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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的:研究miR-155对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,以及对NSCLC细胞株形态、增殖、侵袭和转移能力的影响。 方法: (1)将miR-155 mimic、NC、miR-155 inhibitor、inhibitor NC用Lipofectamine2000分别转染入A549、H12... 展开 目的:研究miR-155对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,以及对NSCLC细胞株形态、增殖、侵袭和转移能力的影响。 方法: (1)将miR-155 mimic、NC、miR-155 inhibitor、inhibitor NC用Lipofectamine2000分别转染入A549、H1299、H460细胞株中。 (2) Real time PCR技术检测miR-155以及MMPs mRNA水平的变化。 (3) ELISA技术检测MMPs蛋白表达水平的变化。 (4)显微镜下观察 miR-155对细胞形态的影响;MTT分析 miR-155对细胞增殖的影响;Transwell、划痕实验分析miR-155对细胞侵袭转移能力的影响。 (5) A549细胞株接种建立裸鼠移植瘤模型。成瘤后,瘤内注射miR-155 mimic、inhibitor和对照,每5天转染一次,共转染5次。每3天测量肿瘤组织大小。最后一次转染后3天处死裸鼠,眼眶取血,分离血清;剥离肿瘤组织称重,匀浆,提取总RNA。 结果: (1) miR-155的mimic和inhibitor可改变NSCLC细胞株中miR-155表达水平。 (2) miR-155过表达可促进NSCLC细胞株增殖,提高其侵袭转移能力。 (3) miR-155可增强A549细胞株中MMPs mRNA表达水平,其中,对MMP-2、MMP-7、MMP-9、MMP-10影响较大。 (4) miR-155过表达可提高A549、H1299、H460细胞株中MMP-2、MMP-7、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平。 (5)裸鼠移植瘤实验中miR-155 mimic处理组瘤体较其阴性对照组大,证实miR-155对裸鼠移植瘤的生长有促进作用,可影响瘤体组织中MMP-2、MMP-7、MMP-9的表达水平,miR-155可提高MMP-2、MMP-7、MMP-9 mRNA表达水平及MMP-7蛋白表达水平。 结论:miR-155过表达增强 NSCLC细胞株的侵袭转移能力可能是通过增加MMP-2、MMP-7和MMP-9的表达实现的。 收起
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