽速激肽

6. 速激肽human Hemokinin-1类似物对人精子活力的影响

[学位论文] 甘永安兰州大学 2017年硕士导师: 王一青共50页

摘要 : 目的：本文旨在通过研究速激肽human hemokinin-1碳端类似物hHK-1（4-11）和氮端类似物hHK-1（1-7）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）、hHK-1（1-10）对精子活力的影响，通过这种方法找出速激肽作用于精子活力的最有效片段，通过这样的研究希望能为提高精... 展开目的：本文旨在通过研究速激肽human hemokinin-1碳端类似物hHK-1（4-11）和氮端类似物hHK-1（1-7）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）、hHK-1（1-10）对精子活力的影响，通过这种方法找出速激肽作用于精子活力的最有效片段，通过这样的研究希望能为提高精子活力的药物提供新的思路，为临床的体外受精-胚胎移植以及卵胞浆内单精子注射等辅助生殖治疗手段中保持精子活力的药物提供新的线索。方法：通过化学合成法——多肽固相合成方法合成并验证了5个不同的人速激肽的片段，它们分别是人速激肽的碳端片段hHK-1（4-11），以及人速激肽的氮端类似物hHK-1（1-7）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）和hHK-1（1-10）。首先，我们分别检测了hHK-1（4-11）、hHK-1（1-7）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）和hHK-1（1-10）对正常精液PR级和PR+NP级精子活力影响，其次，我们通过流式细胞仪分析了正常成熟精子与上述药物共培养3小时和6小时后精子DNA碎片的产生情况。结果：不同浓度（1×10-3mol/L、1×10-4mol/L、1×10-5mol/L）的hHK-1（4-11）、hHK-1（1-7）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）和hHK-1（1-10）分别作用于精子，hHK-1（1-7）作用于正常精子90min后的PR和PR+NP级精子百分率和空白对照組比起初始的PR和PR+NP级精子百分率，精子百分率的降低具有统计学意义（P<0.05），但是hHK-1（4-11）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）和hHK-1（1-10）作用于正常精子90min的PR和PR+NP级精子百分率的降低无统计学差异。结论：hHK-1（4-11）、hHK-1（1-8）、hHK-1（1-9）和hHK-1（1-10）具有保持精子活力的作用，而hHK-1（1-7）并不具备保持精子活力的作用。另一方面，通过精子DNA碎片的分析结果显示：所有的速激肽类似物均没有使精子DNA碎片率上升，这就说明，这些药物并不存在精子毒性作用，其本身并不会对精子活力及完整性产生影响。收起

关键词 : 速激肽类似物精子活力药物分析

7. 家蚕速激肽样肽受体的功能性鉴定和信号转导机制研究

[学位论文] 何小柏浙江大学 2014年博士导师: 周耐明共101页

摘要 : 速激肽作为神经肽中的一大类，广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物的中枢神经和外周组织中，在生物体内参与调节多种多样的生理功能。在昆虫中，目前已从飞蝗、蟑螂、黑腹果蝇、蚊子等多种昆虫中发现了与速激肽结构相似的神经肽，称为速激肽样肽。与速激... 展开速激肽作为神经肽中的一大类，广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物的中枢神经和外周组织中，在生物体内参与调节多种多样的生理功能。在昆虫中，目前已从飞蝗、蟑螂、黑腹果蝇、蚊子等多种昆虫中发现了与速激肽结构相似的神经肽，称为速激肽样肽。与速激肽一样，速激肽样肽主要分布于昆虫神经系统与肠道组织中，参与视觉、嗅觉等神经调控以及促进平滑肌收缩等生理功能。家蚕基因组中编码了六个速激肽样肽，然而关于家蚕速激肽样肽受体及其信号转导机制却鲜有报道。基于已发现的昆虫速激肽样肽受体以及哺乳动物速激肽受体，我们对家蚕基因组数据序列比对和进化分析，发现家蚕孤儿神经肽受体BNGR-A24，-A32和-A33可能是速激肽样肽受体。本文克隆了这三个家蚕G蛋白偶联受体，并利用哺乳动物细胞系HEK293和昆虫细胞系Sf21两套细胞异源表达系统进一步鉴定了这三个家蚕G蛋白偶联受体。通过cAMP和钙离子等功能性检测方法和荧光竞争性结合方法，我们发现BNGR-A24选择性的结合速激肽样肽，是家蚕速激肽样肽受体，命名为BmTRPR。活化后的BmTRPR能特异性结合Gs和Gq蛋白，引起第二信使cAMP和胞内钙离子水平的升高。BNGR-A32和-A33则被证明为与速激肽样肽高度同源的的神经肽Natalisin的特异性受体，分别命名为BmNTLR2和BmNTLR1。此外，我们鉴定了BmNTLR2的16碱基功能缺失突变体BmNTLR2-△16，推测BmNTLR2-△16在驯化过程中可能存在一定意义。对速激肽受体BmTRPR的功能分析发现，BmTRPR在被配体活化后，能够发生受体的内吞作用。在HEK293细胞中，BmTRPR的内吞过程是一条依赖于网格蛋白，呈浓度梯度依赖型和时间梯度依赖型内吞到早期内含体，并在配体去除后重新回到细胞膜上。通过RNA干扰和特异性抑制剂处理的方法，我们发现BmTRPR受体内吞依赖于GRK5，PKC及PKA的磷酸化，并且在受体磷酸化后能够招募β-arrestin2，介导BmTRPR的内吞。除了受体内吞作用，速激肽受体BmTRPR在被配体活化后能引起与细胞增殖分化密切相关MAPK信号通路的活化。我们在HEK293细胞中，发现BmTRPR可以浓度梯度和时间梯度依赖型激活ERK1/2通路。通过特异性抑制剂处理，我们发现TRP1活化的BmTRPR通过Gs/cAMP/PKA和Gq/PLCβ/PKC的途径介导的ERK1/2磷酸化。此外，EGFR转激活参与介导5min后的ERK1/2磷酸化。另外，利用β-arrestin1/2 siRNA特异性沉默HEK293细胞内β-arrestin1/2蛋白，我们发现β-arrestin1/2并不参与调控BmTRPR介导的ERK1/2的活化。根据BmTRPR在细胞水平的功能发现，我们初步探讨其在家蚕生理上的功能。我们发现家蚕速激肽样肽受体表达下调后，家蚕的消化率和生长均受到了一定的抑制，因此推测BmTRPR可能参与调控摄食和消化等生理过程。在此基础之上，我们希望通过后续实验进一步阐明TRP/BmTRPR介导的家蚕生理调控。收起

关键词 : 家蚕速激肽样肽内吞作用生理功能

8. 急性心肌缺血早期β1肾上腺素能系统对大鼠心肌NK1受体表达的影响

[学位论文] 韩世祺山西医科大学 2011年硕士导师: 郭政共30页

摘要 : 研究背景：P 物质属于一组结构上相关的叫做速激肽的肽类。它存在于包括人类内在的多种生物的心脏感觉神经的末梢。在急性心肌缺血过程中，多种刺激引起的心脏P 物质的释放，并且认为P 物质参与了这个过程中心脏功能的调节。速激肽有三种受体：NK1，N... 展开研究背景：P 物质属于一组结构上相关的叫做速激肽的肽类。它存在于包括人类内在的多种生物的心脏感觉神经的末梢。在急性心肌缺血过程中，多种刺激引起的心脏P 物质的释放，并且认为P 物质参与了这个过程中心脏功能的调节。速激肽有三种受体：NK1，NK2，NK3，都属于G蛋白偶联受体。尽管P 物质可以激活这三种受体，但是激活效能最高的是NK1受体。NK1受体已被证实存在于心脏上，而且P 物质对心脏的调节作用可能就是通过NK1受体实现的。在急性心肌缺血过程中P 物质和NK1受体共同参与了C传入纤维的信号传递以及脊髓和心脏中伤害性信号的传导。研究表明在急性心肌缺血过程中交感神经系统和心脏感觉神经系统活性会同时增加，而且会释放大量的速激肽和儿茶酚胺，而这些物质可能都与急性心肌缺血的病理过程相关。实验室之前的研究也显示，急性心肌缺血早期心肌组织中P 物质（SP）和去甲肾上腺素（NE）含量明显升高，并且两系统间存在着相互作用。然而，在急性心肌缺血过程中，NK1受体是如何变化的以及交感神经系统对NK1受体表达是否有潜在调节作用仍然不清楚。　　研究目的：研究表明P 物质通过NK1受体调节急性心肌缺血的病理过程。然而在这个过程中NK1受体表达变化仍不清楚。本实验的目的就是为了阐明在急性心肌缺血的早期NK1受体在蛋白水平和mRNA水平上的变化，以及交感肾上腺素能神经系统对其表达是否存在影响。　　实验方法：实验分为两部分：1, 用qRT-PCR 方法检测实验大鼠的NK1-R的mRNA的表达变化，实验大鼠分为2个组：假手术组（sham）；结扎组（CAO）。各组又分为5分钟，15分钟，30分钟三个亚组。（每组6例）。用western blot方法检测大鼠的NK1受体蛋白表达变化，实验大鼠分为2个组：假手术组（sham）；结扎组（CAO）。各组又分为15分钟，30分钟，60分钟三个亚组。（每组6例）2，实验大鼠分为3个组：结扎组（CAO），艾司洛尔组（Esm.），DSP组（DSP）。（每组6例）。结扎时间为15分钟。分别用qRT-PCR 方法和Western blot方法检测实验动物心肌组织NK1受体基因和蛋白表达变化　　实验结果：冠状动脉结扎15分钟，30分钟，60分钟，结扎组NK1受体mRNA和蛋白表达水平与对照组无统计学差异。用β1肾上腺素能受体拮抗剂艾司洛尔（Esmolol）预处理后，NK1受体（蛋白和mRNA）表达水平明显升高。用DSP 阻断内源性SP作用后，NK1受体（蛋白和mRNA）表达水平明显升高。　　结论：在急性心肌缺血早期，NK1受体表达无明显改变。交感神经系统与心脏感觉神经系统可能同时参与了心脏NK1受体的表达调节。收起

关键词 : 速激肽受体艾司洛尔心肌缺血

9. 速激肽调节中华溞交配行为的功能研究

[学位论文] 马思琪华中农业大学 2023年硕士导师: 刘香江共96页

摘要 : 速激肽（tachykinin,TK）及其类似物Natalisin（NTL）在中枢神经和外周组织中普遍存在，并参与生殖调节、胃肠平滑肌舒张收缩以及机体痛觉传递等生理功能。在哺乳动物中，速激肽家族成员可以增强雄性的侵略行为;在无脊椎动物中，NTL敲降使昆虫的交配欲... 展开速激肽（tachykinin,TK）及其类似物Natalisin（NTL）在中枢神经和外周组织中普遍存在，并参与生殖调节、胃肠平滑肌舒张收缩以及机体痛觉传递等生理功能。在哺乳动物中，速激肽家族成员可以增强雄性的侵略行为;在无脊椎动物中，NTL敲降使昆虫的交配欲望显著减弱。上述结果表明，速激肽及其类似物在调节动物交配过程中发挥了重要作用，但其在枝角类中调节两性交配行为的功能尚不明确。本研究以中华溞（武汉，南湖）为研究对象，首先，参考本实验室现有中华溞基因组，对中华溞TKs、NTLs及其受体TKRs进行了序列分析和配体-受体选择性分析;接着，研究了不同性别以及环境因子（种群密度和光照）对TK及其受体表达量影响;最后，利用TK处理中华溞，研究其对雄溞交配行为的影响，并利用转录组结合代谢组分析了TK诱导雄性交配行为的相关通路。中华溞的TKs、NTLs成熟肽都具有各自保守的氨基酸末端，其受体TKRs的三维模型中都预测出的7个α螺旋结构。配体-受体选择性结果显示，TKR1是TK1的特异性受体，TKR2是NTLs的特异性受体，TKR3是TK2、TK3和NTL4的特异性受体。TKs、NTLs在雄性体内表达量较高，并且当种群密度增大或光照时长减少时TKR1的表达随之增高，该结果表明高种群密度或黑暗环境可能通过TK及其受体TKR1的介导诱导雄溞交配行为。诱导实验结果显示，TK1能够显著诱导中华溞雌溞和雄溞的交配行为。此外，TK1处理能够显著诱导中华溞的心率和耗氧率，并且使雌溞体色变红。有趣的是，中华溞雄溞的体色也偏红，并且心率和耗氧率均明显高于雌溞。上述结果预示TK1能够通过增强中华溞的氧气消耗能力来提升其交配行为。为进一步揭示TK1诱导中华溞交配行为的作用机制，我们利用转录组结合代谢组分别比较了雄溞和雌溞之间的转录和代谢差异，以及TK1处理后中华溞体内转录和代谢水平的变化。结果显示:（1）TK1能够显著诱导血红素转运体活性，说明TK1能够通过提高血红蛋白运载氧气的能力增强其对氧气的需求。（2）TK1处理后显著下调中华溞体内甘油磷脂的水平，并且雄溞体内甘油磷脂的水平也显著低于雌溞，说明TK1可能通过诱导甘油磷脂的代谢参与雄溞交配行为的调节。（3）TK1处理显著升高中华溞体内6-β-羟基睾酮的水平，并且雄溞体内该雄性激素的水平也显著高于孤雌溞，该结果预示TK1可能通过诱导6-β-羟基睾酮的分泌调节中华溞的交配行为。收起

关键词 : 枝角类交配行为速激肽种群密度光照环境

10. 沙瑞度坦的合成及工艺研究

[学位论文] 刘多上海医药工业研究院 2005年硕士导师: 王国平共72页

摘要 : 哮喘在全球的发病率不断攀升,但用于哮喘的治疗性药物仍主要集中于吸入型甾体抗炎药、β-受体激动剂等支气管扩张剂、以白三烯拮抗剂为代表的抗变念反应药等“三驾马车”.开发具有新的作用机制的抗哮喘药已刻不容缓。速激肽受体拮抗剂目前成为许多制药... 展开

关键词 : 沙瑞度坦抗哮喘药速激肽受体合成工艺