摘要: 胎盘是正常妊娠进程中的临时器官，保障母体健康和胎儿生长发育。胎盘作为内分泌器官，可分泌多种激素、细胞因子和生长因子，协调胎儿生长发育与母体妊娠适应性变化。多项研究表明胎盘发育或功能异常与子痫前期等妊娠疾病直接关联。子痫前期是妊娠期... 展开 胎盘是正常妊娠进程中的临时器官，保障母体健康和胎儿生长发育。胎盘作为内分泌器官，可分泌多种激素、细胞因子和生长因子，协调胎儿生长发育与母体妊娠适应性变化。多项研究表明胎盘发育或功能异常与子痫前期等妊娠疾病直接关联。子痫前期是妊娠期间发生的多系统综合征，临床表现为妊娠20周以后突发高血压并伴随蛋白尿或母体多脏器损伤，严重威胁母儿健康。其病理表现主要为滋养层细胞功能异常、免疫耐受环境受损、胎盘血流灌注不足等，而患者呈现高雄激素、低雌激素症状。 我们前期研究发现，子痫前期患者的外周血中雌雄激素失衡，表现为高雄低雌，并且子痫前期患者的胎盘组织中异常升高的雄激素会加剧雌雄激素的失衡，但雄激素异常升高的原因尚不明确。而3β-HSD1与17β-HSD3又是雄激素合成的关键酶，两者的表达变化会直接影响雄激素的分泌。实验分析发现，早发子痫前期患者胎盘组织中两种酶的表达异常升高，这表明二者的变化可能直接导致了雄激素的异常升高。 GATA家族是在进化上高度保守的一组转录调控因子，由6个成员组成(即GATA1-GATA6)，分为GATA1/2/3和GATA4/5/6两个亚组。GATA家族每个成员均含有两个锌指结构域构成的DNA结构域，与WGATAR（GATA基序）结合调节组织特异性基因表达，并控制发育的进程。在卵巢和睾丸间质细胞中，GATA4/6蛋白能调控3β-HSD1与17β-HSD3的表达。GATA2/3又能调控滋养层前体细胞的分化，且能与激素受体结合，调控类固醇激素的分泌。另外，在3β-HSD1与17β-HSD3的基因上有GATA2/3的结合位点，再加上GATA家族结合基序的保守型，所以我们推测GATA2/3可能调控3β-HSD1与17β-HSD3的表达。 O-GlcNAc糖基化修饰是一种广泛存在于蛋白质Ser/Thr残基上的翻译后修饰，参与细胞重要生物进程的调控。O-GlcNAc修饰水平的异常与诸多疾病相关，如肿瘤、心血管疾病、二型糖尿病等。查阅文献发现，Hsd17b3基因位点上有O-GlcNAc修饰，推测O-GlcNAc修饰可能会影响激素的分泌。实验室前期O-GlcNAc糖基化修饰质谱结果显示，GATA家族成员除了GATA1/5以外均能被O-GlcNAc糖基化修饰。综上，我们推测子痫前期患者胎盘组织中GATA2/3的O-GlcNAc水平变化，可能影响3β-HSD1与17β-HSD3的表达或活性变化，继而导致雄激素分泌异常。 为了验证此假设，我们首先对胎盘组织和两种滋养层细胞系中的GATA家族各成员表达情况进行检测，发现GATA2/3表达最高，且定位于细胞滋养层细胞与合体滋养层细胞。由于滋养层细胞具有合成类固醇激素的功能，这表明GATA2/3有可能参与调控滋养层细胞中激素的合成。其次，我们对子痫前期胎盘组织中3β-HSD1、17β-HSD3、GATA2/3及其O-GlcNAc修饰的水平进行检测，发现均呈现明显上调。为了探究GATA2/3对3β-HSD1与17β-HSD3两种合成酶表达的作用机理，我们用人胎盘滋养层细胞系JEG-3作为实验模型进行验证，发现GATA3能结合到HSD3B1基因上，GATA2/3均能在转录水平促进3β-HSD1的表达;而GATA2/3虽能结合到HSD17B3基因上，但对17β-HSD3的表达影响不大。再次，我们对GATA2/3能否被O-GlcNAc修饰，以及O-GlcNAc修饰能否影响3β-HSD1与17β-HSD3的表达进行了探索，发现GATA2/3能被O-GlcNAc修饰，增加整体的O-GlcNAc修饰水平能够促进3β-HSD1的表达。最后，我们进一步探究O-GlcNAc修饰对GATA2/3的影响，发现GATA2/3的O-GlcNAc修饰使其免于降解。 综上，本研究从激素合成酶角度探究子痫前期患者雄激素异常升高的原因，发现PE患者胎盘组织异常升高的O-GlcNAc修饰水平，使得GATA2/3蛋白兔于降解，表达升高的GATA2/3能够在转录水平促进雄激素合成的关键限速酶3β-HSD1的表达，继而有可能导致雄激素的异常升高。这为阐释子痫前期患者雄激素异常升高的机制提供了新依据，为调控子痫前期患者体内的高雄低雌提供了新的潜在靶点。但子痫前期患者胎盘组织中17β-HSD3异常表达的原因尚不明确，仍需后续探究。 收起