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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 肝络欣丸是一种治疗乙型病毒型肝炎的中成药,由秦艽、蚂蚁等二十种药材组成。其中秦艽(G.macrophylla)包含龙胆苦苷(Gentiopicroside)、马钱苷酸(Loganicacid)、獐牙菜苦苷(Swertimarin)等重要的天然活性成分。龙胆苦苷等三种成分因具备抗炎、保肝... 展开 肝络欣丸是一种治疗乙型病毒型肝炎的中成药,由秦艽、蚂蚁等二十种药材组成。其中秦艽(G.macrophylla)包含龙胆苦苷(Gentiopicroside)、马钱苷酸(Loganicacid)、獐牙菜苦苷(Swertimarin)等重要的天然活性成分。龙胆苦苷等三种成分因具备抗炎、保肝等多种生理活性而受到了科研学者的广泛关注。同时秦艽中的挥发性成分据报道也具有抗炎的良好效果。 本文的研究目的是建立一个从泰艽中快速并大量制备出龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷的工艺。本实验通过提取、大孔吸附树脂纯化,最后经由反相制备色谱进行进一步的纯化,得到高纯度的活性成分,并对其进行了结构鉴定。该方法在分离纯化以上三种成分的同时,可以获得另一种成分,通过结构鉴定确定为獐牙菜苷。除此之外,我们也对秦艽中的挥发性成分进行了初步的研究。 本实验的实验结果如下: 1.优化了龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷三种成分同时进行HPLC检测的检测条件:甲醇∶0.1%TFA=25∶75,流速1mL/min,检测30min。三种物质的HPLC检测的紫外检测波长分别为243nm,241nm,238nm。此HPLC检测条件检测样品准确并高效。 2.通过三种提取方法(回流提取、超声辅助提取和闪式提取)的比较,最终确定采用超声辅助提取法,优化提取条件,最优条件为甲醇提取,固液比1∶12,提取时间12h,提取两次,最终龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷三种成分的提取率均高于95%。 3.通过对沉淀析出、纳滤、溶剂萃取法、大孔树脂吸附纯化方法的比较。大孔吸附树脂因其环境危害低(有机溶剂使用量小),产品回收率高,纯化倍数高的优势,最终确定用于后续纯化实验。筛选了10种大孔吸附树脂,确定采用SP850型大孔吸附树脂对粗提液中的活性成分进行动态吸附解析实验,产物中龙胆苦苷、马钱苷酸和獐牙菜苦苷的含量分别为51.73%、2.52%、0.89%,总含量为55.14%。 4.采用反相制备液相色谱对其进行制备,实验条件为:流动相为甲醇∶0.1%TFA=25∶75,流速10mL/min,上样量80mg树脂洗脱液浓缩浸膏。制各共得到四种成分,其中三种目标成分龙胆苦苷、马钱苷酸和獐牙菜苦苷的纯度分别为95.7%、93.6%、94.2%。回收率在90%以上。经核磁分析,第四种成分为獐牙菜苷。 5.采用水蒸气蒸馏法对秦艽中挥发性成分进行提取,并通过GC-MS确定其成分及含量。经鉴定,其中含有35种挥发性成分,包括烷类、醛类、酯类、羧酸类、及芳香族化合物。 收起
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