摘要: 作为成纤维细胞生长因子家族的成员之一，FGF19(fibroblast growth factors19)基因的表达异常与肿瘤发生及演化密切相关，当它与其特异性受体FGFR4结合后，可促进细胞增殖并抑制凋亡，从而导致癌症发生。为研究FGFR4-FGF19信号通路异常与肝细胞癌(HCC... 展开 作为成纤维细胞生长因子家族的成员之一，FGF19(fibroblast growth factors19)基因的表达异常与肿瘤发生及演化密切相关，当它与其特异性受体FGFR4结合后，可促进细胞增殖并抑制凋亡，从而导致癌症发生。为研究FGFR4-FGF19信号通路异常与肝细胞癌(HCCs)发生之间的关联，本文采用PCR技术，以人源肝癌细胞cDNA为模板，扩增人FGF19基因的全长编码序列;并应用基因重组技术，成功构建了FGF19慢病毒表达载体pLenti-FGF19-IRES-ZsGreen1;并将该慢病毒载体与包装质粒通过脂质体共转染293FT细胞成功制备重组慢病毒，病毒活性滴度高达8×107 TU/ml;利用所制备的重组慢病毒感染三株低表达FGF19的人肝癌细胞sk-Hep-1、SNU182、PLC/PRF/5，通过定量PCR和Western Blot技术评价FGF19基因在转染细胞株中的表达水平，结果显示，无论在mRNA还是在蛋白水平，转染细胞株中FGF19基因的表达水平均显著高于宿主肝癌细胞，从而证明得到了稳定过表达外源FGF19基因的工程肝癌细胞株。为进一步研究FGF19表达异常或FGFR4-FGF19信号失调与肝癌发生之间的关联奠定了实验基础。 收起