摘要: 目的： 探讨降钙素早期干预对于伴骨质疏松大鼠膝OA中软骨及软骨下骨的影响。 方法： 由SPSS软件产生的随机数字表将30只3月龄SPF级雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组（每组10只）：假手术（Sham）+生理盐水（S）对照组（简称Sham+S组）... 展开 目的： 探讨降钙素早期干预对于伴骨质疏松大鼠膝OA中软骨及软骨下骨的影响。 方法： 由SPSS软件产生的随机数字表将30只3月龄SPF级雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组（每组10只）：假手术（Sham）+生理盐水（S）对照组（简称Sham+S组）、ACLT+OVX+依降钙素（E）治疗组（简称ACLT+OVX+E组）、ACLT+OVX+生理盐水（S）造模组（简称ACLT+OVX+S组）。采用ACLT联合OVX的方法建立伴骨质疏松膝关节OA动物模型。Sham+S组只是打开大鼠的膝关节腔及背部腹腔，未行ACLT+OVX。用依降钙素注射液（Elcatonin，针剂，1ml：10U/支）处理的ACLT+OVX组，剂量10U/kg，每周一次，右上肢肌肉注射，术后1周开始干预。生理盐水在剂量、频次、注射方式及部位上同依降钙素。干预12周后，予以10%水合氯醛腹腔注射麻醉各组SD大鼠，收取眼球内眦静脉血离心并ELISA法检测血清骨代谢生化标志（CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ）的含量；观察膝关节软骨表面情况；剪除右侧股骨远端，RT-PCR检测MAPKs信号通路蛋白（ERK1、C-JUN、P38）及MMP-13蛋白mRNA表达；显微CT检测右侧胫骨平台软骨下骨的BMD、形态结构及骨组织形态计量学参数；对左侧胫骨平台关节软骨进行HE及番红染色,观察软骨全层结构和细胞形态并进行Mankin评分；最后处死各组大鼠。分析：以上各项检测指标均以均数±标准差表示（(x)±s），组间均数的差异用单因素方差分析，多指标因素分析采用logistic回归分析及多元逐步回归分析，以上统计在SPSS/PC+19.0支持下完成。（P＜0.001，差异有统计学意义） 结果： 1.大鼠膝关节软骨表面大体标本观察发现：Sham+S组大鼠膝关节软骨面光滑完整；ACLT+OVX+S组大鼠软骨变薄，较多小溃疡形成，关节周围可见较大块骨赘形成；ACLT+OVX+E组膝关节软骨面稍显粗糙，偶见小破溃，关节周围亦有较少骨赘形成。 2.右胫骨平台关节软骨番红、HE染色形态学观察发现：Sham+S组关节软骨面完整，软骨细胞基本正常；ACLT+OVX+S组软骨面破坏严重，软骨细胞明显变少；ACLT+OVX+E组软骨表面可见小裂隙存在。 3.关节软骨改良Mankin评分示：Sham+S组改良Mankin评分显著低于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（P＜0.001）；ACLT+OVX+S组改良Mankin评分明显高于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（P＜0.001）。 4.大鼠静脉血ELISA法检测CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ提示：术后12周Sham+S组CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ显著低于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001）；ACLT+OVX+S组CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ明显高于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001）。 5.SD大鼠左膝胫骨软骨下骨BMD分析发现：Sham+S组BMD明显高于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（P＜0.001）；ACLT+OVX+S组BMD明显低于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（P＜0.001）。 6.大鼠左侧膝关节胫骨软骨下骨骨组织形态计量学结构参数发现：Sham+S组BV/TV、Tb.N值明显高于ACLT+OVX+E组，Sham+S组Tb.Sp明显低于ACLT+OVX+E组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001）。ACLT+OVX+E组BV/TV、Tb.N值明显高于ACLT+OVX+S组，ACLT+OVX+E组Tb.Sp值明显低于ACLT+OVX+S组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001）。三组的Tb.Th值之间差距不大，差异无统计学意义。 7.右膝股骨髁RT-PCR检测ERK1、C-JUN、P38及MMP-13蛋白mRNA相对表达量：ACLT+OVX+E组中ERK1、C-JUN、P38及MMP-13蛋白mRNA表达水平明显高于Sham+S组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001）；ACLT+OVX+E组中ERK1、C-JUN、P38及MMP-13蛋白mRNA表达水平明显低于ACLT+OVX+S组，差异有统计学意义（分别为P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001、P＜0.001）。 结论： 在去卵巢大鼠不稳定膝关节中，早期应用依降钙素（10U/kg/周）可能抑制软骨下骨微结构的持续破坏，保护了软骨下骨及软骨的生物力学性能；同时可能通过抑制MAPKs信号通路的表达，下调软骨细胞MMP-13的形成，缓解了软骨退变。降钙素具有潜在的OA治疗作用。 收起