摘要: 种子储藏蛋白(SeedStorageProtein，SSP)是成熟种子中含量最为丰富的蛋白质，不仅影响种子的品质，而且还是种子萌发和幼苗生长的能量来源。本课题组前期研究发现氮素代谢途径相关缺失突变体可显著提高植物对盐胁迫的耐受性，转录组测序技术进一步对盐... 展开 种子储藏蛋白(SeedStorageProtein，SSP)是成熟种子中含量最为丰富的蛋白质，不仅影响种子的品质，而且还是种子萌发和幼苗生长的能量来源。本课题组前期研究发现氮素代谢途径相关缺失突变体可显著提高植物对盐胁迫的耐受性，转录组测序技术进一步对盐处理下氮素代谢途径缺失突变体的分析表明，种子储藏蛋白基因AtSSA3能够响应盐胁迫且盐处理下显著下调表达。因此，进一步探究AtSSA3基因在植物响应盐胁迫过程中所发挥的功能，为更好的深入研究氮素代谢与植物耐盐性之间的关系提供理论依据。 1.通过实时定量PCR分析种子储藏蛋白基因AtSSA3的表达特性，结果显示该基因在植物整个生长发育周期均有不同程度的表达，在干种子中表达量最大。与NaCl，NH4Cl，Urea，ABA及GA3存在明显应答关系，受NaCl，NH4Cl及ABA的诱导AtSSA3基因显著下调表达；Urea处理下AtSSA3基因显著上调表达；GA3处理下，AtSSA3基因表达量随处理时间的增加先升高后降低。 2.在盐处理下解析AtSSA3基因缺失突变体(atssa3)材料，结果显示：盐处理下atssa3的种子萌发率要明显高于野生型(WT)，atssa3的长势和根长也优于WT，且atssa3的NH4+含量低于WT，即AtSSA3基因的缺失可以减少盐胁迫下植物体内的NH4+含量，从而明显提高植物对盐胁迫的耐受性。 3.通过酵母双杂交技术进一步筛选与种子储藏蛋白AtSSA3相互作用的蛋白，结果共获得12个阳性菌株，酵母共转化验证后确定AtARA4与AtSSA3之间存在相互作用。通过蛋白诱导分别获得AtARA4与AtSSA3表达的最佳条件，体外Pull-down实验进一步验证AtARA4与AtSSA3之间存在相互作用。 综上，本研究对种子储藏蛋白AtSSA3的功能进行了初步探究，为深入探究该基因在植物响应盐胁迫过程中发挥的功能奠定了基础。 收起