摘要: 目的：胆管癌统指起源于胆管系统上皮细胞的恶性肿瘤，按解剖部位可以分为肝内胆管癌、肝外胆管癌。胆管癌的发生率约占所有胃肠道恶性肿瘤的3％，其发生率在世界范围内逐年增加。胆管癌的恶性程度高，病情隐匿，诊断困难，确诊时患者病情往往已经发展... 展开 目的：胆管癌统指起源于胆管系统上皮细胞的恶性肿瘤，按解剖部位可以分为肝内胆管癌、肝外胆管癌。胆管癌的发生率约占所有胃肠道恶性肿瘤的3％，其发生率在世界范围内逐年增加。胆管癌的恶性程度高，病情隐匿，诊断困难，确诊时患者病情往往已经发展到癌症的中晚期。目前，胆管癌最有效的治疗主要是手术切除。但由于胆管癌的生物学特性，发现时往往已经失去了手术最佳时机，仅有三分之一的胆管癌患者能接受手术治疗。对于无法接受手术或者术后复发的胆管癌患者，通常使用联合化疗的方式进行治疗。然而胆管癌具有高度促结缔组织增生能力，其肿瘤微环境异常丰富，这些特点决定了其对化疗药物的耐药性，限制了化疗的治疗效果。越来越多的研究发现，自噬对多种肿瘤的发生发展、转移、复发以及耐药性等方面有重要作用，其中包括胆管癌。目前已有许多针对胆管癌中自噬的研究，但自噬在胆管癌中的作用机制仍存在许多争议，根据研究切入点的不同，其作用结果也不尽相同。目的：研究Irisin（鸢尾素）作用于胆管癌细胞（Hucct-1），观察Hucct-1细胞活性以及自噬水平的变化，同时，研究了自噬相关信号通路的变化，探讨Irisin对胆管癌作用的可能机制。 方法：选择2016年9月至2018年9月青岛市市立医院肝胆外科手术切除且病理证实的胆管癌标本37例。免疫组织化学方法检测上述胆管癌标本中Irisin的差异表达;用Irisin处理胆管癌细胞(Hucct-1)，运用CCK-8法检测Irisin对Hucct-1增殖的影响;细胞划痕实验和Transwell实验用于检测Irisin对Hucct-1迁移和侵袭能力的影响;丹磺酰尸胺(monodansylcadaverin，MDC)染色法检测细胞自噬水平的变化;通过蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测自噬相关蛋白LC3B以及自噬相关通道PI3K/Akt/mTOR中相关蛋白的表达。 结果：免疫组化结果显示：Irisin低表达患者标本占51.4％(19/37)，中度表达患者标本占35.1％(13/37)，高表达患者标本占13.5％(5/37)，表明Irisin在胆管癌组织中有不同程度的表达，研究Irisin对胆管癌的作用有重要意义。CCK-8实验结果显示，Irisin会对Hucct-1的增殖产生抑制作用，作用效果与Irisin剂量相关。细胞划痕实验显示，Irisin处理组细胞愈合率(33±3)％明显低于对照组(45±4)％，结果有统计学差异(p＜0.05)。Transwell小室实验显示：Irisin处理组侵袭细胞个数为(82±5)明显少于对照组侵袭细胞个数为(146±8)，结果有统计学差异(p＜0.05)。MDC染色结果显示，Irisin处理组细胞有着更高的自噬活性。Western-blot实验结果显示，Irisin处理过后，自噬相关蛋白LC3B提高，进一步表明自噬水平提高，自噬相关通路PI3K/Akt/mTOR中Akt和mTOR蛋白水平降低，表明Irisin对该途径有负调控作用。 结论：Irisin能够通过PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导自噬来抑制胆管癌Hucct-1的增殖、迁移及侵袭能力。 收起