摘要: 海洋环境的特殊性使得海洋天然产物有别于陆地天然产物。由于生活在高压、高盐、低温、低营养的复杂环境中，海洋来源真菌具有独特的生物合成途径和酶反应系统。研究发现其能够产生结构新颖的次级代谢产物，主要包括甾酮类、萜类、生物碱、蒽醌、肽类... 展开 海洋环境的特殊性使得海洋天然产物有别于陆地天然产物。由于生活在高压、高盐、低温、低营养的复杂环境中，海洋来源真菌具有独特的生物合成途径和酶反应系统。研究发现其能够产生结构新颖的次级代谢产物，主要包括甾酮类、萜类、生物碱、蒽醌、肽类等化合物，这些化合物大多具有抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗幼虫等药理活性，是研发新药和先导化合物的重要资源。据资料显示，部分海洋来源的活性物质或他们的衍生物被批准上市，也有部分海洋来源天然产物已进入临床研究。 本研究组前期对深海沉积物来源真菌Aspergillus puniceus SCSIO z021进行过研究，从中分离鉴定了一系列有多种生物活性的二酮哌嗪类生物碱、蒽醌和呫吨酮骨架的真菌毒素、以及环肽等化合物。基于HPLC分析，该菌株次生代谢产物丰富度好，本论文将继续以真菌A.puniceus SCSIO z021为研究对象，对其次级代谢产物进行发酵提取、分离纯化及结构解析。采用多种色谱柱层析（包括正相硅胶、反相硅胶、凝胶Sephadex LH-20和HPLC）分离技术，对发酵产物进行化学成分分离纯化;并结合波谱学方法（包括NMR、MS、UV、IR、CD、ECD和X-ray等）确定化合物的结构;对分离得到的化合物进行抗菌、抑制乙酰胆碱酯酶、抑制蛋白酪氨酸磷酸酶、细胞毒等活性测试。 从真菌A.puniceus SCSIO z021的3#培养基发酵产物中分离鉴定31个化合物(1-31)，其中新化合物19个，包括16个新异喹啉类化合物Puniceusines A-P(1-16)，3个新的苯环衍生物(17-19);12个已知化合物，包括3个蒽醌衍生物(21-23)，2个呫吨酮衍生物(24-25)，5个苯环衍生物(20、26-29)，1个卡波林类生物碱(30)，1个小分子肽(31)。其中化合物6通过X-ray衍射和手性柱分析确定其为一对对映体，化合物9的绝对构型通过ECD计算方法确定，化合物12的绝对构型通过X-ray衍射确定，化合物14和18通过手性柱分析确定其为一对对映体。 生物活性筛选结果显示:(1)化合物14对金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)和大肠杆菌具有一定的抑菌活性，MIC值为100 μg/mL;化合物4对大肠杆菌的生长具有抑制作用，MIC值为100μg/mL;其他化合物均未表现出明显的抑菌活性;构效关系表明-C=N+基团是14的抑菌活性中心。(2)化合物1-14在40 μg/ml的浓度下进行初筛时均未表现出明显的抑制乙酰胆碱酯酶抑制活性。(3)化合物3和4对蛋白酪氨酸磷酸酶CD45表现出明显的抑制活性，IC50值分别为8.4和5.6μM;化合物1、8-10和12-13对五种蛋白酪氨酸磷酸酶(SHP1、LAR、CD45、PTP1B、TCPTP)具有一定的选择性抑制活性。(4)化合物4对人肺腺癌细胞株H1 975具有中等的细胞毒性，IC50值为11.0 μM。对上述化合物的结构、酶抑制活性和细胞毒性的构效关系初步分析表明，异喹啉母核C-7位上的取代基对其生物活性有很大影响。 收起