摘要: 目的：本研究通过构建体外细胞实验模型与动物体内盖髓实验模型探索水凝胶复合氯化锂作为盖髓材料诱导修复性牙本质形成的潜能。 材料与方法： 细胞实验：①收集18-25岁患者因正畸拔除的健康完整前磨牙或智齿，用改良组织块法分离培养牙髓干细胞... 展开 目的：本研究通过构建体外细胞实验模型与动物体内盖髓实验模型探索水凝胶复合氯化锂作为盖髓材料诱导修复性牙本质形成的潜能。 材料与方法： 细胞实验：①收集18-25岁患者因正畸拔除的健康完整前磨牙或智齿，用改良组织块法分离培养牙髓干细胞；运用免疫荧光染色、流式细胞术以及多向分化实验对细胞进行来源及干性鉴定；②使用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定不同浓度氯化锂对牙髓干细胞增殖的影响，选择适宜浓度的氯化锂对牙髓干细胞进行矿化诱导培养，使用茜素红染色观察矿化结节形成以及荧光定量PCR实验研究氯化锂对牙髓干细胞分化的影响。 动物实验：构建水凝胶/氯化锂复合支架，并对牙髓干细胞进行三维培养，通过活死细胞染色观察水凝胶支架的生物相容性；建立大鼠磨牙机械露髓模型，随机设置分组为阴性对照组(水凝胶组)、阳性对照组(MTA组)以及实验组(水凝胶复合氯化锂)，对患牙进行直接盖髓实验，于两个月后收集样本，进行影像学分析及组织学切片染色，观察修复性牙本质形成情况。 结果： 细胞实验：①细胞贴壁生长，呈长梭形，表达间充质干细胞相关标志物如波形蛋白(Vimentin)、CD90、CD105和CD146，不表达上皮和造血干细胞相关标志如细胞角蛋白(Cytokeratin)、CD30和CD45等，能够被诱导分化形成矿化结节、脂滴与软骨组织。②浓度为2.5mmol/L的氯化锂对细胞增殖作用较明显，该浓度下对细胞进行矿化诱导培养，茜素红染色显示明显的矿化结节，荧光定量PCR结果显示碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)以及牙本质基质蛋白1(DMP1)表达均升高。 动物实验：水凝胶支架材料具有很好的生物相容性，Micro-CT影像学结果显示，水凝胶复合氯化锂组于开髓孔下方形成钙化沉积物；组织学染色结果显示该沉积物为牙本质样结构；免疫组化染色结果显示牙本质涎蛋白(DSP)与牙本质基质蛋白1(DMP1)均在此钙化区域高表达。 结论：水凝胶复合氯化锂作为盖髓材料具有促进修复性牙本质形成的潜能，有望成为一种新的盖髓材料。 收起