摘要: 背景和目的：微小RNAmiR-195在肝癌、HBV感染的肝组织及HBV阳性肝癌细胞株中的表达频繁下调，而在肝癌恶性生物学行为中起重要作用的IKBKB和CDK4是miR-195的预测靶基因。为明确miR-195是否负调控IKBKB、CDK4的表达及调控所在的基因表达水平而进行本研... 展开 背景和目的：微小RNAmiR-195在肝癌、HBV感染的肝组织及HBV阳性肝癌细胞株中的表达频繁下调，而在肝癌恶性生物学行为中起重要作用的IKBKB和CDK4是miR-195的预测靶基因。为明确miR-195是否负调控IKBKB、CDK4的表达及调控所在的基因表达水平而进行本研究。 方法：将miR-195的模拟物、阴性对照物及空白对照分三组转染至肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15中，转染后48小时提取总RNA行RT-PCR检测IKBKB和CDK4的mRNA表达，转染后96小时提取总蛋白行Western Blot检测IKBKB和CDK4的蛋白质表达。统计学分析各组mRNA及蛋白表达差异。 结果：在HepG2细胞中，与阴性对照相比，转染miR-195模拟物组的CDK4、IKBKB的mRNA表达均无统计学差异(P＞0.05)，而CDK4、IKBKB的蛋白表达都显著下调(P<0.05)。在HepG2.2.15细胞中，各组CDK4的mRNA未见扩增；与阴性对照相比，转染miR-195模拟物组的IKBKB mRNA表达也无统计学差异(P＞0.05)；与阴性对照相比，转染miR-195模拟物组的IKBKB和CDK4的蛋白表达亦显著下调(P<0.05)。 结论：肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15中，miR-195均抑制候选靶基因CDK4和IKBKB蛋白质表达，但在mRNA水平上未出现抑制，提示下调的miR-195丧失了对癌基因IKBKB和CDK4的抑制作用而促进了肝癌的发生发展。本实验尚未发现HBV对miR-195负调控IKBKB及CDK4的过程产生明显影响。 收起