摘要: 天然免疫是机体抵抗病原微生物的第一道防线。该系统通过不同的模式受体识别外源微生物，这些受体主要包括Toll样受体（Toll-like receptors，TLRs）、RIG-Ⅰ样受体(RIG-Ⅰ-like receptors，RLRs)及NOD样受体(NOD-like receptors，NLRs)。RLRs作为胞质... 展开 天然免疫是机体抵抗病原微生物的第一道防线。该系统通过不同的模式受体识别外源微生物，这些受体主要包括Toll样受体（Toll-like receptors，TLRs）、RIG-Ⅰ样受体(RIG-Ⅰ-like receptors，RLRs)及NOD样受体(NOD-like receptors，NLRs)。RLRs作为胞质内模式识别受体，在抗病毒天然免疫信号通路调节中发挥了重要作用。 RIG-Ⅰ(retinoic acid-inducible gene-Ⅰ)作为RLRs家族的重要成员，识别胞质病毒RNA。与病毒RNA结合后，RIG-Ⅰ构象发生变化，其激活后募集下游接头蛋白MAVS（mitochondrial antiviral signal）进而激活转录因子IRF3(interferonregulate factor3)和NF-κB(nuclear factor-κB)，诱导Ⅰ型干扰素及多种细胞因子的产生，引发抗病毒免疫反应。而过度的炎症反应又会对机体造成伤害，引发诸如全身性红斑狼疮等自身免疫疾病，因此对炎症反应的适当调控对维持机体的稳态至关重要。为了进一步探讨RIG-Ⅰ在抗病毒天然免疫中的调控机制，本研究以RIG-Ⅰ(N)为诱饵蛋白进行酵母双杂交实验，筛选到其相互作用蛋白SDC4。 SDC4属于蛋白聚糖家族，定位于细胞膜，参与调节细胞骨架形成、细胞增殖、分化、粘附及迁移等过程，在抗病毒天然免疫中的功能鲜有报道。本文的研究结果显示:第一，SDC4转录及蛋白表达水平及与RIG-Ⅰ的相互作用在仙台病毒(Sendai virus，SeV)诱导下增强;第二，过表达SDC4能够显著抑制由SeV及RIG-Ⅰ(N)激活的抗病毒天然免疫反应，沉默SDC4能够明显增强免疫反应，因此认为SDC4作为负调控因子参与RIG-Ⅰ介导的天然免疫信号传导;第三，SDC4参与调控病毒复制，过表达SDC4促进水泡性口炎病毒(VSV)的复制，而沉默SDC4显著抑制该病毒复制;第四，SDC4蛋白与去泛素酶CYLD存在较强的相互作用，SDC4胞质的可变区及CYLD酶活区参与了相互作用，二者的结合显著增强CYLD与RIG-Ⅰ的相互作用，促进对RIG-Ⅰ(N) K63位多聚泛素化链的去除，进而抑制了RIG-Ⅰ的活性;第五，SDC4与MAVS间也存在相互作用，竞争性地抑制了RIG-Ⅰ与MAVS间的信号传递。 综上所述，SDC4与CYLD的相互作用增强了CYLD与RIG-Ⅰ的结合能力，促进了CYLD对RIG-Ⅰ K63位多聚泛素链的去除，抑制了RIG-Ⅰ的活性;另外SDC4与RIG-Ⅰ、MAVS的结合均竞争性抑制了RIG-Ⅰ向MAVS的信号传递。通过以上两个途径SDC4负向调控了RIG-Ⅰ介导的抗病毒天然免疫信号传导，促进机体稳态的维持。 收起